公开(公告)号：KR101510666B1

公开(公告)日：2015-04-10

申请号：KR1020120114496

申请日：2012-10-16

Applicant: 선문대학교 산학협력단 ,  대한민국(해양수산부 국립수산물품질관리원장)

Inventor： 권세련 ,  김형준

IPC: C12N15/63 ,  C12Q1/68

Abstract: 본발명은병원체유전자를사용하지않는 PCR용양성대조구플라스미드에관한것으로서, 보다구체적으로는바이러스병원체유전자가삽입된기존의 PCR용양성대조구플라스미드에서, 바이러스병원체유전자를바이러스병원체유전자와동일한 PCR 산물크기를갖는외부유전자로치환된것을그 구성상의특징으로한다. 본발명에서제안하고있는병원체유전자를사용하지않는 PCR용양성대조구플라스미드에따르면, 바이러스병원체유전자와동일한 PCR 산물크기를가지면서상이한염기서열을갖는외부유전자로치환함으로써거짓양성반응인지여부에대한구분을명확히할 수있어 PCR을이용한감염성질병의진단시, 진단의정확성과신뢰성이보장될수 있다.

公开(公告)号：KR1020140048495A

公开(公告)日：2014-04-24

申请号：KR1020120114495

申请日：2012-10-16

Applicant: 선문대학교 산학협력단 ,  대한민국(해양수산부 국립수산물품질관리원장)

Inventor： 권세련 ,  김형준

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/63 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6848 ,  C12Q2549/119

Abstract: The present invention relates to a production method of a PCR positive control for detecting white spot syndrome virus having an excellent prevention effect of false positive reaction, and more specifically, to a production method of a PCR positive control which comprises: a step of performing a nested polymerase chain reaction (Nested-PCR) using pGEM-T easy vector DNA including an ampicillin resistance gene and a phage f1 region gene as a mold; and a step of cloning the amplified PCR product on a pGEM-T easy vector (Promega, USA) for producing chimeric plasmid.

Abstract translation: 本发明涉及具有优异的假阳性反应预防效果的白点综合征病毒的PCR阳性对照的制造方法，更具体地，涉及PCR阳性对照的制造方法，其包括： 使用包含氨苄青霉素抗性基因和噬菌体f1区域基因的pGEM-T易载体DNA作为模具进行巢式聚合酶链反应（Nested-PCR） 以及在pGEM-T easy载体（Promega，USA）上克隆扩增的PCR产物以产生嵌合质粒的步骤。

公开(公告)号：KR101782489B1

公开(公告)日：2017-09-28

申请号：KR1020160042234

申请日：2016-04-06

Applicant: 주식회사 시선바이오머티리얼스 ,  대한민국(해양수산부 국립수산물품질관리원장) ,  선문대학교 산학협력단

Inventor： 김형준 ,  권세련 ,  박재신 ,  박희경 ,  정진욱

IPC: C12Q1/70

CPC classification number: C12Q1/701 ,  C12N2760/20011 ,  C12Q2525/107 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2600/156

Abstract: 본발명은바이러스성출혈성패혈증바이러스(Viral Hemorrhagic Septicemia Virus, VHSV)의검출용 PNA 프로브, 이를이용한 VHSV의검출방법및 이를이용한양성대조군의오염에따른 VHSV 위양성의판별방법에관한것으로, 더욱자세하게는 VHSV의특정유전자를코딩하는 DNA 염기서열을선정하여증폭시킨다음, 증폭산물을특이적으로인식하는펩티드핵산(Peptide Nucleic Acid, PNA)으로혼성화시키고, 혼성화된산물의온도조절을통해온도별융해곡선을얻고, 상기얻은융해곡선의분석을통해융해온도로부터 VHSV를검출하거나검체의 VHSV의감염또는양성대조군에의한시료의오염여부를확인하는방법에관한것이다. 본발명은수산생물전염병원인바이러스인바이러스성출혈성패혈증바이러스의 N-유전자에특이적인펩티드핵산및 프라이머를이용하여증폭및 융해곡선을나타내게함으로써수산생물전염병원인바이러스를간단ㆍ신속ㆍ정확하게판별하고, 어류의상기바이러스의감염여부를검출할수 있는효과가있다.

公开(公告)号：KR101433370B1

公开(公告)日：2014-08-22

申请号：KR1020120114495

申请日：2012-10-16

Applicant: 선문대학교 산학협력단 ,  대한민국(해양수산부 국립수산물품질관리원장)

Inventor： 권세련 ,  김형준

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/63 ,  C12N15/11

Abstract: 본 발명은 거짓양성반응 방지 효과가 우수한 흰반점바이러스 검출용 PCR 양성대조구 제조 방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 (1) 암피실린 내성 유전자(ampicillin resistance gene) 및 파지 f1 영역 유전자(phage f1 region gene)를 포함하는 pGEM-T easy vector DNA를 주형으로 하여 네스티드 중합효소 연쇄반응(nested polymerase chain reaction, Nested-PCR)을 수행하는 단계 및 (2) 단계 (1)를 통해 증폭된 PCR 산물을 pGEM-T easy vector(Promega, USA)에 클로닝하여 키메릭 플라스미드(chimeric plasmid)를 제조하는 단계를 포함하는 것을 그 구성상의 특징으로 한다.
본 발명에서 제안하고 있는 거짓양성반응 방지 효과가 우수한 흰반점바이러스 검출용 PCR 양성대조구 제조 방법에 따르면, 암피실린 내성 유전자(ampicillin resistance gene) 및 파지 f1 영역 유전자(phage f1 region gene)를 포함하는 pGEM-T easy vector DNA를 주형으로 하여 네스티드 중합효소 연쇄반응(nested polymerase chain reaction, Nested-PCR)을 수행하고, 이를 통해 증폭된 PCR 산물을 각각 pGEM-T easy vector(Promega, USA)에 클로닝하여 키메릭 플라스미드(chimeric plasmid)를 제조함으로써, PCR 오염으로 인한 거짓양성 반응을 구분함으로서, 거짓양성 반응의 발생을 최소화하여 흰반점바이러스병의 정확한 진단이 가능하다.

公开(公告)号：KR1020140048496A

公开(公告)日：2014-04-24

申请号：KR1020120114496

申请日：2012-10-16

Applicant: 선문대학교 산학협력단 ,  대한민국(해양수산부 국립수산물품질관리원장)

Inventor： 권세련 ,  김형준

IPC: C12N15/63 ,  C12Q1/68

CPC classification number: C12N15/65 ,  C12Q1/686

Abstract: The present invention relates to plasmid for a PCR positive control without using pathogenic genes, and more specifically, to a plasmid in which a virus pathogenic gene in conventional plasmid for a PCR positive control is substituted into an external gene having the same PCR product size with the virus pathogenic gene. According to the plasmid for the PCR positive control without using the pathogenic genes provided by the present invention, a user can accurately distinguish a false positive reaction by substituting the virus pathogenic gene into the external gene having the same PCR product size and a different base sequence, thereby securing the accuracy and reliability of a diagnosis when diagnosing contagious diseases using PCR.

Abstract translation: 本发明涉及不使用致病基因的PCR阳性对照质粒，更具体地说，涉及用于PCR阳性对照的常规质粒中的病毒病原性基因被替换为具有相同PCR产物大小的外部基因的质粒， 病毒致病基因。 根据不使用本发明提供的致病基因的PCR阳性对照的质粒，用户可以通过将病毒致病基因置换成具有相同PCR产物大小和不同碱基序列的外部基因来准确地区分假阳性反应 从而确保使用PCR诊断感染性疾病时诊断的准确性和可靠性。