-
公开(公告)号：KR1020170043783A
公开(公告)日：2017-04-24
申请号：KR1020150143278
申请日：2015-10-14
Applicant: 아주대학교산학협력단
IPC: G01N33/58
Abstract: 본발명은개선된분할녹색형광단백질상보기법 (enhanced split-GFP complementation assay) 개발에관한것이다. 또한본 발명은녹색형광단백질두 절편에각각스트렙타비딘 (streptavidin)과스트렙타비딘결합펩타이드 (streptavidin binding peptide, SBP)을융합하여, 두녹색형광단백질절편이낮은농도에서도두 절편의상보에의한녹색형광신호를탐지하도록민감도를개선시킨방법에관한것이다. 또한, 본발명은개선된분할녹색형광단백질단편 (split-GFP fragment)을융합한, 세포질침투능을가진완전한이뮤노글로불린(immunoglobulin) 형태의항체에관한것이다. 또한, 본발명은상기개선된분할녹색형광단백질단편및 이를융합한세포질침투능을가지는항체를코딩하는폴리뉴클레오티드에관한것이다. 또한, 본발명은개선된분할녹색형광단백질상보기법 (enhanced split-GFP complementation assay)을이용하여완전한이뮤노글로불린(immunoglobulin) 형태의항체가세포막을침투하여세포질에위치하는것을직접적으로증명할수 있는방법에관한것이다. 또한, 본발명은개선된분할녹색형광단백질상보기법 (split-GFP complementation assay)을이용하여완전한이뮤노글로불린(immunoglobulin) 형태의항체가세포막을침투하여세포질에위치하는양을정량하는방법에관한것이다. 또한, 본발명은개선된분할녹색형광단백질상보기법 (split-GFP complementation assay)을이용하여기존세포침투물질이세포막을침투하여세포질에위치하는것을직접적으로증명할수 있는방법과세포질에위치하는양을정량하는방법에관한것이다. 특히, 본발명에따른개선된분할녹색형광단백질단편을융합하여세포질침투능을가지는완전한이뮤노글로불린형태의항체가가지는구조및 수용성에영향주지않으면서살아있는세포내부로침투및 세포질에잔류하는성질을확인할수 있다. 또한, 복잡하고비용이많이드는화학적표지없이유전공학적인펩타이드융합만으로상기개선된분할녹색형광단백질상보기법이가능하다. 또한, 세포질에위치하는세포질침투능을가지는완전한이뮤노글로불린형태의항체의양, 전체처리한양에대비하여세포질내부에위치하게되는비율및 세포내부농도역시계산할수 있다. 또한항체뿐만아니라기존세포침투물질에개선된분할녹색형광단백질단편을융합함으로써세포질내부에위치함을직접적으로증명할수 있으며, 세포질내부에위치하는항체의절대적인양을정량할수 있다. 또한상기시스템은세포질내부에침투한살아있는세포내부의녹색형광단백질에의한녹색형광을측정함으로써대량고속선별 (high throughput screening)에적용이가능하며, 세포질에높은효율로도달하는후보항체선별및 도출에활용할수 있다.
Abstract translation: 本发明涉及改进的分裂GFP互补测定法的开发。 本发明还涉及通过将链霉抗生物素蛋白和链霉抗生物素蛋白结合肽（SBP）与两种绿色荧光蛋白片段融合来生产绿色荧光蛋白的方法， 提高检测荧光信号的灵敏度的方法。 本发明还涉及具有细胞质穿透能力的完整免疫球蛋白类型的抗体，其与改进的分裂绿色荧光蛋白片段（分裂GFP片段）融合。 另外，本发明涉及上述改进的分段绿色荧光蛋白片段和编码具有与之融合的细胞质穿透能力的抗体的多核苷酸。 此外，本发明提供了一种直接证明完整的免疫球蛋白型抗体穿透细胞膜并使用增强型分裂GFP互补测定法定位于细胞质中的方法 Lt。 本发明是一种改进的分离的绿色荧光蛋白，补充技术（分裂-GFP互补试验）使用本发明涉及一种方法，用于量化其位于细胞质中的量，以穿透细胞膜来完成的免疫球蛋白（免疫球蛋白）形式的抗体 。 此外，本发明提供了直接证明现有细胞渗透剂穿透细胞膜并使用分裂GFP互补测定法定位于细胞质中的方法， 还有一种量化方法。 特别地，完成与融合到一种改进的拆分绿色荧光蛋白根据本发明的片段，而不在结构和水溶性与免疫球蛋白类型的抗体施加影响胞质chimtuneung确定残留在渗透的特性和细胞质进入活细胞 你可以。 另外，改进的分段绿色荧光蛋白互补技术仅可用于基因工程肽融合而不需要复杂且昂贵的化学标记。 此外，完整的免疫球蛋白形式与位于细胞质中的细胞质chimtuneung的抗体的量，在整个过程汉阳内部的浓度和比例要在有疑问的情况下定位在细胞的细胞质内可以计算的。 此外，通过将一个分流绿色荧光蛋白片段改善现行细胞浸润材料可直接不仅抗体证明了细胞质内的位置，可以量化位于细胞质内抗体的绝对量。 此外，该系统可以通过测量活细胞的绿色荧光的细胞质内的渗透的绿色荧光蛋白的内部，并利用该候选抗体筛选被应用到由（高通量筛选）的质工艺和在细胞质中引出到作为高效率 你可以。
-
-
公开(公告)号：KR101790669B1
公开(公告)日：2017-10-26
申请号：KR1020150143278
申请日：2015-10-14
Applicant: 아주대학교산학협력단
IPC: G01N33/58
Abstract: 본발명은개선된분할녹색형광단백질상보기법 (enhanced split-GFP complementation assay) 개발에관한것이다. 또한본 발명은녹색형광단백질두 절편에각각스트렙타비딘 (streptavidin)과스트렙타비딘결합펩타이드 (streptavidin binding peptide, SBP)을융합하여, 두녹색형광단백질절편이낮은농도에서도두 절편의상보에의한녹색형광신호를탐지하도록민감도를개선시킨방법에관한것이다. 또한, 본발명은개선된분할녹색형광단백질단편 (split-GFP fragment)을융합한, 세포질침투능을가진완전한이뮤노글로불린(immunoglobulin) 형태의항체에관한것이다. 또한, 본발명은상기개선된분할녹색형광단백질단편및 이를융합한세포질침투능을가지는항체를코딩하는폴리뉴클레오티드에관한것이다. 또한, 본발명은개선된분할녹색형광단백질상보기법 (enhanced split-GFP complementation assay)을이용하여완전한이뮤노글로불린(immunoglobulin) 형태의항체가세포막을침투하여세포질에위치하는것을직접적으로증명할수 있는방법에관한것이다. 또한, 본발명은개선된분할녹색형광단백질상보기법 (split-GFP complementation assay)을이용하여완전한이뮤노글로불린(immunoglobulin) 형태의항체가세포막을침투하여세포질에위치하는양을정량하는방법에관한것이다. 또한, 본발명은개선된분할녹색형광단백질상보기법 (split-GFP complementation assay)을이용하여기존세포침투물질이세포막을침투하여세포질에위치하는것을직접적으로증명할수 있는방법과세포질에위치하는양을정량하는방법에관한것이다. 특히, 본발명에따른개선된분할녹색형광단백질단편을융합하여세포질침투능을가지는완전한이뮤노글로불린형태의항체가가지는구조및 수용성에영향주지않으면서살아있는세포내부로침투및 세포질에잔류하는성질을확인할수 있다. 또한, 복잡하고비용이많이드는화학적표지없이유전공학적인펩타이드융합만으로상기개선된분할녹색형광단백질상보기법이가능하다. 또한, 세포질에위치하는세포질침투능을가지는완전한이뮤노글로불린형태의항체의양, 전체처리한양에대비하여세포질내부에위치하게되는비율및 세포내부농도역시계산할수 있다. 또한항체뿐만아니라기존세포침투물질에개선된분할녹색형광단백질단편을융합함으로써세포질내부에위치함을직접적으로증명할수 있으며, 세포질내부에위치하는항체의절대적인양을정량할수 있다. 또한상기시스템은세포질내부에침투한살아있는세포내부의녹색형광단백질에의한녹색형광을측정함으로써대량고속선별 (high throughput screening)에적용이가능하며, 세포질에높은효율로도달하는후보항체선별및 도출에활용할수 있다.
-
-
Search Results
3
records
(took 0.018 seconds)
