公开(公告)号：KR100691835B1

公开(公告)日：2007-03-15

申请号：KR1020040096012

申请日：2004-11-22

Applicant: 재단법인서울대학교산학협력재단 ,  주식회사 옵티팜

Inventor： 한재용 ,  정진경 ,  임정묵 ,  김덕경

IPC: C07K14/46 ,  C12Q1/68 ,  G01N33/53

Abstract: 본 발명은 조류의 원시생식세포 (PGCs) 동정용 마커, 상기 마커를 이용한 조류 원시생식세포의 동정방법, 조류 카이메라의 제조방법 및 조류 형질전환체의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 조류의 원시생식세포 동정용 마커는 SSEA (stage-specific embryonic antigen)-3, SSEA-4, 인테그린 α6, 인테그린 β1, STA (
Solanum tuberosum agglutinin) 및 DBA (
Dolichos biflorus agglutinin)로 구성된 군으로부터 선택되는 최소 1종의 마커이며, 본 발명의 마커를 이용하면 조류 원시생식세포를 손쉽고 정확하게 동정할 수 있으므로, PGCs를 이용한 조류 형질전환 시스템을 개발하는데 유용하게 사용될 수 있다.
원시생식세포, SSEA, 렉틴, 인테그린, STA, DBA

公开(公告)号：KR1020060056813A

公开(公告)日：2006-05-25

申请号：KR1020040096012

申请日：2004-11-22

Applicant: 재단법인서울대학교산학협력재단 ,  주식회사 옵티팜

Inventor： 한재용 ,  정진경 ,  임정묵 ,  김덕경

IPC: C07K14/46 ,  C12Q1/68 ,  G01N33/53

CPC classification number: C07K14/46 ,  C12Q1/6876 ,  C12Q1/6895 ,  C12Q2600/158 ,  G01N33/53

Abstract: 본 발명은 조류의 원시생식세포 (PGCs) 동정용 마커, 상기 마커를 이용한 조류 원시생식세포의 동정방법, 조류 카이메라의 제조방법 및 조류 형질전환체의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 조류의 원시생식세포 동정용 마커는 SSEA (stage-specific embryonic antigen)-3, SSEA-4, 인테그린 α6, 인테그린 β1, STA (
Solanum tuberosum agglutinin) 및 DBA (
Dolichos biflorus agglutinin)로 구성된 군으로부터 선택되는 최소 1종의 마커이며, 본 발명의 마커를 이용하면 조류 원시생식세포를 손쉽고 정확하게 동정할 수 있으므로, PGCs를 이용한 조류 형질전환 시스템을 개발하는데 유용하게 사용될 수 있다.
원시생식세포, SSEA, 렉틴, 인테그린, STA, DBA

公开(公告)号：KR1020050017850A

公开(公告)日：2005-02-23

申请号：KR1020030055326

申请日：2003-08-11

Applicant: 주식회사 옵티팜 ,  재단법인서울대학교산학협력재단

Inventor： 한재용 ,  임정묵 ,  이영목 ,  김진남 ,  홍영호 ,  한범구

IPC: A01K67/00

CPC classification number: C12N15/873 ,  A01K67/0271 ,  A01K2217/05 ,  A01K2227/30 ,  C12N5/061 ,  C12N2500/44 ,  C12N2501/105 ,  C12N2501/115 ,  C12N2501/235

Abstract: PURPOSE: A method for producing avian chimera using spermatogonial cells and avian chimera produced therefrom are provided, thereby reducing the production time and improving production efficiency than using embryo stem cells because the spermatogonial cells are easily obtained in a large quantity from matured fowls, and mass-produce germline chimera when they are transplanted into the testicle. CONSTITUTION: The method for producing avian chimera using spermatogonial cells comprises the steps of: (a) obtaining the testicle from a donor fowl; (b) isolating the testis cell population from the testicle by treating the testicle tissue with collagenase, trypsin or a mixture thereof; (c) culturing the testis cell population in a medium containing cell growth factor to obtain the spermatogonial cell population; and (d) injecting the cultured spermatogonial cell population or testis cell population into the avian testicle, wherein the cell growth factor is selected from fibroblast growth factor, insulin-like growth factor-1, stem cell factor and a combination thereof.

Abstract translation: 目的：提供使用精原细胞和禽类嵌合体生产鸟类嵌合体的方法，与使用胚胎干细胞相比，减少了生产时间并提高了生产效率，因为精原细胞很容易从成熟的家禽获得，质量 - 将种系嵌合体移植到睾丸中时产生。 构成：使用精原细胞生产禽嵌合体的方法包括以下步骤：（a）从供体家禽获得睾丸; （b）通过用胶原酶，胰蛋白酶或其混合物处理睾丸组织从睾丸分离睾丸细胞群; （c）在含有细胞生长因子的培养基中培养睾丸细胞群以获得精原细胞群; 和（d）将培养的精原细胞群或睾丸细胞群注射到禽睾丸中，其中细胞生长因子选自成纤维细胞生长因子，胰岛素样生长因子-1，干细胞因子及其组合。

公开(公告)号：KR100569168B1

公开(公告)日：2006-04-07

申请号：KR1020030055119

申请日：2003-08-08

Applicant: 주식회사 옵티팜 ,  재단법인서울대학교산학협력재단

Inventor： 한재용 ,  홍영호 ,  임정묵 ,  이영목 ,  이막순 ,  정진경

IPC: C12N5/07

CPC classification number: C12N5/061 ,  A01K2217/05 ,  A01K2227/30 ,  C12N5/0611 ,  C12N15/873 ,  C12N2501/105 ,  C12N2501/115 ,  C12N2501/125 ,  C12N2501/13 ,  C12N2501/235 ,  C12N2502/246

Abstract: 본 발명은 (a) 조류의 정소를 수득하는 단계; (b) 상기 정소로부터 정소 세포 파퓰레이션 (population)을 분리하는 단계; 및 (c) 상기 정소 세포 파퓰레이션에 포함된 정원줄기세포를 기저세포 상에서 세포성장인자가 포함된 배지에서 배양하는 단계를 포함하는 조류 정원줄기세포의 장기 배양방법, 조류 정원줄기세포의 파퓰레이션 (population) 및 형질전환 조류의 생산방법에 관한 것이다.
정원줄기세포, 조류, 닭, 배양, 장기배양, 기저세포, 성장인자, 정원세포

公开(公告)号：KR1020050015866A

公开(公告)日：2005-02-21

申请号：KR1020030055119

申请日：2003-08-08

Applicant: 주식회사 옵티팜 ,  재단법인서울대학교산학협력재단

Inventor： 한재용 ,  홍영호 ,  임정묵 ,  이영목 ,  이막순 ,  정진경

IPC: C12N5/07

CPC classification number: C12N5/061 ,  A01K2217/05 ,  A01K2227/30 ,  C12N5/0611 ,  C12N15/873 ,  C12N2501/105 ,  C12N2501/115 ,  C12N2501/125 ,  C12N2501/13 ,  C12N2501/235 ,  C12N2502/246

Abstract: PURPOSE: A method for culturing avian spermatogonial stem cells and the avian spermatogonial stem cells prepared thereby are provided, thereby initially establishing the cultivation condition of the avian spermatogonial stem cells and identifying characteristics of the avian spermatogonial stem cells. CONSTITUTION: The method for culturing avian spermatogonial stem cells comprises the steps of: (a) obtaining a testicle of fowls; (b) isolating the population of texticular cells from the testicle by treating the testicle with one selected from chollagenase, trypsin or a mixture thereof; and (c) culturing the avian spermatogonial stem cells in the texticular cell population on basal cells in a medium containing cell growth factors at 37 deg. C, wherein the growth stimulating factor is selected from insulin-like growth factor-1, stem cell factor, glial derived neurotrophic factor or the combination thereof.

Abstract translation: 目的：提供培养禽类精原干细胞和由此制备的禽类精原干细胞的方法，从而初步建立禽类精原干细胞的培养条件，并确定禽类精原干细胞的特征。 构成：培养禽类精原干细胞的方法包括以下步骤：（a）获得家禽睾丸; （b）通过用选自chollagenase，胰蛋白酶或其混合物的一种处理睾丸来分离睾丸细胞群体; 和（c）在含有细胞生长因子的培养基中于37℃培养基底细胞的细胞核细胞群体中的禽精原干细胞。 C，其中生长刺激因子选自胰岛素样生长因子-1，干细胞因子，胶质衍生的神经营养因子或其组合。

公开(公告)号：KR100569163B1

公开(公告)日：2006-04-07

申请号：KR1020030055326

申请日：2003-08-11

Applicant: 주식회사 옵티팜 ,  재단법인서울대학교산학협력재단

Inventor： 한재용 ,  임정묵 ,  이영목 ,  김진남 ,  홍영호 ,  한범구

IPC: A01K67/00

CPC classification number: C12N15/873 ,  A01K67/0271 ,  A01K2217/05 ,  A01K2227/30 ,  C12N5/061 ,  C12N2500/44 ,  C12N2501/105 ,  C12N2501/115 ,  C12N2501/235

Abstract: 본 발명은 (a) 공여체 조류의 정소를 수득하는 단계; (b) 상기 정소로부터 정소 세포 파퓰레이션 (population)을 분리하는 단계; (c) 상기 정소 세포 파퓰레이션 (population)을 세포성장인자가 포함된 배지에서 배양하여 정원 세포 파퓰레이션을 수득하는 단계; 및 (d) 상기 배양한 정원 세포 파퓰레이션 또는 상기 정소 세포 파퓰레이션을 수용체 조류 정소에 주입하여 카이메라를 생산하는 단계를 포함하는 정원세포를 이용한 조류 카이메라의 생산방법 및 생식선 조류 카이메라에 관한 것이다.
카이메라, 생식선 카이메라, 정원세포, 조류, 닭, 배양, 정소세포

公开(公告)号：KR1020040073174A

公开(公告)日：2004-08-19

申请号：KR1020030009167

申请日：2003-02-13

Applicant: 주식회사 옵티팜

Inventor： 한재용 ,  김진남 ,  김미아 ,  박태섭 ,  임정묵

IPC: C12N15/00

Abstract: PURPOSE: A method for isolating gonadal primordial germ cells and a method for preparing germline chimeric aves are provided, thereby improving purity and isolation yield of gonadal primordial germ cells, and improving preparation efficiency of germline chimeric aves. CONSTITUTION: The method for isolating gonadal primordial germ cells comprises the steps of: (a) treating gonadal primordial germ tissue cells isolated from embryos of aves with a primordial germ cell-specific first antibody; (b) treating the antibody-bound gonadal primordial germ tissue cells with microbeads bound with a second antibody which has magnetism and binds with the first antibody; and (c) cleansing the resulting product of step (b) and separating the gonadal primordial germ cell-second antibody-microbead complex. The method for preparing germline chimeric aves comprises the steps of: (a) treating gonadal primordial germ tissue cells isolated from embryos of aves with a primordial germ cell-specific first antibody; (b) treating the antibody-bound gonadal primordial germ tissue cells with microbeads bound with a second antibody which has magnetism and binds with the first antibody; (c) cleansing the resulting product of step (b) and separating the gonadal primordial germ cell-second antibody-microbead complex; (d) introducing the isolated gonadal primordial germ cells into the embryo of a recipient egg; and (e) culturing and hatching the egg.

Abstract translation: 目的：提供一种分离性腺原始生殖细胞的方法和制备种系嵌合抗体的方法，从而提高性腺原始生殖细胞的纯度和分离产量，提高种系嵌合抗体的制备效率。 构成：分离性腺原始生殖细胞的方法包括以下步骤：（a）用原始生殖细胞特异性第一抗体处理从禽类胚胎分离的性腺原始胚芽组织细胞; （b）用与具有磁性并与第一抗体结合的第二抗体结合的微珠处理抗体结合的性腺原始细菌组织细胞; 和（c）清洗步骤（b）的所得产物并分离性腺原始生殖细胞 - 第二抗体 - 微珠复合物。 用于制备种系嵌合抗体的方法包括以下步骤：（a）用原始生殖细胞特异性第一抗体处理从禽类胚胎分离的性腺原始胚芽组织细胞; （b）用与具有磁性并与第一抗体结合的第二抗体结合的微珠处理抗体结合的性腺原始细菌组织细胞; （c）清洗步骤（b）的所得产物并分离性腺原始生殖细胞 - 第二抗体 - 微珠复合物; （d）将分离的性腺原始生殖细胞引入受体卵的胚胎; 和（e）培养和孵化蛋。

公开(公告)号：KR100470170B1

公开(公告)日：2005-02-04

申请号：KR1020030009167

申请日：2003-02-13

Applicant: 주식회사 옵티팜

Inventor： 한재용 ,  김진남 ,  김미아 ,  박태섭 ,  임정묵

IPC: C12N15/00

Abstract: PURPOSE: A method for isolating gonadal primordial germ cells and a method for preparing germline chimeric aves are provided, thereby improving purity and isolation yield of gonadal primordial germ cells, and improving preparation efficiency of germline chimeric aves. CONSTITUTION: The method for isolating gonadal primordial germ cells comprises the steps of: (a) treating gonadal primordial germ tissue cells isolated from embryos of aves with a primordial germ cell-specific first antibody; (b) treating the antibody-bound gonadal primordial germ tissue cells with microbeads bound with a second antibody which has magnetism and binds with the first antibody; and (c) cleansing the resulting product of step (b) and separating the gonadal primordial germ cell-second antibody-microbead complex. The method for preparing germline chimeric aves comprises the steps of: (a) treating gonadal primordial germ tissue cells isolated from embryos of aves with a primordial germ cell-specific first antibody; (b) treating the antibody-bound gonadal primordial germ tissue cells with microbeads bound with a second antibody which has magnetism and binds with the first antibody; (c) cleansing the resulting product of step (b) and separating the gonadal primordial germ cell-second antibody-microbead complex; (d) introducing the isolated gonadal primordial germ cells into the embryo of a recipient egg; and (e) culturing and hatching the egg.

Abstract translation: 目的：提供分离性腺原始生殖细胞的方法和制备种系嵌合体的方法，从而提高性腺原始生殖细胞的纯度和分离产率，并提高种系嵌合体的制备效率。 构成：分离性腺原始生殖细胞的方法包括以下步骤：（a）用原始生殖细胞特异性第一抗体处理从雏鸟胚胎分离的性腺原始生殖细胞组织细胞; （b）用具有磁性并与第一抗体结合的第二抗体结合的微珠处理结合抗体的性腺原始生殖细胞组织细胞; 和（c）清洗步骤（b）的所得产物并分离性腺原始生殖细胞 - 第二抗体 - 微珠复合物。 用于制备种系嵌合体的方法包括以下步骤：（a）用原始生殖细胞特异性第一抗体处理从雏鸟胚胎分离的性腺原始生殖细胞组织细胞; （b）用具有磁性并与第一抗体结合的第二抗体结合的微珠处理结合抗体的性腺原始生殖细胞组织细胞; （c）清洗步骤（b）的所得产物并分离生殖细胞原始生殖细胞 - 第二抗体 - 微珠复合物; （d）将分离的性腺原始生殖细胞引入受体卵的胚胎中; 和（e）培养和孵化鸡蛋。

公开(公告)号：KR1020040051765A

公开(公告)日：2004-06-19

申请号：KR1020020079428

申请日：2002-12-13

Applicant: 주식회사 옵티팜

Inventor： 한재용 ,  김태민 ,  임정묵

IPC: C12N5/16

CPC classification number: C12N15/8771 ,  A01K67/0273 ,  A01K2227/101 ,  A61D19/04 ,  C12N5/16 ,  C12N13/00 ,  C12N2510/04 ,  C12N2517/00

Abstract: PURPOSE: A method for inactivating nuclear chromosomal materials of recipient oocyte for manufacturing clone embryo from somatic cell using X-ray irradiation is provided, thereby increasing a blastocyst development rate and replacing the physical nucleus removing method. CONSTITUTION: The method for inactivating nuclear chromosomal materials of recipient oocyte for manufacturing clone embryo from somatic cell comprises irradiating X-ray to the recipient oocyte. The method for producing somatic cell cloned animals comprises the steps of: (a) irradiating X-ray to the recipient oocyte; (b) transplanting the somatic cell donor nucleus into the recipient oocyte; (c) inducing the re-programming of the nucleus transplanted somatic cell cloned embryo; (d) inducing the activity of the re-programmed somatic cell cloned embryo; (e) inducing the development of blastocyst of the activated somatic cell cloned embryo; and (f) inducing the implantation and generation of blastocyst, wherein the X-ray irradiation is carried out at 15-18 kVp; the X-ray irradiation is carried out at 2-8 mA; and the X-ray irradiation is carried out for 10-60 seconds.

Abstract translation: 目的：提供使用X射线照射从体细胞制备克隆胚胎的受体卵母细胞核染色体材料灭活的方法，从而提高胚泡发育速度并取代物理核去除方法。 构成：从体细胞中制备克隆胚胎的受体卵母细胞的核染色体材料的灭活方法包括向受体卵母细胞照射X射线。 产生体细胞克隆动物的方法包括以下步骤：（a）向受体卵母细胞照射X射线; （b）将体细胞供体核移植到受体卵母细胞中; （c）诱导细胞移植体细胞克隆胚胎的重新编程; （d）诱导重编程体细胞克隆胚胎的活性; （e）诱导活化的体细胞克隆胚胎的胚泡的发育; 和（f）诱导胚泡的植入和产生，其中X射线照射在15-18kVp下进行; X射线照射在2-8mA进行; 并进行X射线照射10〜60秒。

公开(公告)号：KR100516881B1

公开(公告)日：2005-09-27

申请号：KR1020020079428

申请日：2002-12-13

Applicant: 주식회사 옵티팜

Inventor： 한재용 ,  김태민 ,  임정묵

IPC: C12N5/16

Abstract: 본 발명은 체세포 복제 기술에서 체세포 복제수정란 생산을 위한 필수 공정인 수핵난자의 물리적인 탈핵 과정을 대체할 수 있는 수핵난자 핵의 불활화 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 X선 조사를 이용한 수핵난자 핵 유전 물질의 불활화 방법에 관한 것이다. 본 발명은 X선을 이용한 체세포 복제수정란의 제조를 위한 수핵난자 핵의 불활화 방법 및 상기 방법을 포함하는 체세포 복제동물의 생산 방법을 제공한다. 본 발명의 수핵난자 핵의 불활화 방법은 물리적 탈핵방법을 대체할 수 있으며, 본 발명의 방법에 의하여 제조된 체세포 복제수정란은 이후의 배반포 발달율이 높으므로 체세포 복제동물의 생산에 유용하게 적용될 수 있다.