公开(公告)号：KR100320785B1

公开(公告)日：2002-06-24

申请号：KR1019980052271

申请日：1998-12-01

Applicant: 한국과학기술연구원

Inventor： 이대실 ,  고석훈 ,  김중수 ,  박병철

IPC: C12N15/60 ,  C12N1/21

Abstract: 본 발명은 호열성 균주인 Thermus caldophilus
GK24 균주로부터 분리한 내열성 트레할로스 합성효소의 유전자 염기서열과 이 유전자를 포함하는 벡터, 상기 벡터로 형질전환된 재조합 균주 및 이 균주를 배양하여 얻은 재조합 트레할로스 합성효소 그리고 재조합 트레할로스 합성효소를 맥아당 또는 전분 가수분해 산물과 반응시켜 트레할로스를 제조하는 방법에 관한 것으로 Thermus caldophilus
GK24균주를 배양하여 배양액으로부터 트레할로스 합성효소를 분리하여 정제한 후 이 효소의 특성을 조사하고 이 트레할로스 합성 효소 유전자를 클로닝한 다음 이 유전자를 포함하는 벡터를 제작하고 이 벡터를 대장균에 도입하여 형질전환된 대장균을 제조한 후 이 대장균을 배양한 결과, 맥아당과 반응하여 생분자를 안정화시키고 건조 또는 냉동식품에 안정제로 작용하며 진단시약과 약제약상의 첨가제로 사용될 뿐만 아니라 재조합 효소를 포함한 생리활성 단백질의 열응집과 열변성을 방지하는 안정제로 그리고 화장품에 있어 보습제로 유용한 알파,알파-트레할로스(α,α-trehalose)와 알파,베타-트레할로스(α,β-trehalose)를 제조하는 재조합 트레할로스 합성효소를 대량으로 생산하는 뛰어난 효과가 있다.

公开(公告)号：KR100266754B1

公开(公告)日：2000-09-15

申请号：KR1019980004315

申请日：1998-02-13

Applicant: 한국과학기술연구원

Inventor： 이대실 ,  김중수 ,  고석훈

IPC: C12N15/52 ,  C12N15/70

Abstract: PURPOSE: A nucleotide sequence of UDP-xylose pyrophosphorylase(UXPase) derived from Thermus caldophilus, its expression vector and a producing method thereof are provided which can be used in synthesizing UDP-xylose and various sugar-nucleic acid salts. CONSTITUTION: Thermostable UDP-xylose pyrophosphorylase(UXPase) isolated from Thermus caldophilus GK24 can mainly synthesize UDP-xylose and additionally synthesize various sugar-nucleic acid salts, such as TDP-glucose, UDP-glucose, UDP-mannose, UDP-N-acetylglucosamine, and UDP-galactose and has the nucleotide sequence shown in Fig. 2. A transformant E. coli MV1184/pGLM(KCTC 8868P) is prepared by transforming E. coli MV1184 with pGLM containing the thermostable UXPase coding gene. The thermostable UXPase is produced by incubating E. coli MV1184/pGLM(KCTC 8868P).

Abstract translation: 目的：提供源自嗜热栖热菌的UDP-木糖焦磷酸化酶（UXPase）的核苷酸序列及其表达载体及其制备方法，其可用于合成UDP-木糖和各种糖 - 核酸盐。 构成：从嗜热栖热菌GK24分离的热稳定的UDP-木糖焦磷酸化酶（UXPase）可主要合成UDP-木糖，另外合成各种糖 - 核酸盐，如TDP-葡萄糖，UDP-葡萄糖，UDP-甘露糖，UDP-N-乙酰葡糖胺 和UDP-半乳糖，并具有图1所示的核苷酸序列。 通过用包含耐热的UXPase编码基因的pGLM转化大肠杆菌MV1184来制备转化体大肠杆菌MV1184 / pGLM（KCTC 8868P）。 耐热型UXPase通过温育大肠杆菌MV1184 / pGLM（KCTC 8868P）产生。

公开(公告)号：KR100076601B1

公开(公告)日：1994-08-23

申请号：KR1019910022240

申请日：1991-12-05

Applicant: 한국과학기술연구원

Inventor： 이대실 ,  권석태 ,  고정헌 ,  고석훈 ,  정욱준 ,  박병철

IPC: C12N9/00

公开(公告)号：KR1019940001855B1

公开(公告)日：1994-03-09

申请号：KR1019910022240

申请日：1991-12-05

Applicant: 한국과학기술연구원

Inventor： 이대실 ,  권석태 ,  고정헌 ,  고석훈 ,  정욱준 ,  박병철

IPC: C12N9/00

Abstract: Separation and purification of specific protein from fused protein are achieved by changing physical properties of proteins with affinity peptide. This method comprises : A) introducing DNA sequence which codes 7-15 amino acids at the binding point of aimed protein coding genes and other peptides or protein coding gene; B)forming affinity peptide composed of 7-15 amino acids between protein and other peptide; and C) identifying protein with different affinty to metal salt. The above affinty peptide is a homopeptide which is composed of 7-15 glutamic acid or 7-15 hystidine. The method can purify proinsulin.

Abstract translation: 从融合蛋白中分离和纯化特异性蛋白质是通过用亲和肽改变蛋白质的物理性质来实现的。 该方法包括：A）引入编码目的蛋白编码基因和其他肽或蛋白质编码基因的结合点上的7-15个氨基酸的DNA序列; B）在蛋白质和其他肽之间形成由7-15个氨基酸组成的亲和肽; 和C）鉴定与金属盐不同的蛋白质。 上述亲和肽是由7-15谷氨酸或7-15个胱氨酸组成的同肽。 该方法可以净化胰岛素原。

公开(公告)号：KR1019930013100A

公开(公告)日：1993-07-21

申请号：KR1019910022240

申请日：1991-12-05

Applicant: 한국과학기술연구원

Inventor： 이대실 ,  권석태 ,  고정헌 ,  고석훈 ,  정욱준 ,  박병철

IPC: C12N9/00

Abstract: 본 발명은 목적단백질이 기타의 단백질과 융합된 형태로 발현되는 융합단백질로 부터 목적 단백질을 분리, 정제하는 데에 있어서 7-15개의 아미노산으로 구성된 친화펩티드를 도입함으로써 물성의 변화를 일으키고 이를 이용하여 목적단백질을 용이하게 고순도로 분리, 정제하는 방법에 관한 것이다. 또한 본 발명은 이에 사용될 수 있는 발현 플라스미드 및 이에 의해 형질전환된 대장균 균주를 제공한다.

公开(公告)号：KR1019990069817A

公开(公告)日：1999-09-06

申请号：KR1019980004315

申请日：1998-02-13

Applicant: 한국과학기술연구원

Inventor： 이대실 ,  김중수 ,  고석훈

IPC: C12N15/52 ,  C12N15/70

Abstract: 본 발명은 고온성 균주인
Thermus caldophilus GK24로부터 신규한 내열성 UDP-xylose pyrophosphorylase를 분리 정제하여 유전자의 염기서열을 결정하고, 결정된 염기서열에 해당하는 DNA를 발현벡터에 삽입하고 이 발현벡터로 대장균을 형질전환시켜 배양하므로써 UDP-xylose pyrophosphorylase를 대량 생산하는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 UDP-xylose pyrophosphorylase는 주반응으로 UDP-xylose를 합성하고 부반응으로 다양한 당 핵산염을 합성하는 효과가 있다.

公开(公告)号：KR1020000037638A

公开(公告)日：2000-07-05

申请号：KR1019980052271

申请日：1998-12-01

Applicant: 한국과학기술연구원

Inventor： 이대실 ,  고석훈 ,  김중수 ,  박병철

IPC: C12N15/60 ,  C12N1/21

CPC classification number: C12N15/70 ,  C12N15/09 ,  C12Y204/01245

Abstract: PURPOSE: New recombinant trehalose synthase and the expression vector including its gene are provided. Nucleotide sequences of the trehalose synthase are isolated from thermophilic strain, Thermus caldophilus GK24, and a method for production of trehalose using recombinant enzyme is also provided. CONSTITUTION: A trehalose synthase is the enzyme which converts maltose to alpha, alpha-trehalose and alpha, beta-trehalose. The recombinant trehalose synthase is over-expressed in Escherichia coli using the expression vector including its gene which is isolated from Thermus caldophilus GK24. The trehalose is obtained by the reaction of the purified recombinant trehalose synthase with maltose or hydrolytic product of starch.

Abstract translation: 目的：提供新的重组海藻糖合成酶及其基因表达载体。 从嗜热菌株Thermus caldophilus GK24中分离出海藻糖合成酶的核苷酸序列，并且还提供了使用重组酶生产海藻糖的方法。 构成：海藻糖合酶是将麦芽糖转化为α，α-海藻糖和α，β-海藻糖的酶。 重组海藻糖合成酶在大肠杆菌中使用包括其从Thermus caldophilus GK24分离的基因的表达载体过表达。 通过纯化的重组海藻糖合成酶与淀粉的麦芽糖或水解产物的反应获得海藻糖。