Abstract:
본 발명은 고성능 액체 크로마토그래피에 기초한 임산부의 뇨 중의 에스트리올 3-글루쿠로나이드 (estriol 3-glucuronide)와 에스트리올 16-글루쿠로나이드 (estriol 16-glucuronide)를 검출하는 방법 및 그 장치에 관한 것으로서, 본 발명에 의한 뇨 중의 에스트리올 3-글루쿠로나이드 및 에스트리올 16-글루쿠로나이드의 검출 장치는, 고성능 액체크로마토그래피로 뇨 중의 에스트리올 3-글루쿠로나이드 및 에스트리올 16-글루쿠로나이드를 검출하는 장치에 있어서, 트리에틸아민 완충액 공급부 및 아세토니트릴 공급부를 포함하는 전개용매 공급부; 상기 전개용매 공급부와 연결되어 전개용매의 공급과 차단을 조절하여 각 시간대별로 필요한 전개용매만을 흘려주도록 조절하는 전개용매 스위칭 밸브; 상기 전개용매 스위칭 밸브의 조절을 통해 트리에틸아민 완충액이 흐르는 동안 검출 대상인 뇨로부터 단백질 및 분석방해물질을 제거하고 에스트리올 3-글루쿠로나이드 및 에스트리올 16-글루쿠로나이드를 농축하는 농축컬럼; 상기 전개용매 스위칭 밸브의 조절을 통해 아세토니트릴이 공급되어, 상기 농축컬럼을 통해 농축된 에스트리올 3-글루쿠로나이드 및 에스트리올 16-글루쿠로나이드가 상기 농축컬럼으로부터 유출된 후 그 농도를 분석하기 위해 유입되는 농도 분석용 분석컬럼; 및 상기 농축컬럼으로의 유입 및 유출 여부를 조절하는 컬럼 스위칭 밸브를 포함하는 것을 특징으로 한다. 본 발명은 임산부의 뇨 내의 에스트리올 3-글루쿠로나이드와 에스트리올 16-글루쿠로나이드의 농도를 효과적으로 측정하기 위하여 뇨시료를 고성능 액체 크로마토그래피의 컬럼 스위칭을 이용하여 단백질 제거와 농축조작을 동시에 수행할 수 있는 컬럼을 통과하게 함으로써 별도의 추출 조작이나 유도체화 조작 없이도 뇨 중 단백질이나 분석방해물질의 제거 및 뇨 내의 에스트리올 3-글루쿠로나이드 와 에스트리올 16-글루쿠로나이드의 농축을 연속적으로 수행할 수 있으므로 시간과 비용을 현저히 줄일 수 있으며, 뇨 중 단백질 및 분석방해물질의 제거와, 농축 및 분석의 각 단계에 적합한 각각 다른 전개용매을 사용함으로써 우수한 감도를 확보할 수 있다. 이로써 임신시 태아의 발달과정을 추적하는데 유용한 에스트리올 3-글루쿠로나이드 (estriol 3-glucuronide)와 에스트리올 16-글루쿠로나이드 (estriol 16- glucuronide)의 뇨 중 농도를 지속적으로 모니터링함으로써 태아와 산모의 건강지표를 결정하는 데에 지표로 이용될 수 있다.
Abstract:
PURPOSE: Provided is a method for detecting estriol 3-glucuronide and estriol 16-glucuronide, which has no need of pretreating urine samples, ensures high analytical sensitivity even with a small amount of sample and gives excellent operation property. CONSTITUTION: The method for detecting estriol 3-glucuronide and estriol 16-glucuronide in urine by using HPLC comprises the steps of: introducing a urine sample into a concentration column(5) in which proteins and analytically undesirable materials are removed from the sample and the sample is concentrated in the presence of buffered triethylamine solution as an eluting solvent; and terminating the introduction of the buffered triethylamine solution after the completion of the concentration step, introducing acetonitrile as an eluting solvent to elute the concentrated estriol 3-glucuronide and estriol 16-glucuronide out of the concentration column, and then introducing the eluted materials into an analytic column(6) to perform analysis for concentration. In the method, the kind of eluting solvent is determined by a switching valve(3). Additionally, injection of the sample into the concentration column(5) and ejection of the concentrated sample from the concentration column(5) are determined by another switching valve(4).