公开(公告)号：WO2010131821A1

公开(公告)日：2010-11-18

申请号：PCT/KR2009/005899

申请日：2009-10-14

Applicant: 한국과학기술연구원 ,  김상헌 ,  김수현 ,  정영미 ,  한민

Inventor： 김상헌 ,  김수현 ,  정영미 ,  한민

IPC: C12N5/074

CPC classification number: C12N5/0068 ,  C07K14/47 ,  C07K14/50 ,  C07K14/503 ,  C07K17/14 ,  C07K2319/00 ,  C12N5/0663 ,  C12N2501/115 ,  C12N2533/50

Abstract: 본 발명은 줄기세포에 대한 접착활성을 갖는 섬유아세포 성장인자(fibroblast growth factor, FGF)의 재조합 단백질 및 이를 이용한 줄기세포의 배양방법에 관한 것으로서, 구체적으로 섬유아세포 성장인자의 아미노 말단에 폴리펩티드 링커가 융합되어 줄기세포에 대한 접착활성을 갖는 재조합 단백질, 및 상기 재조합 단백질을 폴리펩티드 링커의 아미노 말단을 이용하여 소수성 표면을 갖는 배양용기에 고정시킨 후, 상기 재조합 단백질이 고정된 배양용기에 줄기세포를 접착시켜 배양하는 것을 포함하는, 고정된 섬유아세포 성장인자(immobilized FGF)를 이용한 줄기세포의 배양방법에 관한 것이다.

Abstract translation: 本发明涉及具有干细胞粘附活性的成纤维细胞生长因子（FGF）的重组蛋白质和使用其的培养干细胞的方法。 更具体地说，本发明涉及通过FGF的氨基末端融合多肽接头对干细胞具有粘附活性的重组蛋白质和使用固定化FGF培养干细胞的方法，包括：将重组蛋白质固定在培养容器 使用多肽接头的氨基末端的疏水表面，将干细胞粘附在重组蛋白质固定的培养容器上，并培养干细胞。

公开(公告)号：KR1020100122778A

公开(公告)日：2010-11-23

申请号：KR1020090041846

申请日：2009-05-13

Applicant: 한국과학기술연구원

Inventor： 김상헌 ,  김수현 ,  정영미 ,  한민

IPC: C12N5/071 ,  C07K14/50 ,  C12N11/02 ,  C12N15/18

CPC classification number: C12N5/0068 ,  C07K14/47 ,  C07K14/50 ,  C07K14/503 ,  C07K17/14 ,  C07K2319/00 ,  C12N5/0663 ,  C12N2501/115 ,  C12N2533/50

Abstract: PURPOSE: A fibroblast growth factor(FGF) having adhesion activity and a method for culturing stem cells using the same are provided to maintain biological activity of FGF and to effectively culture the stem cells. CONSTITUTION: A method for culturing stem cells using immortalized FGF comprises: a step of preparing a recombinant protein of FGF-polypeptide linker having adhesion activity to stem cells; a step of fixing the recombinant protein on hydrophobic surface using amino terminal of polyepeptide linker; and a step of adhering the stem cells on the culture container in which recombinant protein is fixed and culturing.

Abstract translation: 目的：提供具有粘附活性的成纤维细胞生长因子（FGF）和使用其的培养干细胞的方法，以维持FGF的生物学活性并有效培养干细胞。 构成：使用永生化FGF培养干细胞的方法包括：制备对干细胞具有粘附活性的FGF-多肽接头重组蛋白的步骤; 使用多肽接头的氨基末端将重组蛋白质固定在疏水表面上的步骤; 以及将干细胞粘附在重组蛋白质固定培养的培养容器上的步骤。

公开(公告)号：KR100973428B1

公开(公告)日：2010-08-03

申请号：KR1020080046180

申请日：2008-05-19

Applicant: 한국과학기술연구원

Inventor： 김상헌 ,  김수현 ,  한민

IPC: C12N11/00 ,  C12N11/02 ,  C12N11/16

CPC classification number: C07K14/245 ,  C07K14/52 ,  C07K17/06 ,  C07K2319/24 ,  C12N11/06 ,  C12N11/08 ,  C12N11/14 ,  G01N33/54353

Abstract: 본 발명은 말토오스 결합 단백질(maltose binding protein, MBP)을 이용한 생리활성 폴리펩타이드의 고정화 방법 및 이 방법에 의해 생리활성 폴리펩타이드가 고정된 생물활성 표면(bioactive surface)에 관한 것으로, 구체적으로 본 발명은 1) 말토오스 결합 단백질의 카르복실 말단에 생리활성 폴리펩타이드가 결합된 융합 단백질을 얻는 단계; 및 2) 상기 융합 단백질을 말토오스 결합 단백질의 표면에 노출된 소수성 도메인을 링커로 이용하여 소수성 표면에 흡착시키는 단계를 포함하는, 생리활성 폴리펩타이드의 고정화 방법 및 이 방법에 의해 생리활성 폴리펩타이드가 고정된 생물활성 표면에 관한 것이다. 본 발명에 따른 생리활성 폴리펩타이드의 고정화 방법은 원형질막공간(periplasm) 단백질인 말토오스 결합 단백질의 표면에 노출된 소수성 도메인을 링커로 이용하여 생리활성 폴리펩타이드의 생물학적 활성은 그대로 유지하면서 간단한 물리적 흡착에 의해 이를 소수성 표면에 고정시킬 수 있고, 이렇게 생리활성 폴리펩타이드가 고정된 표면은 다양한 세포의 배양, 줄기세포의 분화 연구, 조직공학과 같은 재생의료분야, 세포 센서, 세포 칩 연구 등에 매우 유용하게 사용될 수 있다는 장점을 갖는다.
말토오스 결합 단백질(MBP), 융합 단백질, 소수성 표면 흡착, 생리활성 폴리 펩타이드, 세포 배양

公开(公告)号：KR101094445B1

公开(公告)日：2011-12-15

申请号：KR1020090041846

申请日：2009-05-13

Applicant: 한국과학기술연구원

Inventor： 김상헌 ,  김수현 ,  정영미 ,  한민

IPC: C12N5/071 ,  C07K14/50 ,  C12N11/02 ,  C12N15/18

CPC classification number: C12N5/0068 ,  C07K14/47 ,  C07K14/50 ,  C07K14/503 ,  C07K17/14 ,  C07K2319/00 ,  C12N5/0663 ,  C12N2501/115 ,  C12N2533/50

Abstract: 본 발명은 줄기세포에 대한 접착활성을 갖는 섬유아세포 성장인자(fibroblast growth factor, FGF)의 재조합 단백질 및 이를 이용한 줄기세포의 배양방법에 관한 것으로서, 구체적으로 섬유아세포 성장인자의 아미노 말단에 폴리펩티드 링커가 융합되어 줄기세포에 대한 접착활성을 갖는 재조합 단백질, 및 상기 재조합 단백질을 폴리펩티드 링커의 아미노 말단을 이용하여 소수성 표면을 갖는 배양용기에 고정시킨 후, 상기 재조합 단백질이 고정된 배양용기에 줄기세포를 접착시켜 배양하는 것을 포함하는, 고정된 섬유아세포 성장인자(immobilized FGF)를 이용한 줄기세포의 배양방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, FGF의 아미노 말단을 폴리펩티드 링커에 결합시키고 상기 폴리펩티드 링커의 아미노 말단을 자발적인 물리적 흡착에 의해 소수성 표면을 갖는 배양용기에 고정시킴으로써, FGF-폴리펩티드 링커의 재조합 단백질이 고정된 표면은 FGF의 생물학적 활성은 그대로 유지하면서, 외부로 노출된 FGF가 줄기세포와의 상호작용에 의한 세포접착을 유도하여 줄기세포를 효과적으로 배양할 수 있다. 따라서 본 발명은 줄기세포의 분화 및 증식 연구와, 조직공학 및 세포치료와 같은 재생의료 분야에 매우 유용하게 적용될 수 있다.
말토오스 결합 단백질(MBP), 섬유아세포 성장인자(FGF), 생물활성 표면, 세포접착, 줄기세포

公开(公告)号：KR1020090120241A

公开(公告)日：2009-11-24

申请号：KR1020080046180

申请日：2008-05-19

Applicant: 한국과학기술연구원

Inventor： 김상헌 ,  김수현 ,  한민

IPC: C12N11/00 ,  C12N11/02 ,  C12N11/16

CPC classification number: C07K14/245 ,  C07K14/52 ,  C07K17/06 ,  C07K2319/24 ,  C12N11/06 ,  C12N11/08 ,  C12N11/14 ,  G01N33/54353

Abstract: PURPOSE: A fixation of physiologically active polypeptide with a maltose binding protein(MBP) is provided to maintain biologically activity of the polypeptide and fix the peptide on the hydrophobic surface. CONSTITUTION: A fixation of physiologically polypeptide comprises: a step of fusing the physiologically active polypeptide at carboxy terminal of maltose binding protein(MBP) to obtain a fusion protein; and a step of fixing the fusion protein on a hydrophobic surface by physical adsorption between amino terminal and the hydrophobic surface.

Abstract translation: 目的：提供具有麦芽糖结合蛋白（MBP）的生理活性多肽的固定以维持多肽的生物活性并将肽固定在疏水性表面上。 构成：生理多肽的固定包括：将麦芽糖结合蛋白（MBP）的羧基末端的生理活性多肽融合以获得融合蛋白的步骤; 以及通过氨基末端和疏水性表面之间的物理吸附将融合蛋白固定在疏水性表面上的步骤。