Abstract:
A transformed cell line transfected by a vector which over-expresses a constitutively-active-Akt protein is provided to improve an existence rate and lifetime of a CHO recombinant cell. A transformed cell line transfected by a vector which over-expresses a constitutively-active-Akt protein comprises the following steps of: manufacturing a vector which expresses a constitutively-active-Akt protein; and introducing the vector to a host cell and selecting the host cell which can over-express the constitutively-active-Akt protein. The constitutively-active-Akt protein is written as a sequence number 1. The host cell is selected from the group consisting of CHO, VERO, BHK, HeLa, Cv1, MDCK, 293, 3T3, myeloma, PC12, and WI38.
Abstract:
본 발명은 항예정사 유전자인 B 세포 림프종 2(B-cell lymphoma 2, Bcl2)를 과발현하고 젖산 생성을 촉매하는 A형 젖산 탈수소효소(lactate dehydrogenase A, LDH-A) 유전자를 저발현 하도록 형질전환되고 다이하이드로폴레이트 환원효소(dihydrofolate reductase, Dhfr) 유전자가 결핍된 신규한 CHO 세포주, 그의 제조 방법 및 상기 형질전환된 CHO 세포주를 이용한 목적 단백질의 생산 방법에 관한 것으로서, 상기 형질전환된 CHO 세포주는 항예정사 단백질인 Bcl2의 과발현으로 인하여 예정사가 억제되어 세포의 생존 능력이 증가하고, 젖산 생성 효소인 LDH-A의 저발현으로 인하여 배양 시 배지에 축적되는 노폐물 중 하나인 젖산의 생성이 억제되어 젖산의 축적을 줄여주며, 세포의 생존과 세포 대사에 관련된 유전자를 조작함으로써 두 개의 형질이 동시에 전환됨으로써, 이러한 형질전환은 세포의 생존율을 높이는 동시에 세포 대사의 흐름이 목적 단백질의 생산성을 높여줄 뿐만 아니라 외부환경에 대한 스트레스를 줄여 생산된 목적 단백질의 질을 향상시킬 수 있으므로 원하는 목적 단백질의 제조에 유용하게 이용될 수 있다.
Abstract:
본 발명은 항상 활성화된 Akt 단백질을 과발현하는 벡터를 도입한 형질전환 세포주, 상기 벡터를 유효성분으로 포함하는 세포예정사(Programmed cell death) 저해제 및 상기 형질전환 세포주를 이용하여 목적 단백질을 생산하는 방법에 관한 것으로써, 보다 상세하게는 항상 활성화된 Akt 단백질을 과발현하는 벡터를 인간화된 항체를 암호화하는 유전자로 형질 전환된 CHO(chinese hamster ovary) 세포에 도입하여 항상 활성화된 Akt 단백질을 과발현시켜 세포자살(Apoptosis) 및 자기소모(Autophagy)의 두 가지 형태의 세포예정사에 저항성을 갖는 형질전환 세포주, 상기 벡터를 유효성분으로 포함하는 세포예정사 저해제 및 상기 형질전환 세포주를 이용하여 여러 가지 스트레스 환경에서의 세포예정사를 억제함으로써 상기 세포가 생산하는 목적 단백질의 생산을 향상시킬 수 있는 방법에 관한 것이다. 항상 활성화된 Akt유전자, 재조합 CHO 세포, 세포예정사
Abstract:
본 발명은 수지상 세포를 이용한 대량의 항원 특이적 CTL(Cytotoxic T Lymphocyte) 유도 방법에 관한 것으로, 구체적으로 HLA-A 유형이 같은 동종의 수지상 세포에 항원을 적재한 후, 림프구와 공배양함으로써 항원 특이적 CTL을 유도하는 방법 및 상기 수지상 세포를 포함하는 면역 치료 및 예방용 백신에 관한 것이다. 본 발명에 따른 CTL 유도 방법 및 면역 치료 및 예방용 백신은 HLA-A 유형이 같은 환자의 질병 치료에 필요한 항원 특이적 CTL을 효과적으로 유도할 수 있어 면역세포 치료에 효과적으로 사용될 수 있다. 세포독성T림프구, 면역세포치료제, 항원