Abstract:
Disclosed is a substantially optically pure hapten, useful in an immunoassay for cotinine. The hapten corresponds to a specified structural formula (I). In formula (I) X is a straight or branched chain, saturated or unsaturated, divalent radical covalently bonded to a pyridyl ring at the number 2-, 4-, 5- or 6- position. The divalent radical, X, has from 1 to 10 carbon atoms wherein the chain of the divalent radical optionally may contain 1 or 2 hetero atoms selected from members of the group consisting of S, O and NZ in which Z represents a C1 to C3 alkyl group. In formula (I), n = 1 or 0, and Q is a functional group selected from -COOH, -NH2 (provided that n does not equal 0), -C(O)NHNH2, -O(CO)Cl, -CHO, -NCS or -NCO. Also disclosed is an immunogen derived from the hapten as well as an antibody raised in response to an immunogen derived from the hapten. Also disclosed is a fluorescent tracer derived from a substantially optically pure compound corresponding to the hapten, the tracer being useful in an immunoassay for cotinine. Also disclosed is an improved immunoassay for determining cotinine in a biological sample involving a step of contacting the sample with antibodies raised in response to the immunogen. Also disclosed is a fluorescence polarization immunoassay (FPIA) for determining cotinine involving a step of contacting the sample with antibodies raised in response to the immunogen, and/or involving a step of contacting the sample with a fluorescent tracer.
Abstract:
L'invention décrit un haptène pratiquement pur optiquement, efficace dans une immuno-analyse sur la cotinine. L'haptène correspond à une formule structurelle spécifique (I). Dans ladite formule (I), X représente un radical divalent, à chaîne droite ou ramifiée, saturé ou insaturé, à liaison covalente avec un composé cyclique de pyridyle sur les positions numéros 2-, 4-, 5- et 6-. Le radical divalent X possède entre 1 et 10 atomes de carbone, où la chaîne dudit radical peut éventuellement contenir 1 ou 2 hétéroatomes sélectionnés à partir d'éléments du groupe constitué par S, O et NZ dans lequel Z représente un groupe alkyle C1 à C3. Dans la formule (I), n = 1 ou 0 et Q représente un groupe fonctionnel sélectionné à partir de -COOH, -NH2 (dans la mesure où n n'est pas égal à 0), -C(O)NHNH2, -O(CO)Cl, -CHO, -NCS et -NCO. L'invention décrit également un immunogène dérivé de l'haptène, ainsi qu'un anticorps créé en réaction à l'immunogène dérivé de l'haptène. L'invention décrit également un traceur fluorescent dérivé d'un composé pratiquement pur optiquement correspondant à l'haptène, ledit traceur s'utilisant dans une immuno-analyse sur la cotinine. L'invention décrit également une immuno-analyse améliorée servant à déterminer la cotinine dans un prélèvement biologique et comportant les étapes de mise en contact du prélèvement avec des anticorps créés en réaction à l'immunogène. L'invention décrit également une immuno-analyse de polarisation par fluorescence (FPIA) servant à déterminer la présence de cotinine et comprenant l'étape de mise en contact du prélèvement avec les anticorps créés en réaction à l'immunogène et/ou comprenant une étape de mise en contact du prélèvement avec un traceur fluorescent.