Abstract:
A method for obtaining an actual linear standard curve in a sandwich type of immunoassay where a first antibody bound to an insoluble support and a second unbound labelled antibody complex with the antigen contained in a test sample to form an insoluble antibody:antigen:labelled antibody complex which is then detected. Unbound unlabelled first antibody and/or unbound unlabelled second antibody are added to the reaction mixture to divert excess antigen away from the desired end-product complex, thus rendering the antigen of interest the rate-limiting factor in the overall immunoreaction. This results in a pseudo first-order reaction which produces an actual linear standard curve.
Abstract:
A improved immunoassay for assaying an antigenic substance (Ag) in a fluid. The immunoassay is the type which comprises contacting the fluid with at least one first entity selected from a group consisting of an antibody (Ab) to the Ag, a soluble, labeled antibody (L-Aba) to the Ag, and an antibody (Abb) to the Ag bound to a solid support (SC). The immunoassay is characterized in that the fluid is contacted with at least one additional entity selected from a group consisting of at least one different type of soluble, labeled antibody (L-Abc) to the Ag, at least one different type of antibody (Abd) bound to a solid carrier (SC1), and at least one different type of antibody (Abe) to the Ag. The SC1 is selected from a group consisting of SC, at least one different solid carrier (SC2), and mixtures thereof (SC and SC2). Each type of L-Abc, Abd-SC1, and Abe has a lower average affinity constant (K) for Ag than each respective K of L-Aba, Abb-SC and Abe; and the additional entity is present in an amount sufficient to avoid a hook effect. Also, an improved reagent of the type comprising at least one first entity selected from a group consisting of L-Aba, Abb-SC, and Ab. The reagent is characterized in that it further comprises at least one additional entity selected from a group consisting of at least one different type of L-Abc and at least one different type Abd-SC1, and at least one different type of Abe. Ab, L-Aba, Abb-SC, L-Abc, Abd-SC1, and Abe are as defined above.
Abstract:
Techniques d'analyse immunométrique "à site double" ou "en sandwich" pour la détermination de la présence et/ou la concentration de substances antigéniques dans des fluides utilisant une combinaison d'anticorps monoclonaux et polyclonaux. Un anticorps sélectionné dans un groupe composé d'anticorps monoclonauxx et polyclonaux(1-x) est présenté sous une forme soluble étiquetée; un deuxième anticorps sélectionné dans un groupe composé d'anticorps monoclonaux(1-x) et polyclonauxx est présenté lié à un support solide; x vaut 0 ou 1. La présente invention comprend également un kit associant a) un premier anticorps soluble d'une substance antigénique présente dans un fluide à analyser, le premier anticorps étant étiqueté et sélectionné dans un groupe composé d'anticorps monoclonauxx et polyclonaux(1-x) et b) un deuxième anticorps de la substance antigénique, lié à un support solide et sélectioné dans un groupe composé d'anticorps monoclonaux(1-x) et polyclonauxx, x valant 0 ou 1.
Abstract:
A improved immunoassay for assaying an antigenic substance (Ag) in a fluid. The immunoassay is the type which comprises contacting the fluid with at least one first entity selected from a group consisting of an antibody (Ab) to the Ag, a soluble, labeled antibody (L-Aba) to the Ag, and an antibody (Abb) to the Ag bound to a solid support (SC). The immunoassay is characterized in that the fluid is contacted with at least one additional entity selected from a group consisting of at least one different type of soluble, labeled antibody (L-Abc) to the Ag, at least one different type of antibody (Abd) bound to a solid carrier (SC1), and at least one different type of antibody (Abe) to the Ag. The SC1 is selected from a group consisting of SC, at least one different solid carrier (SC2), and mixtures thereof (SC and SC2). Each type of L-Abc, Abd-SC1, and Abe has a lower average affinity constant (K) for Ag than each respective K of L-Aba, Abb-SC and Abe; and the additional entity is present in an amount sufficient to avoid a hook effect. Also, an improved reagent of the type comprising at least one first entity selected from a group consisting of L-Aba, Abb-SC, and Ab. The reagent is characterized in that it further comprises at least one additional entity selected from a group consisting of at least one different type of L-Abc and at least one different type Abd-SC1, and at least one different type of Abe. Ab, L-Aba, Abb-SC, L-Abc, Abd-SC1, and Abe are as defined above.
Abstract:
Analyses immunologiques améliorées pour titrer une substance antigénique (Ag) dans un fluide. L'analyse immunologique est du type comportant la mise en contact du fluide avec au moins une première entité choisie dans un groupe formé d'un anticorps (Ab) à l'Ag d'un anticorps marqué soluble (L-Aba) à l'Ag et d'un anticorps (Abb) à l'Ag lié à un support solide (SC). L'analyse immunologique est caractérisée par le fait que le fluide est mis en contact avec au moins une entité supplémentaire choisie dans un groupe formé d'au moins un type différent d'anticorps marqué soluble (L-Abc) à l'Ag, d'au moins un type différent d'anticorps (Abd) lié à un porteur solide (SC1) et d'au moins un type différent d'anticorps (Abe) à l'Ag. Le SC1 est choisi dans un groupe formé de SC, d'au moins un porteur solide différent (SC2) et de mélanges de ceux-ci (SC et SC2). Chaque type de L-Abc, Abd-SC1 et Abe a une constante d'affinité moyenne inférieure (K) pour l'Ag par rapport au K respectif de L-Aba, Abb-SC et Abe; en outre, l'entité supplémentaire est présente en quantité suffisante pour éviter un effet de crochet. Est également décrit un réactif amélioré du type comportant au moins une première entité choisie dans un groupe formé de L-Aba, Abb-SC et Ab. Le réactif est en outre caractérisé par le fait qu'il comporte au moins une entité supplémentaire choisie dans un groupe formé d'au moins un type différent de L-Abc et d'au moins un type différent de Abd-SC1, ainsi que d'au moins un type différent de Abe. Ab, L-Aba, Abb-SC, L-Abc, Abd-SC1 et Abe ont la même définition que ci-dessus.