公开(公告)号：WO1989012826A1

公开(公告)日：1989-12-28

申请号：PCT/US1989002193

申请日：1989-05-19

Applicant: BECKMAN INSTRUMENTS, INC.

Inventor： BECKMAN INSTRUMENTS, INC. ,  OH, Chan, S. ,  STONE, Linda, J.

IPC: G01N33/82

CPC classification number: G01N33/82

Abstract: A competitive binding assay for vitamin B12 in a test sample gives a steep dose-response curve in the clinically significant concentration regions, yielding great accuracy. The assay uses immobilized vitamin B12 to compete with the vitamin B12 in the test sample for a binding partner. The quantity of the binding partner bound to the immobilized vitamin B12 can be measured and is inversely proportional to the concentration of free vitamin B12 in the test sample. The binding partner is typically biotinylated intrinsic factor prepared so that substantially all the molecules of intrinsic factor are biotinylated and the binding activity of the intrinsic factor for vitamin B12 is not diminished. The bound biotinylated intrinsic factor can then be determined by reacting it with avidin coupled to a reporter group. The reporter group is typically an enzyme such as horseradish peroxidase, but can be another detectable label. The immobilized vitamin B12 is typically bound to a solid support such as diazotized amine-derivatized beads, and can be bound through a protein linker. Other binding partners such as anti-vitamin B12 antibody are also usable. The binding partner can be labeled directly with the reporter group. The method is adaptable to the assay of serum, and methods of inactivating endogenous vitamin B12-binding proteins in serum are described.

Abstract translation: 测试样品中维生素B12的竞争性结合测定在临床显着的浓度区域提供了陡峭的剂量 - 反应曲线，产生了很高的准确性。 该测定使用固定的维生素B12与测试样品中的维生素B12竞争结合配偶体。 可以测量与固定化维生素B12结合的结合配偶体的数量，并与测试样品中游离维生素B12的浓度成反比。 结合配偶体通常是生物素化的固有因子，使得基本上所有内在因子的分子都被生物素化，并且维生素B12的内在因子的结合活性不会降低。 然后可以通过与结合报告基团的抗生物素蛋白反应来确定结合的生物素化内在因子。 记者组通常是诸如辣根过氧化物酶的酶，但可以是另一个可检测的标记。 固定的维生素B12通常与固体支持物结合，例如重氮化胺衍生的珠，并且可以通过蛋白质接头结合。 其他结合配偶体如抗维生素B12抗体也是可用的。 绑定对象可以直接与记者组进行标注。 该方法适用于血清测定，描述了血清中内源性维生素B12结合蛋白失活的方法。

公开(公告)号：WO1986006004A1

公开(公告)日：1986-10-23

申请号：PCT/US1986000746

申请日：1986-04-07

Applicant: BECKMAN INSTRUMENTS, INC.

Inventor： BECKMAN INSTRUMENTS, INC. ,  HARRIS, Paul, C. ,  STONE, Linda, J.

IPC: B01L03/00

CPC classification number: B01L3/502

Abstract: A system and method of immunoassay, both including the use of a reaction capsule (14) having a hydrophobic membrane (22) which may be repeatedly wetted and rendered hydrophobic. A pressure differential across the membrane causes liquid flow therethrough to be initiated and the hydrophobic state is then achieved by flowing gas through the membrane. The system includes a turntable (12) supporting a plurality of reaction capsules (14) and eccentric (66) means for agitating the turntable and capsules. The turntable is rotated to position the capsules at various processing stations, including sample introduction (86), reagent introduction (98), wash (100), substrate introduction (130) and read stations (132). A single cylinder two-inlet valve (178) may be used, one inlet (190) connected to liquid (196) and a second inlet (192) connected to a gas source (202), to provide both liquid and gas flow through the membrane.

Abstract translation: 一种免疫测定的系统和方法，包括使用具有疏水膜（22）的反应胶囊（14），所述疏水膜可被反复润湿并变得疏水。 跨过膜的压差导致液体流过其中，并且然后通过使气体流过膜来实现疏水状态。 该系统包括支撑多个反应胶囊（14）的转台（12）和用于搅拌转盘和胶囊的偏心（66）装置。 转盘旋转以将胶囊定位在各种处理站，包括样品引入（86），试剂引入（98），洗涤（100），基底引入（130）和读取站（132）。 可以使用单缸双入口阀（178），连接到液体（196）的一个入口（190）和连接到气体源（202）的第二入口（192），以提供液体和气体流过 膜。

公开(公告)号：EP0413001A1

公开(公告)日：1991-02-20

申请号：EP89907437.0

申请日：1989-05-19

Applicant: BECKMAN INSTRUMENTS, INC.

Inventor： OH, Chan, S. ,  STONE, Linda, J.

IPC: G01N33

CPC classification number: G01N33/82

Abstract: Un titrage compétitif de fixation pour la vitamine B12, dans un échantillon d'analyse, donne une courbe dose-réponse à forte pente dans les zones de concentration cliniquement significatives, fournissant une grande précision. L'analyse utilise la vitamine B12 immobilisée en vue de concurrencer la vitamine B12 dans l'échantillon d'analyse pour un partenaire de fixation. La quantité de partenaire de fixation liée à la vitamine B12 immobilisée peut être mesurée et est inversement proportionnelle à la concentration de vitamine B12 libre, dans l'échantillon d'analyse. Le partenaire de fixation est un facteur intrinsèque biotynilé de façon type, préparé de telle façon que la quasi-totalité des molécules du facteur intrinsèque soit biotinylée et que l'activité de liaison du facteur intrinsèque pour la vitamine B12 ne soit pas réduite. Le facteur intrinsèque biotynilé lié peut alors être déterminé en le faisant réagir avec l'avidine couplée à un groupe relationnel. Le groupe relationnel est généralement une enzyme, telle que la peroxydase du raifort, mais peut être un autre composé marqué détectable. La vitamine B12 immobilisée est liée, de façon générale, à un support solide, tel que des perles diazotées dérivées d'amines, la liaison pouvant se faire par l'intermédiaire d'un élément liant protéinique. D'autres partenaires de fixation tels qu'un anticorps antivitamine B12 sont également utilisables. Le partenaire de fixation peut être marqué directement avec le groupe relationnel. La méthode peut être adaptée au titrage du sérum; des méthodes d'inactivation de protéines endogènes fixant la vitamine B12 dans le sérum sont décrites.

公开(公告)号：EP0226600A1

公开(公告)日：1987-07-01

申请号：EP86902967.0

申请日：1986-04-07

Applicant: BECKMAN INSTRUMENTS, INC.

Inventor： HARRIS, Paul, C. ,  STONE, Linda, J.

IPC: G01N33 ,  B01L3

CPC classification number: B01L3/502

Abstract: Système et procédé d'immuno-analyse comprenant tous deux l'utilisation d'une capsule de réaction (14) ayant une membrane hydrophobe (22) qui peut être mouillée et rendue hydrophobe de manière répétée. Un différentiel de pression sur la membrane provoque l'écoulement de liquide au travers de celle-ci et l'état hydrophobe est alors obtenu en faisant écouler du gaz au travers de la membrane. Le système comprend une table tournante (12) supportant une pluralité de capsules de réaction (14) et des moyens à excentriques (66) pour agiter la table tournante et les capsules. On fait tourner la table tournante pour positionner les capsules en différents postes de traitement, à savoir le poste d'introduction d'échantillon (66), d'introduction de l'agent de réaction (98), de lavage (100), d'introduction du substrat (130) et de lecture (132). Une vanne (178) à un seul cylindre et à deux admissions peut être utilisée, une admission (190) étant connectée à la source de liquide (196) et une seconde admission (192) étant connectée à une source de gaz (202), de manière à assurer l'écoulement de liquide et de gaz au travers de la membrane.