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公开(公告)号：CN115948323B
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202210109752.6
申请日：2022-01-28
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明公开一种胰岛细胞诱导剂、培养基和获得胰岛β细胞的方法及其应用，属于生物医学技术领域。为了提供使用小分子化合物用于药物开发方法。本发明提供了通过构建上皮类器官(epithelial organoids，EPOs)，经黄芪皂苷类物质处理后，可以发现黄芪提取物中黄芪皂苷单体能够显著促进EPOs产生胰岛细胞，其明显促进胰岛细胞相关基因，特别是胰岛素基因的表达，所产生的胰岛细胞能响应葡萄糖刺激分泌胰岛素，缓解糖尿病鼠高血糖症状，所产生的胰岛素分泌细胞具有成熟β细胞的生理功能。该方法可用于制备人工胰岛系统移植治疗糖尿病。
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公开(公告)号：CN113265428B
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202110655541.8
申请日：2021-06-11
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/113 , C12N15/65 , C12Q1/02 , G01N21/64
Abstract: 一种利用金属硫蛋白构建活细胞内铜变化的检测系统及应用，它涉及生物检测领域，本发明有效地感知细胞内铜的变化，为筛选铜靶向药物和研究铜相关细胞生理病理机制提供帮助。本发明的检测系统是由金属硫蛋白的MT1F与EGFP结合形成的检测系统；所述的MT1F为启动子与EGFP结合，其中，MT1F启动子的核苷酸序列如序列表Seq ID No：1所示。本发明的PMT1F‑EGFP报告系统能有效地感知细胞内铜的改变，可作为筛选铜靶向药物和研究铜相关细胞生理病理机制的工具。本发明应用于生物领域。
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公开(公告)号：CN101705206A
公开(公告)日：2010-05-12
申请号：CN200910073257.9
申请日：2009-11-25
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种新型、高效的分离制备小鼠胰腺单细胞悬液的方法，包括小鼠胰腺取材、胰酶冷消化、胰腺单细胞分离与纯化等步骤。本发明的技术关键是利用胰酶在低温低活力状况下浸入胰腺组织，然后再通过短时温消化解离胰腺组织，从而获得高数量、高纯度、高活力、无粘连的胰腺单细胞悬液。与常规胰腺细胞分离方法相比，该发明具有操作稳定、细胞得率高、细胞活性高等特点，避免了常规胰腺分离方法中胰酶长时间温孵育对胰腺细胞造成伤害、细胞大量死亡释放出DNA缠绕造成细胞粘连等缺点，解决了胰腺单细胞分离和分析困难问题，为进一步利用胰腺细胞奠定基础。
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公开(公告)号：CN115120600B
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202210543372.3
申请日：2022-05-19
Applicant: 东北林业大学
IPC: A61K31/58 , A61K31/7048 , A61P3/10 , A61P5/50
Abstract: 本发明公开一种薯蓣皂苷元及其类似物在制备预防或治疗糖尿病药物中的应用，属于生物医学技术领域。为了提供使用小分子化合物用于治疗或预防糖尿病药物开发方法。本发明提供一种薯蓣皂苷元及其类似物在制备预防或治疗糖尿病药物中的应用。该应用可用于制备人工胰岛系统移植治疗糖尿病。
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公开(公告)号：CN115044534A
公开(公告)日：2022-09-13
申请号：CN202210301602.5
申请日：2022-03-25
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用BMP7因子在体外生产胰岛β细胞的方法和获得的胰岛β细胞以及应用，属于生物医学技术领域。为了提供一种利用胆管和胰腺导管来源的上皮细胞以及BMP7因子和C17H22N2O4S获得胰岛细胞的方法。本发明提供一种将胆管类器官或胰腺导管类器官放置在含有BMP7因子的增殖培养基中培养获得多能胰腺祖细胞，然后将多能胰腺祖细胞放置在含有C17H22N2O4S的分化培养基中获得胰岛β细胞。该方法可用于制备人工胰岛系统移植治疗糖尿病。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113265428A
公开(公告)日：2021-08-17
申请号：CN202110655541.8
申请日：2021-06-11
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/113 , C12N15/65 , C12Q1/02 , G01N21/64
Abstract: 一种利用金属硫蛋白构建活细胞内铜变化的检测系统及应用，它涉及生物检测领域，本发明有效地感知细胞内铜的变化，为筛选铜靶向药物和研究铜相关细胞生理病理机制提供帮助。本发明的检测系统是由金属硫蛋白的MT1F与EGFP结合形成的检测系统；所述的MT1F为启动子与EGFP结合，其中，MT1F启动子的核苷酸序列如序列表Seq ID No：1所示。本发明的PMT1F‑EGFP报告系统能有效地感知细胞内铜的改变，可作为筛选铜靶向药物和研究铜相关细胞生理病理机制的工具。本发明应用于生物领域。
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公开(公告)号：CN113528432B
公开(公告)日：2024-04-19
申请号：CN202110813180.5
申请日：2021-07-19
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 一种利用miR‑18抑制剂促牛成肌细胞分化的方法，本发明涉及一种利用miR‑18inhibitor促牛成肌细胞分化的方法，本发明公开了一种新型高效的利用miR‑18inhibitor促牛成肌细胞分化方法，包括牛成肌细胞复苏培养、传代培养以及分化培养技术。本发明通过转染miR‑18抑制剂到牛成肌细胞，培养后利用免疫染色鉴定，荧光定量PCR鉴定等，发现了miR‑18抑制剂有明显促牛成肌细胞分化作用，得到高效率分化结果的方法。本发明应用于促牛成肌细胞分化领域。
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公开(公告)号：CN104762321A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510194406.2
申请日：2015-04-22
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/113
Abstract: 基于CRISPR/Cas9系统靶向敲除KHV基因的敲除载体构建方法及其crRNA原件，涉及一种敲除载体构建方法及其crRNA原件。是要解决现有方法抑制KHVD不足的问题。方法：一、合成crRNA-TK和crRNA-DP引物，沸水处理，退火，得到两个DNA双链退火产物；二、制备pX330-puro载体；三、对pX330-puro载体进行酶切，进行去磷反应，回收线性化的载体；四、对线性化载体与两个退火产物连接，得连接产物；五、将连接产物转入感受态细胞内，提取重组质粒DNA，命名为pX330-puro TK或pX330-puro DP重组载体。本发明基于定向敲除KHV关键基因，靶向精确性高，胞内病毒抑制效果明显。
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公开(公告)号：CN101735977B
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201010032456.8
申请日：2010-01-13
Abstract: 本发明公开了一种新型、高效的小鼠胰腺干/祖细胞离体筛选扩增技术，包括小鼠胰腺组织的取材、胰腺单细胞的分离、胰腺干/祖细胞的富集与纯化、胰腺干/祖细胞的大量扩增等步骤。本发明的技术关键是通过胶原酶部分消化富集胰腺干/祖细胞，通过两次转接方法有效地筛除成纤维细胞，最后通过胰蛋白酶点状消化挑取细胞集落的方法纯化胰腺干/祖细胞并大量扩增，最终筛选获得一群均质的，具有强增殖能力及多向分化潜能的胰腺上皮干/祖细胞。
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公开(公告)号：CN115044534B
公开(公告)日：2023-12-01
申请号：CN202210301602.5
申请日：2022-03-25
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用BMP7因子在体外生产胰岛β细胞的方法和获得的胰岛β细胞以及应用，属于生物医学技术领域。为了提供一种利用胆管和胰腺导管来源的上皮细胞以及BMP7因子和C17H22N2O4S获得胰岛细胞的方法。本发明提供一种将胆管类器官或胰腺导管类器官放置在含有BMP7因子的增殖培养基中培养获得多能胰腺祖细胞，然后将多能胰腺祖细胞放置在含有C17H22N2O4S的分化培养基中获得胰岛β细胞。该方法可用于制备人工胰岛系统移植治疗糖尿病。
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