公开(公告)号：CN110791585B

公开(公告)日：2022-11-18

申请号：CN201911237264.8

申请日：2019-12-05

Applicant: 中南林业科技大学

Inventor： 刘勇男 ,  刘必扬 ,  马酉初 ,  刘高强

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 蛹虫草菌丝体冷胁迫下内参基因、引物、筛选方法及应用，所述内参基因为UBC，核苷酸序列为SEQ ID NO:1。UBC的正向、反向引物的核苷酸序列依次为SEQ ID NO:13‑14。所述筛选方法为：（1）选择12个内参基因为备选内参基因，设计引物；（2）将蛹虫草冷胁迫处理，提取菌丝体总RNA，测RNA浓度，将RNA反转录合成cDNA，以cDNA为模板，用实时荧光定量PCR对备选内参基因进行分析；（3）实时荧光定量PCR数据进行Ct值分析，筛选出稳定内参基因。所述应用是以UBC为内参基因，用实时荧光定量PCR检测目的基因在冷胁迫下的相对表达量。所述内参基因稳定性好；所述方法简单、快捷、成本低。

公开(公告)号：CN110791585A

公开(公告)日：2020-02-14

申请号：CN201911237264.8

申请日：2019-12-05

Applicant: 中南林业科技大学

Inventor： 刘勇男 ,  刘必扬 ,  马酉初 ,  刘高强

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 蛹虫草菌丝体冷胁迫下内参基因、引物、筛选方法及应用，所述内参基因为UBC，核苷酸序列为SEQ ID NO:1。UBC的正向、反向引物的核苷酸序列依次为SEQ ID NO:13-14。所述筛选方法为：（1）选择12个内参基因为备选内参基因，设计引物；（2）将蛹虫草冷胁迫处理，提取菌丝体总RNA，测RNA浓度，将RNA反转录合成cDNA，以cDNA为模板，用实时荧光定量PCR对备选内参基因进行分析；（3）实时荧光定量PCR数据进行Ct值分析，筛选出稳定内参基因。所述应用是以UBC为内参基因，用实时荧光定量PCR检测目的基因在冷胁迫下的相对表达量。所述内参基因稳定性好；所述方法简单、快捷、成本低。

公开(公告)号：CN110777217B

公开(公告)日：2023-09-05

申请号：CN201911237280.7

申请日：2019-12-05

Applicant: 中南林业科技大学

Inventor： 刘勇男 ,  刘必扬 ,  马酉初 ,  刘高强

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6811 ,  C12N15/11

Abstract: 蛹虫草子实体发育阶段内参基因、引物、筛选方法及应用，所述内参基因为TUB，核苷酸序列为SEQ ID NO:1。TUB的正向、反向引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:13‑14。所述筛选方法为：（1）选择12个内参基因为备选内参基因，设计引物；（2）诱导蛹虫草子实体发育，提取不同发育阶段的总RNA，测定RNA浓度，将RNA反转录合成cDNA，以cDNA为模板，利用实时荧光定量PCR对备选内参基因进行分析；（3）实时荧光定量PCR数据进行Ct值分析，筛选出稳定内参基因。所述应用是以TUB为内参基因，检测目的基因不同发育阶段的相对表达量。所述内参基因稳定性好；所述方法简单、快捷、成本低。

公开(公告)号：CN110777217A

公开(公告)日：2020-02-11

申请号：CN201911237280.7

申请日：2019-12-05

Applicant: 中南林业科技大学

Inventor： 刘勇男 ,  刘必扬 ,  马酉初 ,  刘高强

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6811 ,  C12N15/11

Abstract: 蛹虫草子实体发育阶段内参基因、引物、筛选方法及应用，所述内参基因为TUB，核苷酸序列为SEQ ID NO:1。TUB的正向、反向引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:13-14。所述筛选方法为：（1）选择12个内参基因为备选内参基因，设计引物；（2）诱导蛹虫草子实体发育，提取不同发育阶段的总RNA，测定RNA浓度，将RNA反转录合成cDNA，以cDNA为模板，利用实时荧光定量PCR对备选内参基因进行分析；（3）实时荧光定量PCR数据进行Ct值分析，筛选出稳定内参基因。所述应用是以TUB为内参基因，检测目的基因不同发育阶段的相对表达量。所述内参基因稳定性好；所述方法简单、快捷、成本低。