一种发根根瘤菌介导的油松不定根遗传转化方法

    公开(公告)号:CN118291529B

    公开(公告)日:2024-09-03

    申请号:CN202410718122.8

    申请日:2024-06-05

    Abstract: 本发明提供了一种发根根瘤菌介导的油松不定根遗传转化方法,将带有RUBY报告基因的载体转化到发根根瘤菌中;当油松种子苗的茎长距根部超过3cm时,切掉根部,将伤口处浸没在发根根瘤菌重悬液中,并进行抽真空;将植株根部伤口处裹满发根根瘤菌菌体后,移栽至土培基质中培养30~45d,当愈伤组织分化为再生不定根时,观察再生不定根的颜色,判断是否为植物阳性转化不定根。本发明所述构建的体系突破了油松遗传转化困难的技术屏障,为油松重要基因的功能以及根茎之间信号转导等相关研究工作提供了技术操作手段,并且为后续油松乃至其他针叶树种的关键功能基因功能鉴定以及遗传修饰种质创制提供了技术支撑和指导。

    一种发根根瘤菌介导的油松不定根遗传转化方法

    公开(公告)号:CN118291529A

    公开(公告)日:2024-07-05

    申请号:CN202410718122.8

    申请日:2024-06-05

    Abstract: 本发明提供了一种发根根瘤菌介导的油松不定根遗传转化方法,将带有RUBY报告基因的载体转化到发根根瘤菌中;当油松种子苗的茎长距根部超过3cm时,切掉根部,将伤口处浸没在发根根瘤菌重悬液中,并进行抽真空;将植株根部伤口处裹满发根根瘤菌菌体后,移栽至土培基质中培养30~45d,当愈伤组织分化为再生不定根时,观察再生不定根的颜色,判断是否为植物阳性转化不定根。本发明所述构建的体系突破了油松遗传转化困难的技术屏障,为油松重要基因的功能以及根茎之间信号转导等相关研究工作提供了技术操作手段,并且为后续油松乃至其他针叶树种的关键功能基因功能鉴定以及遗传修饰种质创制提供了技术支撑和指导。

    栾树体细胞胚胎发生及植株再生的培养方法

    公开(公告)号:CN109220809B

    公开(公告)日:2022-01-04

    申请号:CN201811347584.4

    申请日:2018-11-13

    Abstract: 本发明公开了一种栾树体细胞胚胎发生及植株再生的培养方法;所述方法包括:(1)以栾树种子为外植体进行培养获得栾树无菌苗;(2)将栾树无菌苗的叶片及茎段接种到愈伤诱导培养基中培养获得胚性愈伤组织;(3)将胚性愈伤组织在体细胞胚发育培养基中进行体细胞胚的分化培养获得栾树体细胞子叶胚;(4)将栾树体细胞子叶胚在成熟发育培养基中进行子叶胚的成熟发育培养;(5)将发育成熟的子叶胚在种子发芽培养基中进行发芽培养获得完整植株;(6)完整植株茎杆的片段接种至生根培养基进行生根培养。本发明培养方法的栾树体胚发生率高、产生的体胚数量多、提高了栾树的再生植株数量,本发明为栾树无性繁殖培养和分子辅助育种等提供了基础。

    构建彩叶栾树品种指纹图谱的SSR引物、所构建的指纹图谱及其应用

    公开(公告)号:CN106350591B

    公开(公告)日:2019-07-19

    申请号:CN201610822128.5

    申请日:2016-09-13

    Abstract: 本发明公开了构建彩叶栾树品种指纹图谱的SSR引物、所构建的指纹图谱及其应用。本发明根据栾树转录组数据设计获得96对SSR引物,进一步从中筛选出差异较为稳定、多态性好的13对引物用于构建彩叶栾树品种的特异指纹图谱。本发明进一步公开了利用所筛选的SSR引物构建彩叶栾树品种指纹图谱的方法,包括:提取栾树样品DNA作为扩增模板,以所述SSR引物进行PCR扩增;将扩增产物进行毛细管电泳,根据毛细管电泳结果对彩叶栾树品种样品DNA的扩增结果形成引物字母编号加扩增条带长度数字的带型编号,获得各个品种的指纹图谱。本发明所述SSR引物对栾树属植物的品种筛选或鉴定以及优良树种的选育等方面具有重要的应用价值。

    用于鉴定毛白杨单倍体或纯合二倍体的引物组及其应用

    公开(公告)号:CN109825625A

    公开(公告)日:2019-05-31

    申请号:CN201910181293.0

    申请日:2019-03-11

    Abstract: 本发明公开了用于鉴定毛白杨单倍体或纯合二倍体的引物组及其应用。本发明首先公开了用于鉴定毛白杨单倍体或纯合二倍体的PCR引物。本发明基于毛白杨基因组数据信息,设计并筛选获得分别位于毛白杨19条染色体上的19对PCR引物,其核苷酸序列为SEQ ID No.1至SEQ ID No.38所示。本发明进一步应用所筛选出的19对PCR引物设计indel分子标记引物。本发明还公开了所述的PCR引物或indel引物在鉴定毛白杨单倍体或纯合二倍体中的应用。本发明利用所述PCR引物或indel引物能够准确鉴定毛白杨单倍体或纯合二倍体,为毛白杨在遗传育种、分子和生物信息学方面研究等奠定基础。

    构建彩叶栾树品种指纹图谱的SSR引物、所构建的指纹图谱及其应用

    公开(公告)号:CN106350591A

    公开(公告)日:2017-01-25

    申请号:CN201610822128.5

    申请日:2016-09-13

    Abstract: 本发明公开了构建彩叶栾树品种指纹图谱的SSR引物、所构建的指纹图谱及其应用。本发明根据栾树转录组数据设计获得96对SSR引物,进一步从中筛选出差异较为稳定、多态性好的13对引物用于构建彩叶栾树品种的特异指纹图谱。本发明进一步公开了利用所筛选的SSR引物构建彩叶栾树品种指纹图谱的方法,包括:提取栾树样品DNA作为扩增模板,以所述SSR引物进行PCR扩增;将扩增产物进行毛细管电泳,根据毛细管电泳结果对彩叶栾树品种样品DNA的扩增结果形成引物字母编号加扩增条带长度数字的带型编号,获得各个品种的指纹图谱。本发明所述SSR引物对栾树属植物的品种筛选或鉴定以及优良树种的选育等方面具有重要的应用价值。

    用于鉴定毛白杨单倍体或纯合二倍体的引物组及其应用

    公开(公告)号:CN109825625B

    公开(公告)日:2022-04-15

    申请号:CN201910181293.0

    申请日:2019-03-11

    Abstract: 本发明公开了用于鉴定毛白杨单倍体或纯合二倍体的引物组及其应用。本发明首先公开了用于鉴定毛白杨单倍体或纯合二倍体的PCR引物。本发明基于毛白杨基因组数据信息,设计并筛选获得分别位于毛白杨19条染色体上的19对PCR引物,其核苷酸序列为SEQ ID No.1至SEQ ID No.38所示。本发明进一步应用所筛选出的19对PCR引物设计indel分子标记引物。本发明还公开了所述的PCR引物或indel引物在鉴定毛白杨单倍体或纯合二倍体中的应用。本发明利用所述PCR引物或indel引物能够准确鉴定毛白杨单倍体或纯合二倍体,为毛白杨在遗传育种、分子和生物信息学方面研究等奠定基础。

    栾树体细胞胚胎发生及植株再生的培养方法

    公开(公告)号:CN109220809A

    公开(公告)日:2019-01-18

    申请号:CN201811347584.4

    申请日:2018-11-13

    Abstract: 本发明公开了一种栾树体细胞胚胎发生及植株再生的培养方法;所述方法包括:(1)以栾树种子为外植体进行培养获得栾树无菌苗;(2)将栾树无菌苗的叶片及茎段接种到愈伤诱导培养基中培养获得胚性愈伤组织;(3)将胚性愈伤组织在体细胞胚发育培养基中进行体细胞胚的分化培养获得栾树体细胞子叶胚;(4)将栾树体细胞子叶胚在成熟发育培养基中进行子叶胚的成熟发育培养;(5)将发育成熟的子叶胚在种子发芽培养基中进行发芽培养获得完整植株;(6)完整植株茎杆的片段接种至生根培养基进行生根培养。本发明培养方法的栾树体胚发生率高、产生的体胚数量多、提高了栾树的再生植株数量,本发明为栾树无性繁殖培养和分子辅助育种等提供了基础。

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