一种发根根瘤菌介导的油松不定根遗传转化方法

    公开(公告)号:CN118291529B

    公开(公告)日:2024-09-03

    申请号:CN202410718122.8

    申请日:2024-06-05

    Abstract: 本发明提供了一种发根根瘤菌介导的油松不定根遗传转化方法,将带有RUBY报告基因的载体转化到发根根瘤菌中;当油松种子苗的茎长距根部超过3cm时,切掉根部,将伤口处浸没在发根根瘤菌重悬液中,并进行抽真空;将植株根部伤口处裹满发根根瘤菌菌体后,移栽至土培基质中培养30~45d,当愈伤组织分化为再生不定根时,观察再生不定根的颜色,判断是否为植物阳性转化不定根。本发明所述构建的体系突破了油松遗传转化困难的技术屏障,为油松重要基因的功能以及根茎之间信号转导等相关研究工作提供了技术操作手段,并且为后续油松乃至其他针叶树种的关键功能基因功能鉴定以及遗传修饰种质创制提供了技术支撑和指导。

    一种木豆组培苗的生根培养基、应用和生根培养方法

    公开(公告)号:CN113016608B

    公开(公告)日:2022-01-25

    申请号:CN201911355287.9

    申请日:2019-12-25

    Abstract: 本发明提供了一种木豆组培苗的生根培养基、应用和生根培养方法,涉及植物组织培养技术领域。所述生根培养基以MS为基础培养基,每升包括:0.1~0.2mg IBA、0.05~0.1mg NAA、琼脂8~10g和蔗糖30~35g。利用本发明提供的生根培养基对木豆组培苗进行生根培养,生根率达到75%以上,且根系发育良好,植株生长健壮,移栽成活率高;且具有使生根苗中黄酮活性成分牡荆素与染料木素含量显著积累提高等特点。

    一种木豆组培苗的生根培养基、应用和生根培养方法

    公开(公告)号:CN113016608A

    公开(公告)日:2021-06-25

    申请号:CN201911355287.9

    申请日:2019-12-25

    Abstract: 本发明提供了一种木豆组培苗的生根培养基、应用和生根培养方法,涉及植物组织培养技术领域。所述生根培养基以MS为基础培养基,每升包括:0.1~0.2mg IBA、0.05~0.1mg NAA、琼脂8~10g和蔗糖30~35g。利用本发明提供的生根培养基对木豆组培苗进行生根培养,生根率达到75%以上,且根系发育良好,植株生长健壮,移栽成活率高;且具有使生根苗中黄酮活性成分牡荆素与染料木素含量显著积累提高等特点。

    一种农杆菌介导真空侵染木豆的高效遗传转化方法

    公开(公告)号:CN111876439A

    公开(公告)日:2020-11-03

    申请号:CN202010428784.3

    申请日:2020-05-20

    Abstract: 本发明涉及一种农杆菌介导真空侵染木豆的高效遗传转化方法,属于分子生物学与植物转基因工程技术领域。本发明的实验步骤主要分为四个部分:外植体筛选;农杆菌侵染液制备;木豆全株真空渗透,转基因鉴定。本发明不仅可以获得由茎部诱导出的稳定转基因根系,且木豆的叶片部分经过瞬时转染可用于基因表达的快速鉴定。本发明首次发现木本植物幼苗可通过农杆菌真空渗透在茎部出转基因根。该方法不仅可以直接运用于木豆的遗传转化,同时为木本植物的遗传转化体系提供了新的思路。

    一种促进木豆种子快速萌发长成幼苗的培养方法

    公开(公告)号:CN111869556A

    公开(公告)日:2020-11-03

    申请号:CN202010438892.9

    申请日:2020-05-22

    Abstract: 本发明涉及一种促进木豆种子快速萌发长成幼苗的培养方法,包括以下步骤1)选种并消毒;2)浸种:将消毒后的种子置于干净的盆中,加水没过种子并置于恒温培养箱中;3)种子萌发:取干净的盆底部覆盖一层纱布,将浸种后的木豆置于纱布上均匀铺盖一层,加水并保持湿润,置于恒温培养箱中;4)1~2d后,将萌发长出1~2cm的种子从培养箱取出;5)灭菌:准备好洗净并烘干的石英砂和1/5霍格兰营养液,分别灭菌后冷却备用;6)沙培:将木豆种子播种于石英砂中,喷施营养液使盆内石英砂湿润,置于温室中培养。本发明可以促进木豆种子的快速萌发,尽量早筛除长势不好的木豆,能更快的获得木豆幼苗,适合于农业生产和生命科学的研究。

    一种从桑叶中高效分离纯化咖啡酰基奎宁酸异构体的方法

    公开(公告)号:CN110015959A

    公开(公告)日:2019-07-16

    申请号:CN201910231500.9

    申请日:2019-03-26

    Abstract: 本发明涉及天然产物的分离纯化领域,提供了一种从桑叶中高效分离纯化咖啡酰基奎宁酸异构体的方法。本发明将桑叶进行超声强化提取后,采用独创性的pH诱导液液萃取技术、大孔吸附树脂富集技术以及高速逆流色谱快速分离技术进行分离纯化,得到纯度达93%以上的三种咖啡酰基奎宁酸异构体。本发明通过pH诱导液液萃取使咖啡酰基奎宁酸快速进入有机相,减少萃取次数,从而节约时间,减少化学试剂的消耗,降低工业成本;并且本发明首次实现了使用高速逆流色谱快速分离技术从桑叶中分离咖啡酰基奎宁酸异构体,该方法步骤简单、溶剂消耗少、分离周期短、产物纯度高、收率高,适用于产业化生产和应用。

    一种测定银杏叶中活性成分含量的方法

    公开(公告)号:CN109765321A

    公开(公告)日:2019-05-17

    申请号:CN201910231409.7

    申请日:2019-03-26

    Abstract: 本发明属于化学分析及检测技术领域,尤其涉及一种测定银杏叶中活性成分含量的方法。本发明运用超高效液相色谱-串联四级杆质谱联用仪,采用电喷雾阴离子串联质谱多反应检测(MRM)模式,快速在线优化包括碎裂电压以及碰撞能在内的质谱参数,使之形成高强度的靶向离子对,通过此系列特征性的靶向离子对,从而达到对银杏叶药材中的银杏内酯、黄酮醇苷及双黄酮3类活性成分的快速定性和定量分析;本发明的检测方法操作简单,具有高灵敏度和精密度、重现性好、稳定性高、回收率好,可实现同时测定银杏叶中所含的银杏内酯、黄酮醇苷及双黄酮3类活性成分,弥补现有药材质量控制技术不够完善和科学的不足,能准确、全面地控制银杏叶药材的质量。

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