公开(公告)号：CN109266676A

公开(公告)日：2019-01-25

申请号：CN201811086453.5

申请日：2018-09-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 林俊芳 ,  林龙镇 ,  郭丽琼 ,  许本宏

IPC: C12N15/75

Abstract: 本发明公开一种电击转化暹罗芽孢杆菌的方法，属于微生物基因工程技术领域。本发明对暹罗芽孢杆菌JFL15电击转化过程中感受态细胞的制备、质粒的浓度以及电击参数等因素进行了全面的优化，首次建立了一套简单、有效的暹罗芽孢杆菌遗传转化方法。本发明的暹罗芽孢杆菌遗传转化方法操作简单，转化率高，效果稳定，可高效转化用于CRISPR-cas9基因敲除以及用于同源重组敲除载体的大片度质粒(>11kbp)，不仅为暹罗芽孢杆菌的遗传改造奠定了良好基础，对加快其在工业生产中的应用具有重要意义，同时也为其它芽孢杆菌的遗传转化提供了重要参考。

公开(公告)号：CN109266676B

公开(公告)日：2020-12-11

申请号：CN201811086453.5

申请日：2018-09-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 林俊芳 ,  林龙镇 ,  郭丽琼 ,  许本宏

IPC: C12N15/75

Abstract: 本发明公开一种电击转化暹罗芽孢杆菌的方法，属于微生物基因工程技术领域。本发明对暹罗芽孢杆菌JFL15电击转化过程中感受态细胞的制备、质粒的浓度以及电击参数等因素进行了全面的优化，首次建立了一套简单、有效的暹罗芽孢杆菌遗传转化方法。本发明的暹罗芽孢杆菌遗传转化方法操作简单，转化率高，效果稳定，可高效转化用于CRISPR‑cas9基因敲除以及用于同源重组敲除载体的大片度质粒(>11kbp)，不仅为暹罗芽孢杆菌的遗传改造奠定了良好基础，对加快其在工业生产中的应用具有重要意义，同时也为其它芽孢杆菌的遗传转化提供了重要参考。