公开(公告)号：CN104593278B

公开(公告)日：2017-05-03

申请号：CN201510058160.6

申请日：2015-02-04

Applicant: 厦门大学

Inventor： 卢英华 ,  何彩云 ,  姚传义 ,  林旺锦

IPC: C12N1/16 ,  C12N11/14 ,  C12R1/84

Abstract: 固定化脂肪酶的制备方法，涉及固定化脂肪酶。将菌种活化、培养后上罐发酵得游离酶液；将无水乙醇和去离子水混合，再加入氨水，混合后，加入TEOS，再离心收集白色沉淀，洗涤和干燥，然后超声分散在去离子水中，加入CTAB溶液和Na2CO3，离心收集沉淀后，洗涤和干燥，得到HMSS；将HMSS超声分散在甲苯中，磁力搅拌、冷凝回流后，加入(EtO)3SiPrCN，回流，离心收集产品，洗涤和干燥后，得改性产物HMSS‑CN；再将改性产物在硫酸中回流，离心收集产物，洗涤和干燥后，得产物HMSS‑COOH，再与游离酶液混合，在冰浴下搅拌，离心收集沉淀，并用磷酸钾缓冲液洗涤，冷冻干燥后，即得到固定化脂肪酶。

公开(公告)号：CN105385675A

公开(公告)日：2016-03-09

申请号：CN201511031787.9

申请日：2015-12-31

Applicant: 厦门大学

Inventor： 姚传义 ,  林旺锦 ,  段然 ,  江朝钦 ,  敬科举 ,  凌雪萍 ,  卢英华

IPC: C12N11/08 ,  C12N9/20 ,  C12R1/84

CPC classification number: C12N11/08 ,  C12N9/20 ,  C12Y301/01003

Abstract: 一种南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法，涉及脂肪酶B。提供酶的贮存稳定性高、便于回收且可重复利用，有利于工业化应用的一种南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法。1)先将巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)CALB进行斜面种子培养、活化种子培养和一级种子培养，然后再接入含BSM培养基的发酵罐中发酵培养，获得南极假丝酵母脂肪酶B；斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)CALB，保藏编号：CGMCC NO.10277；2)将预处理后的树脂加入含有南极假丝酵母脂肪酶B发酵液的发酵罐，使树脂处于悬浮状态下吸附；3)将步骤2)中吸附后的树脂筛出，水洗，冷冻干燥。

公开(公告)号：CN104593278A

公开(公告)日：2015-05-06

申请号：CN201510058160.6

申请日：2015-02-04

Applicant: 厦门大学

Inventor： 卢英华 ,  何彩云 ,  姚传义 ,  林旺锦

IPC: C12N1/16 ,  C12N11/14 ,  C12R1/84

CPC classification number: C12N1/16 ,  C12N9/20 ,  C12N11/14 ,  C12R1/84

Abstract: 固定化脂肪酶的制备方法，涉及固定化脂肪酶。将菌种活化、培养后上罐发酵得游离酶液；将无水乙醇和去离子水混合，再加入氨水，混合后，加入TEOS，再离心收集白色沉淀，洗涤和干燥，然后超声分散在去离子水中，加入CTAB溶液和Na2CO3，离心收集沉淀后，洗涤和干燥，得到HMSS；将HMSS超声分散在甲苯中，磁力搅拌、冷凝回流后，加入(EtO)3SiPrCN，回流，离心收集产品，洗涤和干燥后，得改性产物HMSS-CN；再将改性产物在硫酸中回流，离心收集产物，洗涤和干燥后，得产物HMSS-COOH，再与游离酶液混合，在冰浴下搅拌，离心收集沉淀，并用磷酸钾缓冲液洗涤，冷冻干燥后，即得到固定化脂肪酶。