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公开(公告)号：CN114774385B
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202210242251.5
申请日：2022-03-11
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种对胰蛋白酶抗性和胃蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶及其应用。本发明所述的对胰蛋白酶抗性和胃蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶，它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于粉红螺旋聚孢霉的玉米赤霉烯酮水解酶中制造多个氨基酸取代而产生的、对胰蛋白酶抗性和胃蛋白酶抗性提高的酶，所述的氨基酸取代是第115和254位的取代。本发明通过对玉米赤霉烯酮水解酶进行突变筛选到了一株玉米赤霉烯酮水解酶突变体，经实验表明，所获得的突变体对玉米赤霉烯酮的水解功能不受影响，对胰蛋白酶的抗性半衰期比野生型玉米赤霉烯酮水解酶延长了32％，对胃蛋白酶的抗(56)对比文件付永岩 等.降胆固醇乳酸菌的益生特性及其作用机理《.中国乳品工业》.2019,第47卷(第7期),第23-27页.Wei Peng et al.Crystal structure andsubstrate-binding mode of themycoestrogen-detoxifying lactonase ZHDfrom Clonostachys rosea《.RSC Adv》.2014,(第107期),第 62321-62 325 页 摘 要，第2-3节.王浩宇;孙晶;常晓娇;刘虎军;孙长坡.玉米赤霉烯酮降解酶ZLHY6的包埋及稳定性研究.粮油食品科技.2018,(第02期),第63-67页.
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公开(公告)号：CN114657197B
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202210356120.X
申请日：2022-04-06
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明涉及真核基因表达的转录调控因子的应用，特别是涉及一种组成型启动子Pgap的转录调控因子Gsm1p的应用。本发明公开了Gsm1p作为正调控因子在提高宿主细胞中蛋白表达中的应用，所述Gsm1p的氨基酸序列是由核苷酸序列为SEQ ID NO:1的Gsm1基因所编码的；所述应用为通过在启动子Pgap后插入Gsm1基因从而提高宿主细胞中蛋白的表达。本发明所述的应用能增强毕赤酵母组成型启动子Pgap启动子的转录，从而使其后的外源基因在毕赤酵母中高效表达，而且可以避免多拷贝或者多基因表达时，使用同一启动子产生的稀释效应，导致不同基因表达量差异过大。
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公开(公告)号：CN114774461B
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202210354723.6
申请日：2022-04-06
Applicant: 暨南大学
IPC: C12N15/81 , C07K14/395 , C12N15/31 , C12N15/113 , C12N1/19 , C12R1/84
Abstract: 本发明涉及真核基因表达的转录调控因子的应用，特别是涉及一种组成型启动子Pgap的转录调控因子Ash1p在应用。本发明公开了Ash1p作为负调控因子在提高宿主细胞中蛋白表达中的应用，所述Ash1p的氨基酸序列是由核苷酸序列为SEQ ID NO:1的Ash1基因所编码的；所述应用为通过敲除Ash1基因从而提高宿主细胞中蛋白的表达。本发明所述的应用能通过减少阻遏作用来增强毕赤酵母表达系统中组成型启动子Pgap转录调控，进而提高目的蛋白的表达效率和产量。
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公开(公告)号：CN115851633A
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202211120063.1
申请日：2022-09-15
Applicant: 暨南大学 , 广东方善能动物保健有限公司
Abstract: 本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的黄曲霉毒素氧化酶(AFO)及其应用。本发明通过蛋白质工程技术对野生型黄曲霉毒素氧化酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造，筛选得到了一种对胃蛋白酶抗性提高的突变体黄曲霉毒素氧化酶。本发明所述的作用于黄曲霉毒素(AFB1)的突变体黄曲霉毒素氧化酶(AFOG355I/G475V)对胃蛋白酶的抗性半衰期是野生型AFO的2.72倍。相比于野生型，突变体AFOG355I/G475V在10～40℃时保有40％以上的活性；最适反应pH为7.5。
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公开(公告)号：CN114774461A
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202210354723.6
申请日：2022-04-06
Applicant: 暨南大学
IPC: C12N15/81 , C07K14/395 , C12N15/31 , C12N15/113 , C12N1/19 , C12R1/84
Abstract: 本发明涉及真核基因表达的转录调控因子的应用，特别是涉及一种组成型启动子Pgap的转录调控因子Ash1p在应用。本发明公开了Ash1p作为负调控因子在提高宿主细胞中蛋白表达中的应用，所述Ash1p的氨基酸序列是由核苷酸序列为SEQ ID NO:1的Ash1基因所编码的；所述应用为通过敲除Ash1基因从而提高宿主细胞中蛋白的表达。本发明所述的应用能通过减少阻遏作用来增强毕赤酵母表达系统中组成型启动子Pgap转录调控，进而提高目的蛋白的表达效率和产量。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106978420B
公开(公告)日：2020-06-16
申请号：CN201710134190.X
申请日：2017-03-08
Applicant: 暨南大学
IPC: C12N15/115 , G01N30/02 , G01N30/74
Abstract: 本发明涉及一种对杂色曲菌素(Versicolorin A，VerA)具有特异性识别作用的核酸适配体分子以及其应用。本发明所述的一种杂色曲菌素核酸适配体是全长49nt的单链DNA，包括序列为SEQ ID NO.1的核心序列。本发明所述的VerA核酸适配体为含有核心序列37个碱基组成的单链DNA，且3’端进行了氨基的修饰。本发明所述的适配体亲和柱组装了所述的Ver A核酸适配体。该适配体亲和柱配合高效液相色谱的荧光或紫外检测器联用可检测100ppb的Ver A。该样品前处理方法操作简单便捷，较液液萃取法灵敏度高且更加稳定可靠。本发明为Ver A的检测提供了一种新的快速的样品前处理方法。
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公开(公告)号：CN109504669A
公开(公告)日：2019-03-22
申请号：CN201811258811.6
申请日：2018-10-26
Applicant: 暨南大学
IPC: C12N9/42 , C12N15/56 , A23L29/00 , A23K20/189
Abstract: 本发明公开了一种对胰蛋白酶抗性提高的β-葡萄糖苷酶及其应用。本发明通过蛋白质工程技术对野生型β-葡萄糖苷酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造，提供了一种获得对胰蛋白酶抗性提高的β-葡萄糖苷酶突变体。本发明所述的作用于纤维二糖和短链纤维寡糖的突变体β-葡萄糖苷酶(mBGL1)，对胰蛋白酶的抗性比野生型BGL1提高2倍以上，半衰期延长，其他酶学性质与野生型酶基本一致。
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公开(公告)号：CN107674867A
公开(公告)日：2018-02-09
申请号：CN201710763368.7
申请日：2017-08-30
Applicant: 暨南大学
IPC: C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/70 , A23L29/00 , A23K20/189
Abstract: 本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的纤维素酶E4。本发明所述的一种定点突变改造的纤维素酶E4是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于褐色热单胞杆菌(Thermonospora fusca)的纤维素酶E4中制造多个氨基酸取代而产生的、对胃蛋白酶抗性更强的纤维素分解酶，所述的氨基酸取代是第691位和第800位的取代。本发明所述的纤维素酶E4不仅依然对纤维素具有催化功能，而且提高了其对胃蛋白酶的耐受性。
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公开(公告)号：CN104130984B
公开(公告)日：2016-09-28
申请号：CN201410370164.3
申请日：2014-07-30
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种作用于杂色曲菌素的黄曲霉毒素氧化酶。本发明通过基因工程技术对野生型黄曲霉毒素氧化酶(AFO)底物结合部位的关键氨基酸残基进行了改造，提供了一种获得对底物杂色曲菌素(Ver A)的选择性和亲和性提高的AFO突变体。本发明所述的作用于杂色曲菌素的突变体黄曲霉毒素氧化酶(mAFO555)，对底物Ver A的选择性比野生型AFO提高18倍，对底物Ver A的亲和性比野生型AFO提高6倍；对Ver A的比酶活力比野生型AFO的提高4倍。
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公开(公告)号：CN104130984A
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201410370164.3
申请日：2014-07-30
Applicant: 暨南大学
CPC classification number: C12N9/0004
Abstract: 本发明公开了一种作用于杂色曲菌素的黄曲霉毒素氧化酶。本发明通过基因工程技术对野生型黄曲霉毒素氧化酶(AFO)底物结合部位的关键氨基酸残基进行了改造，提供了一种获得对底物杂色曲菌素(Ver A)的选择性和亲和性提高的AFO突变体。本发明所述的作用于杂色曲菌素的突变体黄曲霉毒素氧化酶(mAFO555)，对底物Ver A的选择性比野生型AFO提高18倍，对底物Ver A的亲和性比野生型AFO提高6倍；对Ver A的比酶活力比野生型AFO的提高4倍。
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