一种对胃蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶

    公开(公告)号:CN114774386B

    公开(公告)日:2024-02-02

    申请号:CN202210242924.7

    申请日:2022-03-11

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶及其应用。本发明所述的对胃蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶,它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于粉红螺旋聚孢霉的玉米赤霉烯酮水解酶中制造单个氨基酸取代而产生的、对胃蛋白酶抗性更强的酶,所述的氨基酸取代是第115位的取代。本发明通过对玉米赤霉烯酮水解酶进行突变筛选到了一株玉米赤霉烯酮水解酶突变体,经实验表明,所获得的玉米赤霉烯酮水解酶突变体对玉米赤霉烯酮的水解功能不受影响,对胃蛋白酶的抗性半衰期比野生型玉米赤霉烯酮水解酶延长了48%。(56)对比文件徐荣荣.玉米赤霉烯酮降解酶Zhd101的突变改造、分泌表达及应用研究《.中国优秀硕士学位论文全文数据库医药卫生科技辑》.2019,(第12期),E079-120.Wei Peng et al.Crystal structure andsubstrate-binding mode of themycoestrogen-detoxifying lactonase ZHDfrom Clonostachys rosea《.RSC Adv》.2014,(第107期),第62321-62325页 摘要,第2-3节.

    一种对胃蛋白酶抗性提高的α-淀粉酶

    公开(公告)号:CN113881654B

    公开(公告)日:2023-06-09

    申请号:CN202111050639.7

    申请日:2021-09-08

    Abstract: 本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的α‑淀粉酶,它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于米曲霉的α‑淀粉酶中制造多个氨基酸取代而产生的、对胃蛋白酶抗性更强的酶,所述的氨基酸取代是第221和375位的氨基酸取代。本发明通过蛋白质工程技术对野生型α‑淀粉酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造,提供了一种获得对胃蛋白酶抗性提高的α‑淀粉酶突变体,该酶对胃蛋白酶的抗性半衰期比野生型提高了2.54倍。突变型α‑淀粉酶的胃蛋白酶抗性是野生型α‑淀粉酶的胃蛋白酶抗性的1.42倍。突变型α‑淀粉酶的其他酶学性质与野生型α‑淀粉酶基本一致。

    Gsm1p作为正调控因子在提高宿主细胞中蛋白表达中的应用

    公开(公告)号:CN114657197A

    公开(公告)日:2022-06-24

    申请号:CN202210356120.X

    申请日:2022-04-06

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明涉及真核基因表达的转录调控因子的应用,特别是涉及一种组成型启动子Pgap的转录调控因子Gsm1p的应用。本发明公开了Gsm1p作为正调控因子在提高宿主细胞中蛋白表达中的应用,所述Gsm1p的氨基酸序列是由核苷酸序列为SEQ ID NO:1的Gsm1基因所编码的;所述应用为通过在启动子Pgap后插入Gsm1基因从而提高宿主细胞中蛋白的表达。本发明所述的应用能增强毕赤酵母组成型启动子Pgap启动子的转录,从而使其后的外源基因在毕赤酵母中高效表达,而且可以避免多拷贝或者多基因表达时,使用同一启动子产生的稀释效应,导致不同基因表达量差异过大。

    一种对胃蛋白酶抗性提高的β-葡萄糖苷酶

    公开(公告)号:CN109371003A

    公开(公告)日:2019-02-22

    申请号:CN201811258392.6

    申请日:2018-10-26

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的β-葡萄糖苷酶及其应用。本发明通过蛋白质工程技术对野生型β-葡萄糖苷酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造,提供了一种获得对胃蛋白酶抗性提高的β-葡萄糖苷酶突变体。本发明所述的作用于纤维二糖和短链纤维寡糖的突变体β-葡萄糖苷酶(mBGL1S84C;Q643P;G696V)对胃蛋白酶的抗性半衰期比野生型BGL1延长了,残留酶比活力提高了4.8倍,其他酶学性质与野生型β-葡萄糖苷酶基本一致。

    一种定点突变改造的人二肽基肽酶III

    公开(公告)号:CN105400755B

    公开(公告)日:2018-10-30

    申请号:CN201510908900.0

    申请日:2015-12-09

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明涉及一种定点突变改造的人二肽基肽酶III。本发明所述的定点突变改造的人二肽基肽酶III,其特征在于:它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的人二肽基肽酶III中制造多个氨基酸取代而产生的突变体,所述的氨基酸取代包括第560、562、564位的取代,以致所述定点突变改造的人二肽基肽酶III为对6‑甲氧基双呋喃香豆素具有氧化分解作用的酶。本发明所述的定点突变改造的人二肽基肽酶III可应用于制备饲料及其添加剂或食品及其添加剂中消除6‑甲氧基双呋喃香豆素的产品,还可应用于制备预防由6‑甲氧基双呋喃香豆素诱发的疾病的药物。

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