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公开(公告)号:CN114774386B
公开(公告)日:2024-02-02
申请号:CN202210242924.7
申请日:2022-03-11
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶及其应用。本发明所述的对胃蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶,它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于粉红螺旋聚孢霉的玉米赤霉烯酮水解酶中制造单个氨基酸取代而产生的、对胃蛋白酶抗性更强的酶,所述的氨基酸取代是第115位的取代。本发明通过对玉米赤霉烯酮水解酶进行突变筛选到了一株玉米赤霉烯酮水解酶突变体,经实验表明,所获得的玉米赤霉烯酮水解酶突变体对玉米赤霉烯酮的水解功能不受影响,对胃蛋白酶的抗性半衰期比野生型玉米赤霉烯酮水解酶延长了48%。(56)对比文件徐荣荣.玉米赤霉烯酮降解酶Zhd101的突变改造、分泌表达及应用研究《.中国优秀硕士学位论文全文数据库医药卫生科技辑》.2019,(第12期),E079-120.Wei Peng et al.Crystal structure andsubstrate-binding mode of themycoestrogen-detoxifying lactonase ZHDfrom Clonostachys rosea《.RSC Adv》.2014,(第107期),第62321-62325页 摘要,第2-3节.
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公开(公告)号:CN113980932B
公开(公告)日:2023-08-01
申请号:CN202111231828.4
申请日:2021-10-22
Applicant: 暨南大学 , 开平牵牛生化制药有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程和蛋白质工程技术领域,公开了一种定点突变的α‑葡萄糖苷酶。本发明所述定点突变的α‑葡萄糖苷酶是在氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的α‑葡萄糖苷酶中制造两个氨基酸取代而产生的;所述的氨基酸取代是第120位和第215位的取代。本发明提供了所述的定点突变的α‑葡萄糖苷酶在制备2‑O‑α‑D‑葡萄糖基‑L‑抗坏血酸中的应用。本发明所述定点突变的α‑葡萄糖苷酶能够降低合成AA‑2G时副产物AA‑6G的含量,且提高了AA‑2G产量,其他酶学性质与野生型酶基本一致。
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公开(公告)号:CN113755468B
公开(公告)日:2023-06-30
申请号:CN202111052143.3
申请日:2021-09-08
Applicant: 暨南大学 , 广东方善能动物保健有限公司
Abstract: 本发明公开了一种对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶,它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)的玉米赤霉烯酮水解酶中制造单个氨基酸取代而产生的、对胰蛋白酶抗性更强的酶,所述的氨基酸取代是第262位的取代。本发明通过蛋白质工程技术对野生型玉米赤霉烯酮水解酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造,提供了一种对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶突变体,该酶对胰蛋白酶的抗性半衰期比野生型玉米赤霉烯酮水解酶延长了20.8%,其他酶学性质与野生型玉米赤霉烯酮水解酶基本一致。
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公开(公告)号:CN113881654B
公开(公告)日:2023-06-09
申请号:CN202111050639.7
申请日:2021-09-08
Applicant: 暨南大学 , 广东方善能动物保健有限公司
IPC: C12N9/30 , C12N15/81 , A23K20/189 , A23L29/00
Abstract: 本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的α‑淀粉酶,它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于米曲霉的α‑淀粉酶中制造多个氨基酸取代而产生的、对胃蛋白酶抗性更强的酶,所述的氨基酸取代是第221和375位的氨基酸取代。本发明通过蛋白质工程技术对野生型α‑淀粉酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造,提供了一种获得对胃蛋白酶抗性提高的α‑淀粉酶突变体,该酶对胃蛋白酶的抗性半衰期比野生型提高了2.54倍。突变型α‑淀粉酶的胃蛋白酶抗性是野生型α‑淀粉酶的胃蛋白酶抗性的1.42倍。突变型α‑淀粉酶的其他酶学性质与野生型α‑淀粉酶基本一致。
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公开(公告)号:CN114657197A
公开(公告)日:2022-06-24
申请号:CN202210356120.X
申请日:2022-04-06
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明涉及真核基因表达的转录调控因子的应用,特别是涉及一种组成型启动子Pgap的转录调控因子Gsm1p的应用。本发明公开了Gsm1p作为正调控因子在提高宿主细胞中蛋白表达中的应用,所述Gsm1p的氨基酸序列是由核苷酸序列为SEQ ID NO:1的Gsm1基因所编码的;所述应用为通过在启动子Pgap后插入Gsm1基因从而提高宿主细胞中蛋白的表达。本发明所述的应用能增强毕赤酵母组成型启动子Pgap启动子的转录,从而使其后的外源基因在毕赤酵母中高效表达,而且可以避免多拷贝或者多基因表达时,使用同一启动子产生的稀释效应,导致不同基因表达量差异过大。
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公开(公告)号:CN107674867B
公开(公告)日:2021-03-05
申请号:CN201710763368.7
申请日:2017-08-30
Applicant: 暨南大学
IPC: C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/70 , A23L29/00 , A23K20/189
Abstract: 本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的纤维素酶E4。本发明所述的一种定点突变改造的纤维素酶E4是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于褐色热单胞杆菌(Thermonospora fusca)的纤维素酶E4中制造多个氨基酸取代而产生的、对胃蛋白酶抗性更强的纤维素分解酶,所述的氨基酸取代是第691位和第800位的取代。本发明所述的纤维素酶E4不仅依然对纤维素具有催化功能,而且提高了其对胃蛋白酶的耐受性。
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公开(公告)号:CN109371003A
公开(公告)日:2019-02-22
申请号:CN201811258392.6
申请日:2018-10-26
Applicant: 暨南大学
IPC: C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/81 , A23L29/00 , A23K20/189
Abstract: 本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的β-葡萄糖苷酶及其应用。本发明通过蛋白质工程技术对野生型β-葡萄糖苷酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造,提供了一种获得对胃蛋白酶抗性提高的β-葡萄糖苷酶突变体。本发明所述的作用于纤维二糖和短链纤维寡糖的突变体β-葡萄糖苷酶(mBGL1S84C;Q643P;G696V)对胃蛋白酶的抗性半衰期比野生型BGL1延长了,残留酶比活力提高了4.8倍,其他酶学性质与野生型β-葡萄糖苷酶基本一致。
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公开(公告)号:CN105400755B
公开(公告)日:2018-10-30
申请号:CN201510908900.0
申请日:2015-12-09
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明涉及一种定点突变改造的人二肽基肽酶III。本发明所述的定点突变改造的人二肽基肽酶III,其特征在于:它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的人二肽基肽酶III中制造多个氨基酸取代而产生的突变体,所述的氨基酸取代包括第560、562、564位的取代,以致所述定点突变改造的人二肽基肽酶III为对6‑甲氧基双呋喃香豆素具有氧化分解作用的酶。本发明所述的定点突变改造的人二肽基肽酶III可应用于制备饲料及其添加剂或食品及其添加剂中消除6‑甲氧基双呋喃香豆素的产品,还可应用于制备预防由6‑甲氧基双呋喃香豆素诱发的疾病的药物。
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公开(公告)号:CN104774820B
公开(公告)日:2018-01-30
申请号:CN201510175222.1
申请日:2015-04-14
Applicant: 暨南大学 , 开平牵牛生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种对胰蛋白酶和胃蛋白酶抗性提高的甘露聚糖酶及其应用。本发明通过蛋白质工程技术对野生型甘露聚糖酶三维结构外层部位的关键氨基酸残基进行了改造,提供了一种获得对胰蛋白酶和胃蛋白酶抗性提高的甘露聚糖酶MAN47突变体。本发明所述的作用于甘露聚糖的突变体甘露聚糖酶(MAN47M121F/T123N/S153F/I157T/G346F/Q347N),对胰蛋白酶的抗性比野生型MAN47提高1.21倍,对胃蛋白酶的抗性比野生型MAN47提高1.70倍,其他酶学性质较野生型酶有小幅度的提高。
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公开(公告)号:CN107400665A
公开(公告)日:2017-11-28
申请号:CN201710768022.6
申请日:2017-08-31
Applicant: 暨南大学
IPC: C12N9/42 , C12N15/56 , A23K20/189 , A23L33/10
CPC classification number: C12N9/2494 , A23K20/189 , A23L33/10 , C12Y302/01078
Abstract: 本发明公开了一种定点突变的甘露聚糖酶。它是由氨基酸序列为SEQ IDNO.1的来源于Armillariella tabescens的β-甘露聚糖酶MAN47中制造多个氨基酸取代而产生的突变体,所述的氨基酸取代包括第197、280、380位的取代。本发明所述的β-甘露聚糖酶MAN47突变体具有耐高温、较宽的pH稳定性、对胰蛋白酶耐受性提高的优点。
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