公开(公告)号：CN103361355A

公开(公告)日：2013-10-23

申请号：CN201310323234.5

申请日：2013-07-29

Applicant: 暨南大学

Inventor： 谢秋玲 ,  熊盛 ,  洪岸 ,  黄亚东 ,  陈志南 ,  陈慧萍

IPC: C12N15/13 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12P21/08

Abstract: 本发明公开一种编码重组rhHER2-mAb人源化单克隆抗体的基因及其应用。该基因包含如SEQ ID NO.1所示的编码轻链的核苷酸序列和如SEQ ID NO.2所示的编码重链的核苷酸序列。分别在前述两个序列上设计信号肽、起始密码子和终止密码子；将设计好的序列分别克隆至真核表达载体中，共同转染CHO细胞，得到表达重组rhHER2-mAb人源化单克隆抗体的CHO细胞，再对该CHO细胞进行发酵。本发明由于对密码子进行优化，转基因后的CHO细胞表达重组人rhHER2-mAb的表达量高；且本发明提供的发酵方法，特别是在添加补料培养基后，延长细胞生长时间，提高表达水平，降低生产成本，获得高纯度的目的蛋白。

公开(公告)号：CN102911958B

公开(公告)日：2014-08-06

申请号：CN201210380254.1

申请日：2012-10-09

Applicant: 暨南大学

Inventor： 熊盛 ,  谢秋玲 ,  洪岸 ,  黄亚东 ,  陈志南 ,  陈慧萍

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10 ,  C12P21/02

Abstract: 本发明公开了一种编码重组人TNFR-Fc融合蛋白的基因及其应用。本发明通过密码子优化筛选，得到如SEQ ID NO.1所示的编码重组人TNFR-Fc融合蛋白的基因。该基因在CHO细胞中表达量高，且表达出来的蛋白与TNFR的亲和力高。将该基因转入CHO细胞，得到表达重组人TNFR-Fc融合蛋白的细胞。本发明使用一次性反应器发酵转有该基因的CHO细胞，操作简单，得到的蛋白量较使用传统发酵罐高；特别是在添加补料培养基后，可延长细胞生长时间，提高表达水平，降低生产成本，获得高纯度的目的蛋白。

公开(公告)号：CN103361355B

公开(公告)日：2016-01-20

申请号：CN201310323234.5

申请日：2013-07-29

Applicant: 暨南大学

Inventor： 谢秋玲 ,  熊盛 ,  洪岸 ,  黄亚东 ,  陈志南 ,  陈慧萍

IPC: C12N15/13 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12P21/08

Abstract: 本发明公开一种编码重组rhHER2-mAb人源化单克隆抗体的基因及其应用。该基因包含如SEQ ID NO.1所示的编码轻链的核苷酸序列和如SEQ ID NO.2所示的编码重链的核苷酸序列。分别在前述两个序列上设计信号肽、起始密码子和终止密码子；将设计好的序列分别克隆至真核表达载体中，共同转染CHO细胞，得到表达重组rhHER2-mAb人源化单克隆抗体的CHO细胞，再对该CHO细胞进行发酵。本发明由于对密码子进行优化，转基因后的CHO细胞表达重组人rhHER2-mAb的表达量高；且本发明提供的发酵方法，特别是在添加补料培养基后，延长细胞生长时间，提高表达水平，降低生产成本，获得高纯度的目的蛋白。

公开(公告)号：CN102911958A

公开(公告)日：2013-02-06

申请号：CN201210380254.1

申请日：2012-10-09

Applicant: 暨南大学

Inventor： 熊盛 ,  谢秋玲 ,  洪岸 ,  黄亚东 ,  陈志南 ,  陈慧萍

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10 ,  C12P21/02

Abstract: 本发明公开了一种编码重组人TNFR-Fc融合蛋白的基因及其应用。本发明通过密码子优化筛选，得到如SEQ ID NO.1所示的编码重组人TNFR-Fc融合蛋白的基因。该基因在CHO细胞中表达量高，且表达出来的蛋白与TNFR的亲和力高。将该基因转入CHO细胞，得到表达重组人TNFR-Fc融合蛋白的细胞。本发明使用一次性反应器发酵转有该基因的CHO细胞，操作简单，得到的蛋白量较使用传统发酵罐高；特别是在添加补料培养基后，可延长细胞生长时间，提高表达水平，降低生产成本，获得高纯度的目的蛋白。