公开(公告)号：CN111004787B

公开(公告)日：2022-05-10

申请号：CN202010009417.X

申请日：2020-01-06

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴静 ,  冯小娜 ,  刘佳 ,  宋伟 ,  罗秋玲 ,  陈修来 ,  高聪

IPC: C12N9/16 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P13/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种链霉菌磷脂酶D突变体、改造方法及其应用，属于生物工程技术领域。本发明的改造方法通过PLD的蛋白质改造，设计最佳突变体，克服了之前野生型的酶由于不能催化大体积底物而导致催化活性的降低，并通过实验验证。最终得到最佳突变体Q357F/Y405A，其kcat/Km(1.25mM‑1s‑1)较野生型提高了58％，磷脂酰丝氨酸的转化率为50.8％，产量达到38.6g/L，用本发明的方法可以大大降低成本，加快了酶转化法生产磷酯酰丝氨酸的工业化进程。

公开(公告)号：CN111004787A

公开(公告)日：2020-04-14

申请号：CN202010009417.X

申请日：2020-01-06

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴静 ,  冯小娜 ,  刘佳 ,  宋伟 ,  罗秋玲 ,  陈修来 ,  高聪

IPC: C12N9/16 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P13/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种链霉菌磷脂酶D突变体、改造方法及其应用，属于生物工程技术领域。本发明的改造方法通过PLD的蛋白质改造，设计最佳突变体，克服了之前野生型的酶由于不能催化大体积底物而导致催化活性的降低，并通过实验验证。最终得到最佳突变体Q357F/Y405A，其kcat/Km(1.25mM-1s-1)较野生型提高了58％，磷脂酰丝氨酸的转化率为50.8％，产量达到38.6g/L，用本发明的方法可以大大降低成本，加快了酶转化法生产磷酯酰丝氨酸的工业化进程。