公开(公告)号：CN118064536A

公开(公告)日：2024-05-24

申请号：CN202410237565.5

申请日：2024-03-01

Applicant: 浙江大学

Inventor： 王新霞 ,  刘有华 ,  刘佳琪 ,  任芮缇

IPC: C12Q1/02 ,  G01N21/64 ,  C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/113 ,  C12N15/53 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种靶向FTO基因调控mRNA m6A水平进行营养素高通量筛选的技术体系。基于CRISPR knock‑in技术，构建靶向FTO基因的sgRNA‑Cas9载体和两侧包含FTO基因同源臂的mNeonGreen DNA模版质粒，利用核电转法将其转入脂肪细胞中得到FTO报告细胞，对1000种以上的营养素(包括但不限于植物提取物、脂肪酸、氨基酸等多种营养素库)进行高通量细胞处理，通过共聚焦高内涵成像分析系统观察mNeonGreen荧光表达，筛选得到能够调控mRNA m6A水平的营养素。本发明可用于高通量筛选调控mRNA m6A水平的营养素，对于简便、快速、高效地鉴定具有mRNA m6A水平调控活性的营养素具有重要意义。