公开(公告)号：CN101402954A

公开(公告)日：2009-04-08

申请号：CN200810122275.7

申请日：2008-11-17

Applicant: 浙江大学

Inventor： 汪以真 ,  韩菲菲 ,  谢永刚 ,  刘倚帆 ,  杜华华 ,  刘光富 ,  黄海青 ,  汪敏

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/81 ,  C07K14/47 ,  C12P21/04

Abstract: 本发明涉及一种用毕赤嗜甲醇酵母表达重组猪乳铁蛋白N叶的方法，由PLFN基因的扩增、重组酵母表达载体的构建与鉴定、重组酵母表达载体转化酵母细胞PMAD11、Ade+Muts表型转化子的筛选检测、Ade+Muts菌株的诱导表达、目的蛋白的纯化与鉴定、目的蛋白表达量的检测、摇瓶及10l发酵罐发酵条件优化及发酵等步骤组成，该工艺生产过程简单，产品纯度高，可以开发为饲料添加剂。

公开(公告)号：CN103333225A

公开(公告)日：2013-10-02

申请号：CN201310126503.9

申请日：2013-04-11

Applicant: 浙江大学

Inventor： 汪以真 ,  韩菲菲 ,  谢永刚 ,  张海文 ,  夏溪

IPC: C07K7/08 ,  C12N15/81 ,  A61K38/10 ,  A61P31/04 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了抗菌肽及其制备方法和应用。所述抗菌肽为猪乳铁蛋白肽LFP-20或改建抗菌肽LF-2或改建抗菌肽LF-6。所述的抗菌肽的制备方法为固相化学合成法，或利用基因工程表达技术将抗菌肽的编码基因克隆到载体上，然后在宿主细胞表达后获得。所述的基因工程表达技术所用的工程菌为基因工程菌P.pastorisSMD1168，表达载体为真核表达载体PICZαA。所述的抗菌肽在制备治疗革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌感染性疾病药物中的应用。改建的抗菌肽能够提高LFP-20的体外杀菌活性和杀菌速度、增强其对细菌内膜和外膜的渗透性，从而提高LFP-20的杀菌力；改建抗菌肽LF-2、LF-6还具有更强的清除体内细菌能力；本发明还涉及一种用毕赤巴斯德酵母表达重组改建抗菌肽LF-6的方法。本发明过程简单，产物具有明显的抑菌活性。

公开(公告)号：CN101434914A

公开(公告)日：2009-05-20

申请号：CN200810122351.4

申请日：2008-11-20

Applicant: 浙江大学

Inventor： 汪以真 ,  谢永刚 ,  韩菲菲 ,  刘倚帆 ,  郭佳 ,  杜华华

IPC: C12N1/19 ,  A23K1/00 ,  A23K1/16 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种含猪乳铁蛋白N叶的高蛋白酵母粉的生产方法，包括以下步骤：1)种子活化：将保藏号为CGMCC NO：2724的重组猪乳铁蛋白N叶的重组P.methanolica酵母菌在YPD固体培养基上进行种子活化；2)种子的初培养：将活化后所得的单菌落接入液体种子培养基中使用摇瓶配制成初级种子液；3)种子的扩培：将初级种子液以4％体积比的接种量接种于发酵罐内的发酵基础培养基中培养；4)发酵：将种子液以4％体积比的接种量接种于发酵罐内的发酵基础培养基发酵；5)发酵液的后处理：将发酵液依次经分离纯化、浓缩和干燥，得含有猪乳铁蛋白N叶的高蛋白酵母粉。采用本发明方法生产的酵母粉蛋白质含量高。