公开(公告)号：CN108642127A

公开(公告)日：2018-10-12

申请号：CN201810273463.3

申请日：2018-03-29

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 丁作美 ,  吴建国 ,  张超 ,  石超南 ,  王媛媛

IPC: C12Q1/25

Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供水稻E3泛素连接酶在检测植物细胞核亚细胞定位中的应用，本发明主要基于水稻泛素融合蛋白与荧光蛋白分子融合，结合荧光显微镜报告蛋白在细胞器中的定位。所述蛋白细胞核定位检测方法主要由指示蛋白UF和GFP组成的融合蛋白，所述融合蛋白与待测蛋白的荧光颜色不同，检测待测蛋白是否定位在细胞核。该方法可以通过农杆菌介导的瞬时表达系统，在植物细胞内瞬时表达融合蛋白，对融合蛋白进行荧光观察，能具体指示细胞核细胞器，结果判定简单、快捷，同时可消除在使用DAPI指示细胞核定位的过程中接触高毒致癌物质，提高操作的安全性等优势。

公开(公告)号：CN108642127B

公开(公告)日：2022-05-03

申请号：CN201810273463.3

申请日：2018-03-29

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 丁作美 ,  吴建国 ,  张超 ,  石超南 ,  王媛媛

IPC: C12Q1/25

Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供水稻E3泛素连接酶在检测植物细胞核亚细胞定位中的应用，本发明主要基于水稻泛素融合蛋白与荧光蛋白分子融合，结合荧光显微镜报告蛋白在细胞器中的定位。所述蛋白细胞核定位检测方法主要由指示蛋白UF和GFP组成的融合蛋白，所述融合蛋白与待测蛋白的荧光颜色不同，检测待测蛋白是否定位在细胞核。该方法可以通过农杆菌介导的瞬时表达系统，在植物细胞内瞬时表达融合蛋白，对融合蛋白进行荧光观察，能具体指示细胞核细胞器，结果判定简单、快捷，同时可消除在使用DAPI指示细胞核定位的过程中接触高毒致癌物质，提高操作的安全性等优势。

公开(公告)号：CN106771243A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201611204136.X

申请日：2016-12-23

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 郑璐平 ,  张冬梅 ,  丁作美 ,  张成龙 ,  吴祖建

IPC: G01N33/68 ,  G01N21/64 ,  C12Q1/02

CPC classification number: G01N33/68 ,  G01N21/6486 ,  G01N33/5097

Abstract: 本发明提供了指示植物核仁和柯浩体亚细胞定位的试剂盒及检测方法，所述试剂盒包括两种融合蛋白烟草纤维蛋白，为带有黄色荧光的融合蛋白YFP‑NbFib2和带有青色荧光的融合蛋白CFP‑NbFib2。本发明采用的试剂盒特异性更强，能具体指示细胞核上的核仁和柯浩体亚细胞器；操作更为简单：可以与预观察的蛋白同时注射，减少对植株的伤害；操作更为安全：避免了在使用DAPI过程中接触有毒等致癌物质；结果判定简单：只需在共聚焦下观察荧光颜色即可。