一种快速、高效提取水稻组织总RNA的方法

    公开(公告)号:CN101875930A

    公开(公告)日:2010-11-03

    申请号:CN200910310602.6

    申请日:2009-11-28

    Abstract: 本发明涉及一种快速、高效提取水稻组织总RNA的方法,其特征在于:按以下步骤进行:称取水稻组织100mg置于陶瓷研钵(未灭菌)中,加入液氮后迅速研磨,研磨时间控制在1min之内;将研磨后的匀浆倒入1.5ml EP管中,后加入1ml的Trizol,充分混匀后15s,加0.2ml氯仿溶液充分混匀15s;12000g离心10min,取上层水相转入新的1.5ml PE管中,加0.5ml异丙醇,于20℃下静置20min;12000g离心10min,倒掉上层清液,加1ml现配的75%的乙醇洗涤沉淀二次,取沉淀物置超净工作台吹干,加DEPC水溶解。本发明水稻组织总RNA的提取方法具有快速、高效、完整性等优点。

    一种有效垂钓水稻启动子DNA结合蛋白的方法

    公开(公告)号:CN109517029B

    公开(公告)日:2022-03-04

    申请号:CN201811420354.6

    申请日:2018-11-26

    Abstract: 本发明提供一种有效垂钓水稻启动子DNA结合蛋白的方法,包括利用含有NP‑40,NaCl,PMSF等的蛋白提取缓冲液提取水稻叶片天然总蛋白,进一步用生物素标记引物并扩增启动子DNA,将启动子DNA与链霉亲和素偶联的磁珠孵育,在此基础上,将启动子DNA与磁珠的复合物与水稻叶片天然总蛋白孵育,得到与启动子DNA结合的蛋白。本方法适用于水稻不同品种的启动子DNA结合蛋白的研究,也可用于研究不同植物启动子DNA的结合蛋白。建立了一种高效、简易获得植物启动子DNA结合蛋白的技术。

    一种快速、高效提取水稻组织总RNA的方法

    公开(公告)号:CN101875930B

    公开(公告)日:2013-05-01

    申请号:CN200910310602.6

    申请日:2009-11-28

    Abstract: 本发明涉及一种快速、高效提取水稻组织总RNA的方法,其特征在于:按以下步骤进行:称取水稻组织100mg置于陶瓷研钵(未灭菌)中,加入液氮后迅速研磨,研磨时间控制在1min之内;将研磨后的匀浆倒入1.5ml EP管中,后加入1ml的Trizol,充分混匀后15s,加0.2ml氯仿溶液充分混匀15s;12000g离心10min,取上层水相转入新的1.5ml PE管中,加0.5ml异丙醇,于20℃下静置20min;12000g离心10min,倒掉上层清液,加1ml现配的75%的乙醇洗涤沉淀二次,取沉淀物置超净工作台吹干,加DEPC水溶解。本发明水稻组织总RNA的提取方法具有快速、高效、完整性等优点。

    一种水培液中微生物基因组DNA的提取方法

    公开(公告)号:CN104087573A

    公开(公告)日:2014-10-08

    申请号:CN201410270513.4

    申请日:2014-06-18

    Abstract: 本发明涉及一种水培液中微生物基因组DNA的提取方法,属于生物技术领域。本发明的提取方法先将水培液中的杂质通过定性滤纸进行过滤去除,进一步0.22μm的滤膜收集水体微生物,用液氮/65℃水浴的冻融方法破碎微生物细胞,再加入SDS及溶菌酶裂解细胞,CTAB结合蛋白质及多聚糖、游离核酸,加入酚、氯仿混合物萃取后,萃取液用异丙醇沉淀,最终获得水体微生物基因组DNA。利用该方法提取的核酸纯度较高,且产量较高。试验证明,此法提取的水体微生物DNA,完整性好,纯度较高,进一步纯化后可用于下游的基因组文库构建、qPCR、高通量测序等。

    一种土壤微生物基因组DNA和总RNA的提取方法

    公开(公告)号:CN101974513A

    公开(公告)日:2011-02-16

    申请号:CN201010548527.X

    申请日:2010-11-18

    Abstract: 本发明提供一种有效提取作物根际土壤微生物基因组DNA和总RNA的方法,包括将土壤样品先用硫酸铝去除腐殖质等严重干扰核酸提取的杂质,进一步用玻璃珠破碎土壤微生物细胞,再加入SDS及LiCl溶液裂解细胞、游离核酸,加入酚、氯仿和异戊醇混合物萃取后,萃取液用异丙醇及醋酸钠沉淀,最终获得土壤微生物宏基因组DNA和总RNA。本方法适用于不同地域土壤DNA和总RNA的提取,建立了一种操作流程的简易,制备样品纯度较高的提取技术,能够为土壤宏基因组学研究提供重要基础。

    一种全程机械化中低留桩再生稻的栽培方法

    公开(公告)号:CN108293740A

    公开(公告)日:2018-07-20

    申请号:CN201710849038.X

    申请日:2017-09-20

    Abstract: 本发明属于农作物栽培技术领域,具体涉及一种全程机械化中低留桩再生稻栽培的方法,其步骤:A.品种选择;B.育秧床土准备;C.秧田准备;D.适时早播;E.播种、育机插秧;F.整地开沟;G.合理密植;H.肥料施用;I.水分管理;J.九黄收割、合理留桩;K.病虫害防治;L.再生季收割。通过本发明在再生稻生产上的应用,缩短全程机械化再生季稻碾压区与非碾压区成熟期差异至10天左右,促进了腋芽萌发,提高了再生季稻产量和稻米品质,大大降低了劳动强度和劳动力投入,节本增效效果明显,促进了农民增产增收。

    一种利用稻秆粉加粘细菌抑制稻田杂草生长的方法

    公开(公告)号:CN104663328B

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201510123478.8

    申请日:2015-03-20

    Abstract: 本发明提供一种利用稻秆粉加粘细菌抑制稻田杂草生长的方法,包括先将干稻秆粉碎过筛后撒施于田块;采用兔粪诱导法从稻田土壤中诱导分离、纯化粘细菌并进行扩大培养,并与灭菌的碎兔粪进行混合后,浇洒于撒施稻草粉的田块,稻草粉与粘细菌相互作用抑制稻田杂草生长,通过这些技术建立了一种操作流程简易,成本低,生态安全性好的稻田除草新方法,能够为稻田绿色安全除草利用开发提供借鉴。

    一种水培液中微生物基因组DNA的提取方法

    公开(公告)号:CN104087573B

    公开(公告)日:2016-06-08

    申请号:CN201410270513.4

    申请日:2014-06-18

    Abstract: 本发明涉及一种水培液中微生物基因组DNA的提取方法,属于生物技术领域。本发明的提取方法先将水培液中的杂质通过定性滤纸进行过滤去除,进一步0.22μm的滤膜收集水体微生物,用液氮/65℃水浴的冻融方法破碎微生物细胞,再加入SDS及溶菌酶裂解细胞,CTAB结合蛋白质及多聚糖、游离核酸,加入酚、氯仿混合物萃取后,萃取液用异丙醇沉淀,最终获得水体微生物基因组DNA。利用该方法提取的核酸纯度较高,且产量较高。试验证明,此法提取的水体微生物DNA,完整性好,纯度较高,进一步纯化后可用于下游的基因组文库构建、qPCR、高通量测序等。

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