公开(公告)号：CN102099463A

公开(公告)日：2011-06-15

申请号：CN200980128322.1

申请日：2009-04-30

Applicant: 美国农业部

Inventor： 尼尔·C·塔尔博特 ,  托马斯·J·卡佩尔纳 ,  瑞安·威拉德

IPC: C12N5/06 ,  C12N5/02 ,  C12N11/00 ,  A61F2/02 ,  G01N33/15

CPC classification number: C12N5/0672 ,  C12N11/00 ,  C12N11/02 ,  C12N11/04

Abstract: 从双能的ARS-PICM-19猪肝干细胞系衍生了2种细胞系PICM-19H和PICM-19B，并评估了它们在人工肝装置中的潜在应用。本研究包括培养物的生长速率和细胞密度的评估、形态学特征和肝细胞解毒功能，所述肝细胞解毒功能即可诱导的CYP450活性、氨清除和尿素生成。PICM-19H细胞含有众多的线粒体、高尔基体、光滑和糙面内质网、泡囊体和偶见的脂质液泡。PICM-19H细胞在无谷氨酰胺的培养基中表现出可诱导的CYP450活性、清除氨并生成尿素。PICM-19B单层的超微结构分析表明，大致上立方的细胞表现出基底-顶极化，并通过紧密连接部样的复合物连接起来。其它超微结构特征类似于PICM-19H细胞的那些，只是它们具有众多类似于粘液液泡的细胞体。PICM-19B细胞具有相对高水平的GGT活性，但是保留一些可诱导的CYP450活性和一些氨清除和尿素合成能力。这些数据表明，两种细胞系在一起或单独地可以用作人工肝装置的细胞基质。需要肝的体外模型来替换动物模型，用于快速评估药物生物转化和毒性。单能的猪干细胞系PICM-19H会排它地分化成肝细胞，且可以被诱导表达CYP450酶。这些细胞具有在其它肝细胞系中缺少的与外来物I期和II期代谢有关的许多活性。还将PICM-19H细胞系与肿瘤衍生的人HepG2 C3A细胞系和成年猪肝细胞的原代培养物进行了对比。结果证实了PICM-19H细胞在药物生物转化和毒性试验中的应用潜力，并进一步支持了它们在人工肝装置技术中的应用。