一种青蒿原生质体高效分离及瞬时转化的方法

    公开(公告)号:CN109112093B

    公开(公告)日:2021-11-09

    申请号:CN201811031518.6

    申请日:2018-09-05

    Abstract: 本发明公开了一种青蒿原生质体高效分离及瞬时转化的方法,包括:1)选取幼嫩青蒿叶片去除下表皮,得到除下表皮的青蒿叶片;2)将所述除下表皮的青蒿叶片置入酶解液中进行酶解,得到酶解混合液;3)将所述酶解混合液过滤离心得到原生质体沉淀,重悬后获得原生质体;4)将所述原生质体进行瞬时转化。本发明首次在青蒿中建立了原生质体分离及转化的方法,得到原生质体的产量为2.749×105个/g FW,活力为96%,绿色荧光蛋白的转化效率为80%,获得的原生质体产量大,活力高。并且利用青蒿原生质体为受体进行转化,绿色荧光蛋白GFP、荧光素酶LUC及海参荧光素酶REN能够成功表达。

    一种青蒿bHLH类转录因子编码序列及克隆方法与应用

    公开(公告)号:CN106220719B

    公开(公告)日:2020-03-06

    申请号:CN201610680590.6

    申请日:2016-08-17

    Abstract: 本发明公开了一种青蒿AaMYC3基因编码序列的克隆及其应用。具体包括基因AaMYC3的克隆、含有该基因的植物表达载体的构建、该基因对青蒿素生物合成途径特有基因启动子的激活作用。上述青蒿AaMYC3基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了AaMYC3基因具有能够激活青蒿素生物合成途径特异的ADS,CYP71AV1,DBR2和ALDH1这4个基因启动子表达的特性。本发明中AaMYC3基因可通过RNAi干扰,antisense抑制等方法应用于青蒿品质改良,可提高青蒿中青蒿素的含量。

    一种青蒿原生质体高效分离及瞬时转化的方法

    公开(公告)号:CN109112093A

    公开(公告)日:2019-01-01

    申请号:CN201811031518.6

    申请日:2018-09-05

    Abstract: 本发明公开了一种青蒿原生质体高效分离及瞬时转化的方法,包括:1)选取幼嫩青蒿叶片去除下表皮,得到除下表皮的青蒿叶片;2)将所述除下表皮的青蒿叶片置入酶解液中进行酶解,得到酶解混合液;3)将所述酶解混合液过滤离心得到原生质体沉淀,重悬后获得原生质体;4)将所述原生质体进行瞬时转化。本发明首次在青蒿中建立了原生质体分离及转化的方法,得到原生质体的产量为2.749×105个/g FW,活力为96%,绿色荧光蛋白的转化效率为80%,获得的原生质体产量大,活力高。并且利用青蒿原生质体为受体进行转化,绿色荧光蛋白GFP、荧光素酶LUC及海参荧光素酶REN能够成功表达。

    双基因融合增强植物抗蚜性的方法

    公开(公告)号:CN107937424A

    公开(公告)日:2018-04-20

    申请号:CN201711082638.4

    申请日:2017-11-07

    CPC classification number: C12N9/00 C12N9/14 C12N15/8286

    Abstract: 一种双基因融合增强植物抗蚜性的方法,通过从桃蚜(Myzus×persicae)的V-ATPase subunit E基因和COO2基因片段中构建得到上述具有抗蚜虫功能的基因,通过构建表达载体并将该载体转入农杆菌,以该农杆菌侵染小麦幼胚,在小麦中表达产生V-ATPase subunit E和COO2双基因的dsRNA,从而达到趋避蚜虫的目的。此外,实验证明通过转化双基因融合载体的转基因小麦抗虫效果高于分别转化单基因的转基因小麦。本发明利用基因工程手段获得的抗虫转基因植物具有只对目标害虫有效,而对非危害生物没有影响的优点,植物表达产生的抗虫物质存在于植物体内,不会对环境造成污染,且成本低,利于推广。

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