-
公开(公告)号：CN111269900B
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN202010185968.1
申请日：2020-03-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种L‑氨基酸脱氨酶突变体的制备及其应用，属于基因工程技术领域。本发明的改造方法通过pmirLAAD的蛋白质改造，通过分析pmirLAAD产物结合位点周围柔性Loop环结构，并设计最佳突变体，克服了之前野生型的酶由于产物抑制而导致催化效率的降低，并通过实验验证。最终得到最佳突变体pmirLAADM4，催化效率(1.61mM‑1·min‑1)和产物抑制常数(5.4mM)较对照分别提高了5.2倍和5.7倍。α‑酮异戊酸的产量可达到96.5g/L，转化率>97％用本发明的方法可以大大降低成本，加快了酶转化法生产α‑酮异戊酸的工业化进程。
-
公开(公告)号：CN110643585B
公开(公告)日：2021-09-03
申请号：CN201911088054.7
申请日：2019-11-08
Applicant: 江南大学 , 无锡宸明生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种利用氨基酸脱氨酶生产α‑酮‑β‑甲基正戊酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明是在氨基酸脱氨酶突变体Pm‑LAAD*的基础上，利用构象动力学的方法进行蛋白质工程改造，获得新的突变体Pm‑LAAD*(V411A/T414A)，其稳定性显著提高，50℃下半衰期从8h增加至10h，4℃冷藏保存的半衰期从150h上升至240h。该酶经过改造后，转化体系中不添加任何缓冲剂，转化通气量仅为0.2vvm，转化体系中添加湿细胞添加量15g/L，转化12h，L‑异亮氨酸摩尔转化率达到95％以上，产量达到98.0g/L，下游纯化简易，极大地降低了生产成本，能够满足工业化需求。
-
公开(公告)号：CN110734936B
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN201911128392.9
申请日：2019-11-18
Applicant: 江南大学 , 无锡宸明生物技术有限公司
IPC: C12P7/42
Abstract: 本发明公开了一种多酶级联生产(R/S)‑羟基蛋氨酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明利用一锅法同步反应催化蛋氨酸生产(R)‑HMTBA，通过分批补料解除底物抑制，转化周期由23h缩短至15h，(R)‑HMTBA产量可达到97.0g/L，ee>99％，蛋氨酸摩尔转化率达到96.3％；利用一锅法同步反应催化蛋氨酸生产(S)‑HMTBA，通过分批补料解除底物抑制，转化周期由23h缩短至18h，(S)‑HMTBA产量可达到98.0g/L，ee>99％，蛋氨酸摩尔转化率达到98.6％。
-
公开(公告)号：CN112280725A
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN202011185169.0
申请日：2020-10-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效生产琥珀酸的重组大肠杆菌及其构建方法，属于生物工程技术领域。本发明敲除E.coli FMME‑N‑2产琥珀酸菌株的副产物编码基因得到菌株E.coli FMME‑N‑5(ΔfocA‑pflB‑ΔldhA‑Δpta‑ackA)；过表达来自产琥珀酸放线杆菌磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶pck和施式芽孢杆菌亚磷酸酯脱氢酶ptxD；将构建好的质粒pTrcHisA‑pck‑ptxD导入表达宿主E.coli FMME‑N‑5(ΔfocA‑pflB‑ΔldhA‑Δpta‑ackA)中，通过氨苄抗性平板筛选获得高效生产琥珀酸的工程菌E.coli FMME‑N‑5(ΔfocA‑pflB‑ΔldhA‑Δpta‑ackA)‑pck‑ptxD；此工程菌株在7.5L发酵罐上采用两阶段发酵策略，发酵96h，琥珀酸产量达到了137g/L,琥珀酸得率达到1g/g葡萄糖、生产强度为1.43g/L/h，副产物乳酸、甲酸不积累，乙酸1‑2g/L，具有一定的工业化生产潜力。
-
公开(公告)号：CN112280688A
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN202011100851.5
申请日：2020-10-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株产苹果酸的米曲霉菌株的筛选及其应用，属于微生物技术领域。使用ARTP、60Coγ、NTG迭代复合诱变的方式，筛选得到了一株苹果酸高产菌株，命名为FMME‑S‑38。在摇瓶优化条件下，苹果酸产量可达到140g/L及以上，在30L发酵罐苹果酸产量可达到191.5g/L，且具备良好的遗传稳定性，适用于工业化生产。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110272858B
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN201910648950.8
申请日：2019-07-18
Applicant: 江南大学 , 无锡宸明生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种高产L‑乳酸的凝结芽孢杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明提供的一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)FMME‑BC，利用其发酵生产L‑乳酸产量达151.3g/L，光学纯度达97.1％，同时其可以接受外源DNA电转化，进行基因工程改造，敲除凝结芽孢杆菌FMME‑BC中D‑乳酸脱氢酶基因，得到的突变株FMME‑BCM，其发酵生产L‑乳酸产量达到185.1g/L，旋光度达到100％。
-
公开(公告)号：CN111004787A
公开(公告)日：2020-04-14
申请号：CN202010009417.X
申请日：2020-01-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种链霉菌磷脂酶D突变体、改造方法及其应用，属于生物工程技术领域。本发明的改造方法通过PLD的蛋白质改造，设计最佳突变体，克服了之前野生型的酶由于不能催化大体积底物而导致催化活性的降低，并通过实验验证。最终得到最佳突变体Q357F/Y405A，其kcat/Km(1.25mM-1s-1)较野生型提高了58％，磷脂酰丝氨酸的转化率为50.8％，产量达到38.6g/L，用本发明的方法可以大大降低成本，加快了酶转化法生产磷酯酰丝氨酸的工业化进程。
-
公开(公告)号：CN110982771A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201911367276.2
申请日：2019-12-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种合成对羟基扁桃酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段构建了一株双质粒重组菌，共表达丙酮酸脱羧酶、苯乙醛脱氢酶和NADH氧化酶基因，将构建好的表达质粒导入E.coli BL21(DE3)。将对羟基苯甲醛和乙醛酸转化为对羟基苯甲醛，并通过NADH氧化酶辅酶再生系统，通过将NADH转化为NAD+，使得NAD+循环再生，转化能够高效进行。并通过优化底物浓度及比例，优化转化温度和pH，实现了对羟基扁桃酸的高效生产。在30℃、pH7的条件下反应24h，可将30mM的底物对羟基苯甲醛转化为28.5mM的对羟基扁桃酸，转化率可达到95％。
-
公开(公告)号：CN110272858A
公开(公告)日：2019-09-24
申请号：CN201910648950.8
申请日：2019-07-18
Applicant: 江南大学 , 无锡宸明生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种高产L-乳酸的凝结芽孢杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明提供的一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)FMME-BC，利用其发酵生产L-乳酸产量达151.3g/L，光学纯度达97.1％，同时其可以接受外源DNA电转化，进行基因工程改造，敲除凝结芽孢杆菌FMME-BC中D-乳酸脱氢酶基因，得到的突变株FMME-BCM，其发酵生产L-乳酸产量达到185.1g/L，旋光度达到100％。
-
公开(公告)号：CN109777788A
公开(公告)日：2019-05-21
申请号：CN201910207909.7
申请日：2019-03-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种亮氨酸脱氢酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明在SEQ ID NO.1所示的亮氨酸脱氢酶氨基酸序列的基础上，将第47位的氨基酸残基M突变为V，且将第109位的氨基酸残基N突变为I，得到了一种亮氨酸脱氢酶突变体(突变点为M47V，N109I)，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，表达该突变体的重组菌E.coli BL21-pET28a-BtLDH007单位菌体的亮氨酸脱氢酶酶活达到170.9U/g；以2-酮丁酸为底物生产L-2-氨基丁酸的产量最高达到77.6g/L，转化率为96.0％。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
121
records
(took 0.039 seconds)
