用于制备鼠胆管类器官的组合物及鼠胆管类器官的制备方法和用途

    公开(公告)号:CN116555166B

    公开(公告)日:2024-02-20

    申请号:CN202310833629.3

    申请日:2023-07-10

    Abstract: 本发明涉及医药领域,特别是涉及用于制备鼠胆管类器官的组合物及鼠胆管类器官的制备方法和用途,所述组合物包括组织消化试剂,所述组织消化试剂中包括胶原酶IV和中性蛋白酶。所述组合物还包括培养基,以培养基的总体积为基准,所述培养基包括以下成分:基础培养基、L‑谷氨酰胺或其替代品、HEPES、B27、乙酰半胱氨酸、RSPO、烟酰胺、胃泌素I肽、上皮生长因子、成纤维细胞生长因子10、肝细胞生长因子。本发明的组合物和制备方法可以提高胆管细胞消化后的细胞活力,而且不需要离心和红细胞裂解液裂解红细胞,因此方法较简单,可以实现胆管类器官的高密度培养,为成体肝脏中的胆道修复提供参考。

    一种制备限制性内切酶类产品的方法

    公开(公告)号:CN113652412A

    公开(公告)日:2021-11-16

    申请号:CN202111067406.8

    申请日:2021-09-13

    Abstract: 本发明公开了一种制备限制性内切酶类产品的方法,涉及生物技术领域。本发明公开的制备限制性内切酶的方法采用表达载体改造实现真核表达细胞作为宿主细胞表达生产限制性内切酶。本发明提供的制备方法通过采用真核表达细胞共转甲基转移酶保护表达生产限制性内切酶,省略了原核表达系统生产限制性内切酶过程中甲基化保护菌株的筛选制备过程,本发明真核细胞培养产物经过简单的纯化工艺即可获得高产的限制性内切酶。本发明为限制性内切酶在mRNA等大量需求的技术领域应用提供了便利,克服了传统制备方法中表达菌株筛选过程复杂等问题。

    一种检测mRNA 2′-O-甲基转移酶活性的方法

    公开(公告)号:CN114480570B

    公开(公告)日:2024-05-14

    申请号:CN202210174149.6

    申请日:2022-02-25

    Abstract: 本发明提供了一种检测mRNA 2'‑O‑甲基转移酶活性的方法。具体地,包括以下步骤:(S1)提供5’末端为5’‑三磷酸的单链RNA分子;(S2)对(S1)中的RNA分子进行以下测试反应,所述测试反应包括在阴性测试体系、第一测试体系、第二测试体系中进行反应,其中:阴性测试体系中,不包含酶;第一测试体系中,包含Cap0加帽酶;第二测试体系中,包含Cap0加帽酶和mRNA 2'‑O‑甲基转移酶;(S3)检测(S2)中,阴性测试体系、第一测试体系和第二测试体系中的SAH的形成情况,与标准曲线对比,得到SAH的定量结果。本发明的方法安全高、无放射性污染、步骤简单、实验环境要求低、成本低。

    一种Poly(A)聚合酶活性测定方法

    公开(公告)号:CN117778523A

    公开(公告)日:2024-03-29

    申请号:CN202410207038.X

    申请日:2024-02-26

    Abstract: 本申请涉及分子生物学领域,具体地说,是关于一种Poly(A)聚合酶活性测定方法。本申请提供一种Poly(A)聚合酶活性的测定方法,为:步骤1:将待测Poly(A)聚合酶和RNA模板进行加尾反应,得到产物;步骤2:将产物上样毛细管电泳仪,得到分子量的数据;步骤3:将分子量的数据带入基于Poly(A)聚合酶标准品建立的标准曲线中,得到待测Poly(A)聚合酶的酶活性。本申请首次开发了毛细管电泳仪可直接用于测定PolyA聚合酶酶活的应用,本申请测定酶活的方法安全性高,无放射性污染,无需严苛等级实验室。

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