一种T7 RNA聚合酶突变体及其应用
    1.
    发明公开

    公开(公告)号:CN119464247A

    公开(公告)日:2025-02-18

    申请号:CN202510045489.2

    申请日:2025-01-13

    Abstract: 本发明涉及一种T7 RNA聚合酶突变体及其应用。具体地,本发明公开了一种T7 RNA聚合酶突变体,所述聚合酶突变体具有在对应于野生型T7 RNA聚合酶的选自下组的位点发生至少一个氨基酸突变:第44位、第45位、第46位、第172位、第389位、第425位、第441位、第632位、第643位、第754位和第789位;所述突变位点的编号基于SEQ ID NO:1所示的序列,所述突变导致酶合成mRNA过程中产生的副产物dsRNA显著降低,同时降低RNA聚集体的产生。

    一种Poly(A)聚合酶活性测定方法

    公开(公告)号:CN117778523B

    公开(公告)日:2024-05-28

    申请号:CN202410207038.X

    申请日:2024-02-26

    Abstract: 本申请涉及分子生物学领域,具体地说,是关于一种Poly(A)聚合酶活性测定方法。本申请提供一种Poly(A)聚合酶活性的测定方法,为:步骤1:将待测Poly(A)聚合酶和RNA模板进行加尾反应,得到产物;步骤2:将产物上样毛细管电泳仪,得到分子量的数据;步骤3:将分子量的数据带入基于Poly(A)聚合酶标准品建立的标准曲线中,得到待测Poly(A)聚合酶的酶活性。本申请首次开发了毛细管电泳仪可直接用于测定PolyA聚合酶酶活的应用,本申请测定酶活的方法安全性高,无放射性污染,无需严苛等级实验室。

    RNA沉淀液在检测mRNA加帽效率中的用途

    公开(公告)号:CN116949137B

    公开(公告)日:2023-12-22

    申请号:CN202311212061.X

    申请日:2023-09-20

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别是涉及RNA沉淀液在检测mRNA加帽效率中的用途。本发明的RNA沉淀液包含LiCl和乙醇。本发明的RNA沉淀液用于检测mRNA加帽效率。本发明检测mRNA加帽效率时,不需要将酶切产物单独纯化出来;并且相较于常规检测方法,更快捷方便,可同时进行批量样品的处理,并且对于酶切探针要求低,不需要进行生物素修饰,不仅降低了合成成本,合成周期也显著缩短。样品在进行酶切处理后可直接补加沉淀液,沉淀洗脱后用无酶水复溶即可上机检测,操作简单、回收率高。

    一种新型嵌合DNA聚合酶及其制备方法

    公开(公告)号:CN109628424B

    公开(公告)日:2022-04-26

    申请号:CN201811651584.3

    申请日:2018-12-31

    Abstract: 本发明开发了一种新型的嵌合DNA聚合酶,在一些实施方式中,根据本发明设计的嵌合聚合酶具有基本上类似于第一DNA聚合酶的持续合成能力、延伸率和热稳定性以及基本上类似于第二DNA聚合酶的保真性。本发明的第一DNA聚合酶是KOD聚合酶SEQ ID No.1,第二DNA聚合酶是Pfu聚合酶SEQ ID No.2。本发明技术方案利用高保真DNA聚合酶中功能区切换,结合不同DNA聚合酶的期望的功能特性。本发明尤其提供了稳健、快速以及准确的DNA聚合酶,用于DNA扩增、合成、检测、测序以及其它重要的重组DNA技术。发明的创新的高保真DNA聚合酶是一种同时具有高保真性,高持续合成能力,高延伸率,热稳定性,对盐有耐受性的高保真DNA聚合酶。

    一种消除核酸污染的生物酶清除剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN115873670B

    公开(公告)日:2024-07-16

    申请号:CN202211511421.1

    申请日:2022-11-29

    Abstract: 本发明公开了一种消除核酸污染的生物酶清除剂及其制备方法,所述生物酶消除剂的组分包括全能核酸酶、缓冲液、辅助因子和稳定剂,在上述各组分的协同作用下,所述生物酶清除剂具有无强氧化性、无腐蚀性、无毒性的特点,不会伤害到人体或破坏物体表面;施用操作简单,无需分两步操作,一管式喷洒即可清除核酸污染;相比现有技术中的核酸酶清除剂,本发明所述生物酶清除剂,施用一段时间后会自动降解,不会造成残留或二次污染;本发明所述生物酶清除剂不仅可以在常温下高效发挥作用,还可以应用在低温环境,从而能够适用于各种环境温度下的核酸清除。

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