铜绿假单胞菌泳动能力相关基因PA5001及应用

    公开(公告)号:CN101368184A

    公开(公告)日:2009-02-18

    申请号:CN200810152282.1

    申请日:2008-10-10

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明公开了铜绿假单胞菌泳动能力相关基因PA5001。属于微生物生物技术领域。此基因大小为957bp,目前国际上对该基因的功能尚没有报道,本实验首次发现其参与菌体的泳动能力。铜绿假单胞菌的泳动(swimming motility)是鞭毛介导的一种运动方式。本实验发现该基因的失活导致铜绿假单胞菌泳动能力丧失。铜绿假单胞菌的鞭毛及其所介导的运动能力是该菌的重要的毒力因子及致病因素。对该基因的发现及研究有助于研究铜绿假单胞菌鞭毛的运动机制,揭示铜绿假单胞菌的致病机理,为预防和治疗该菌引起的感染提供理论依据。

    一种提高外源核酸转化效率的方法

    公开(公告)号:CN111518824A

    公开(公告)日:2020-08-11

    申请号:CN202010353482.4

    申请日:2020-04-29

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 一种提高外源核酸转化效率的方法,HGFI是一种灰树花真菌中产生的高表面活性蛋白,通过质粒DNA与HGFI的复配,提高利用外源核酸转化受体菌的效率。本方法大致可分为4步:1.毕赤酵母(Pichia pastoris)异源表达真菌疏水蛋白HGFI并纯化,获得纯度95%以上的HGFI蛋白,作为复配样品。2.将HGFI与质粒以固定比例10:1混合得到质粒浓度为10μg/mL的混合液。3.将混合液于30℃恒温培养箱中静置温浴1h。4.将处理后的质粒混合物以化学转化法转化入受体菌中。该转化方法使目前分子生物学中常用的工程菌大肠杆菌DH5α的转化率增加约60%,操作效率的提高可为科研工作者提供巨大便利。

    一种泡沫精馏纯化方法
    15.
    发明授权

    公开(公告)号:CN104117220B

    公开(公告)日:2016-01-20

    申请号:CN201410316148.6

    申请日:2014-07-04

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 不同于传统的用于提取浓缩表面活性物质的泡沫分离法,本发明提供了一种能够提取浓缩、精馏纯化表面活性物质的泡沫精馏纯化方法。本方法大致可分为7步:1估测料液中目的组分和目的杂质的含量,2确定在目的组分耐受范围内目的组分表面活性最高的pH与温度T,3确定最高收集高度β和与之所对应的表观气速Q,4确定最低收集高度α,5定在高度α至高度β之间目的组分随高度变化的富集比和回收率,6根据1-5步所获数据并且根据产物的纯度要求设计纯化策略,对料液进行试纯化,并且根据检测结果对纯化策略再次进行微调,7根据1-6步所确定的所有生产条件进行生产。经过本方法纯化后,我们可以获得目的组分的浓缩液,得到所需纯度的产物。

    完整叶绿体长时间离体培养方法

    公开(公告)号:CN102174464A

    公开(公告)日:2011-09-07

    申请号:CN201110038865.3

    申请日:2011-02-16

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 完整叶绿体长时间离体培养方法。本发明分别以黄瓜、烟草和菠菜无菌苗子叶为材料,以柠檬酸、NaCl、Tris和EDTA为主要成分的叶绿体提取试剂,通过对植物材料的研磨、纱布过滤、差速离心等操作分离较完整的叶绿体(图1);以MnCl2、MgSO4、NaCl、山梨醇等为主要成分的培养试剂,对离体叶绿体进行液体培养。在体外培养长达20天左右,叶绿体仍然保持绿色且显微形态正常(图2),膜结构完整(图3)。离体培养两周内叶绿体经历分裂增值达到相对稳定的数量(图4)。对叶绿体离体转化和外源基因检测证明离体长时间培养的叶绿体内DNA没有发生降解(图5)。本发明可为叶绿体功能、遗传转化和细胞工程等基础理论与应用研究提供便捷和新途径。

    铜绿假单胞菌鞭毛运动能力相关基因PA5017及应用

    公开(公告)号:CN101368185A

    公开(公告)日:2009-02-18

    申请号:CN200810152283.6

    申请日:2008-10-10

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明公开了铜绿假单胞菌鞭毛运动能力相关基因PA5017。属于微生物生物技术领域。此基因大小为2700bp,目前国际上对该基因的功能尚没有报道。铜绿假单菌的鞭毛介导菌体的泳动(swimming motility)及蜂群运动(swarming motility),本实验发现该基因的失活导致铜绿假单胞菌同时丧失泳动及蜂群运动能力。铜绿假单菌的鞭毛及其所介导的运动能力是该菌的重要的毒力因子及致病因素。对该基因的发现及研究有助于研究铜绿假单胞菌鞭毛的运动机制,揭示铜绿假单胞菌的致病机理,为预防和治疗该菌引起的感染提供理论依据。

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