一种用于催化制备非天然氨基酸的苯丙氨酸脱氢酶及其应用

    公开(公告)号:CN110592037A

    公开(公告)日:2019-12-20

    申请号:CN201910822218.8

    申请日:2019-08-30

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于催化制备非天然氨基酸的苯丙氨酸脱氢酶及其应用,其氨基酸序列如SEQ ID NO.01、02、03或04所示。本发明通过对获得自海洋菌株Bacillus nanhaiensis(CGMCC NO.8969)的苯丙氨酸脱氢酶进行C末端区域改造,获得的变体氨基酸脱氢酶可催化系列非天然氨基酸底物,提高其催化具有大疏水基团的非天然氨基酸的能力,扩展底物谱。

    一种海洋菌株催化不对称还原制备手性苯丙氨酸的方法

    公开(公告)号:CN105647835A

    公开(公告)日:2016-06-08

    申请号:CN201610146280.6

    申请日:2014-08-08

    Applicant: 厦门大学

    CPC classification number: C12R1/07 C12N1/20 C12P13/22

    Abstract: 一种海洋菌株催化不对称还原制备手性苯丙氨酸的方法,涉及手性苯丙氨酸。将菌种接入2216L培养基中培养,得发酵液,离心获得细胞,用缓冲液重悬、洗涤,配制成细胞液;所述菌种为南海芽孢杆菌(Bacillus nanhaiensis)DSF-15A2,保藏中心登记入册编号为CGMCC No.8969;在细胞液中,加入苯丙酮酸和氨基供体作为底物,再加入辅助底物用于辅酶循环再生,反应后得到含有产物L-苯丙氨酸的反应液,离心去除沉淀,上清液加入等量的甲醇,震荡混合均匀,离心去除沉淀,上清液稀释后进行测定,苯丙酮酸的浓度用高效液相色谱检测,产物L-苯丙氨酸的浓度和对映体过量值用高效液相色谱测定。

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