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公开(公告)号：CN108118006A
公开(公告)日：2018-06-05
申请号：CN201611071966.X
申请日：2016-11-29
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物工程领域，涉及一种重组耐温木聚糖酶马克斯克鲁维酵母工程菌株及其应用。本发明中将耐温木聚糖酶基因克隆到分泌表达载体上，并转化马克斯克鲁维酵母菌，构建获得重组耐温木聚糖酶马克斯克鲁维酵母工程菌株；利用该菌株进一步制备耐温木聚糖酶，发酵罐发酵72小时，木聚糖酶酶活达到15万U/ml；本发明提供的重组耐温木聚糖酶马克斯克鲁维酵母工程菌用于制备耐温木聚糖酶，具有产酶量高、发酵周期短、成本低和安全性高的特点，耐温木聚糖酶可应用于食品、饲料添加、化工、纺织等领域。
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公开(公告)号：CN108048473A
公开(公告)日：2018-05-18
申请号：CN201711086961.9
申请日：2017-11-07
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明提供了一种阿魏酸酯酶基因，其来源于中国牦牛瘤胃微生物，具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，编码如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。本发明还提供了含有该基因的马克斯克鲁维酵母重组表达载体及基因工程菌株，并提供了制备阿魏酸酯酶的方法和制得的阿魏酸酯酶的用途。将阿魏酸酯酶在马克斯克鲁维酵母表达系统中重组表达，经高密度发酵48小时后胞内和胞外的阿魏酸酯酶的活力分别为686.35U/mL和346.34U/mL。马克斯克鲁维酵母重组表达的阿魏酸酯酶可释放玉米麸皮中的阿魏酸。利用本发明获得的阿魏酸酯酶，可用于食品加工、饲料添加、生物医药、纤维素物质生物转化、生物能源等领域。
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公开(公告)号：CN105087403B
公开(公告)日：2018-04-03
申请号：CN201510540030.6
申请日：2015-08-28
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明提供了一种马克思克鲁维酵母菌，其保藏号为CGMCC No.10621，本发明还提供了所述马克思克鲁维酵母菌的应用。相比于ATCC8585、ATCC26548等现有克鲁维酵母，本发明马克思克鲁维酵母菌具有更高的分泌蛋白的能力和更高的生物量，可用于生产酶制剂，并且可以用来构建重组蛋白表达系统。
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公开(公告)号：CN105132452A
公开(公告)日：2015-12-09
申请号：CN201510562498.5
申请日：2015-09-07
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明提供了一种在马克斯克鲁维酵母营养缺陷型菌株中表达融合了组氨酸标签的外源基因的重组载体、及其制备方法和应用，所述重组载体按照顺序包括氨苄抗性基因、PKD1载体序列、菊粉酶启动子、多克隆位点、菊粉酶终止子、营养基因启动子、营养基因开放阅读框；还包括多聚组氨酸标签，所述多聚组氨酸标签位于多克隆位点的C端或N端。本发明构建的重组载体，可用于构建转化子，来实现外源基因的表达。
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公开(公告)号：CN105087403A
公开(公告)日：2015-11-25
申请号：CN201510540030.6
申请日：2015-08-28
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明提供了一种马克思克鲁维酵母菌，其保藏号为CGMCC No.10621，本发明还提供了所述马克思克鲁维酵母菌的应用。相比于ATCC8585、ATCC26548等现有克鲁维酵母，本发明马克思克鲁维酵母菌具有更高的分泌蛋白的能力和更高的生物量，可用于生产酶制剂，并且可以用来构建重组蛋白表达系统。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119799527A
公开(公告)日：2025-04-11
申请号：CN202411932931.5
申请日：2024-12-26
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C12N15/60 , C12N15/54 , C12N15/53 , C12N15/52 , C12N15/31 , C12P7/6432 , C12R1/645
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体为一种合成二十碳五烯酸的马克斯克鲁维酵母工程菌及其应用。本发明的工程菌，是在马克斯克鲁维酵母FIM1Δura3菌株中依次敲除丙酮酸脱羧酶PDC1基因、乙醇脱氢酶ADH1、ADH2基因；同时在这些基因座上分别插入柠檬酸裂合酶ACL基因、丙酮酸氧化酶PO基因、磷酸转乙酰酶PTA基因，以此强化乙酰辅酶A的合成；然后在马克斯克鲁维酵母基因组依次上插入多种基因，然后转入Δ8去饱和酶Δ8D基因的载体所获得。本发明还提供高效制备EPA的方法，即以所述马克斯克鲁维酵母工程菌株为发酵菌株，以葡萄糖、酵母提取物、蛋白胨等成分为培养基，经培养发酵产生EPA的产量达到8.71 mg/g细胞干重。
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公开(公告)号：CN108486105B
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN201810153542.0
申请日：2018-02-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明公开了一种马克斯克鲁维酵母启动子，其包含菊粉酶基因起始密码子上游1136bp的序列，去除了N端的poly‑A序列，并且包含潜在的Zn(II)2Cys6转录因子的结合位点。该启动子至少包括以下核苷酸序列：1)如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列；或2)如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个核苷酸，具有菊粉酶基因启动子活性的衍生核苷酸序列。本发明还公开了含有该启动子的重组表达载体、含有该启动子或重组表达载体的基因工程菌及其应用与制备方法。利用本发明构建的重组载体可以获得阿魏酸酯酶外源蛋白的表达，其表达的活性超过了目前已报道的其他长度的菊粉酶基因启动子。
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公开(公告)号：CN108395996B
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN201810094158.8
申请日：2018-01-31
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物医药技术领域，具体为一种猪瘟病毒亚单位疫苗及其制备方法和用途。本发明首先提供一株用于制备猪瘟病毒重组亚单位疫苗的马克斯克鲁维酵母重组菌株。该重组菌株是通过截取猪瘟病毒囊膜蛋白E2的抗原表位区域，经密码子优化获得猪瘟病毒mE2蛋白的编码序列，然后将其克隆到马克斯克鲁维酵母表达载体上并转化马克斯克鲁维酵母宿主菌株构建获得。本发明还提供制备猪瘟病毒亚单位疫苗的方法：利用mE2重组表达的马克斯克鲁维酵母重组菌株，经培养、离心、细胞破碎、分离纯化获得猪瘟病毒mE2蛋白抗原，纯化的抗原和佐剂复配制成猪瘟病毒重组亚单位疫苗。该猪瘟病毒mE2蛋白重组亚单位疫苗注射免疫可获得保护性IgG抗体，能够减少和预防猪瘟病毒感染所引起相关性疾病。
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公开(公告)号：CN108048473B
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN201711086961.9
申请日：2017-11-07
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明提供了一种阿魏酸酯酶基因，其来源于中国牦牛瘤胃微生物，具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，编码如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。本发明还提供了含有该基因的马克斯克鲁维酵母重组表达载体及基因工程菌株，并提供了制备阿魏酸酯酶的方法和制得的阿魏酸酯酶的用途。将阿魏酸酯酶在马克斯克鲁维酵母表达系统中重组表达，经高密度发酵48小时后胞内和胞外的阿魏酸酯酶的活力分别为686.35U/mL和346.34U/mL。马克斯克鲁维酵母重组表达的阿魏酸酯酶可释放玉米麸皮中的阿魏酸。利用本发明获得的阿魏酸酯酶，可用于食品加工、饲料添加、生物医药、纤维素物质生物转化、生物能源等领域。
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公开(公告)号：CN108395996A
公开(公告)日：2018-08-14
申请号：CN201810094158.8
申请日：2018-01-31
Applicant: 复旦大学
CPC classification number: C07K14/005 , A61K39/12 , A61K2039/552 , A61P31/14 , C12N15/815 , C12N2770/24322 , C12N2770/24334
Abstract: 本发明属生物医药技术领域，具体为一种猪瘟病毒亚单位疫苗及其制备方法和用途。本发明首先提供一株用于制备猪瘟病毒重组亚单位疫苗的马克斯克鲁维酵母重组菌株。该重组菌株是通过截取猪瘟病毒囊膜蛋白E2的抗原表位区域，经密码子优化获得猪瘟病毒mE2蛋白的编码序列，然后将其克隆到马克斯克鲁维酵母表达载体上并转化马克斯克鲁维酵母宿主菌株构建获得。本发明还提供制备猪瘟病毒亚单位疫苗的方法：利用mE2重组表达的马克斯克鲁维酵母重组菌株，经培养、离心、细胞破碎、分离纯化获得猪瘟病毒mE2蛋白抗原，纯化的抗原和佐剂复配制成猪瘟病毒重组亚单位疫苗。该猪瘟病毒mE2蛋白重组亚单位疫苗注射免疫可获得保护性IgG抗体，能够减少和预防猪瘟病毒感染所引起相关性疾病。
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