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公开(公告)号：CN117264791A
公开(公告)日：2023-12-22
申请号：CN202310264215.3
申请日：2023-03-19
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C12N9/88 , C07K14/08 , C07K14/01 , C12N9/18 , C07K14/47 , C07K14/805 , C12N9/34 , C12R1/645
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种高效重组表达外源蛋白的马克斯克鲁维酵母工程菌株及其应用。本发明提供的马克斯克鲁维酵母工程菌株，是以马克斯克鲁维酵母FIM1作为出发菌株，在FIM1的染色体上添加16个loxPsym位点，通过Cre重组酶处理，然后在46℃高温压力下进行筛选获得突变菌株，记为FDHY23；该突变菌株至少携带腺苷酸环化酶基因的突变。该突变菌株FDHY23可重组表达不同外源蛋白，表达水平提高了1.6～5.5倍，在高温下依然具有表达外源蛋白的能力。
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公开(公告)号：CN114058524A
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202111261154.2
申请日：2021-10-28
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/40 , C12N15/81 , C12N7/04 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/645
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体为一种法氏囊亚病毒颗粒疫苗及其制备方法。本发明针对鸡传染性法氏囊病毒变异株，采用马克斯克鲁维酵母重组表达法氏囊亚病毒样颗粒的工程菌株，制备得到有效的法氏囊亚病毒样颗粒疫苗。本发明首先提供重组表达病毒亚病毒样颗粒的马克斯克鲁维酵母工程菌株；该重组菌株是将重组表达法氏囊病毒衣壳蛋白载体转化马克斯克鲁维酵母KM‑YDQ1所获得；法氏囊病毒亚病毒样颗粒疫苗以马克斯克鲁维酵母重组工程菌株经培养发酵、分离纯化获得的法氏囊亚病毒样颗粒作为活性成分。雏鸡免疫法氏囊亚病毒颗粒疫苗，对法氏囊病毒变异株FJ‑18株及经典强毒株BC6/85的保护效力均达到100%。
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公开(公告)号：CN112251311A
公开(公告)日：2021-01-22
申请号：CN202010979266.0
申请日：2020-09-17
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于酿酒技术领域，具体为一种利用马克斯克鲁维酵母酿造水果西打的方法。本发明采用马克斯克鲁维酵母Fim‑1作为发酵菌种；具体步骤包括：取果汁，调节果汁糖度为13‑16°Bx；加入20‑100ppm的焦亚硫酸钾，搅拌溶解；接入马克斯克鲁维酵母Fim‑1菌种，进行果汁的液态发酵；发酵液过滤澄清，然后充二氧化碳，罐装；巴氏杀菌，得到果西打酒产品。所述水果包括苹果、梨、桃子、李子、木瓜、西瓜等。本发明方法发酵时间较短，绿色天然，无添加剂；产品色泽透亮，澄清度高，口感清爽，经发酵后果汁中果酸和柠檬酸被转化为更柔和的乳酸，氨基酸的含量更高，高级醇的含量更低；是一种营养丰富、果香味浓、入口绵软的水果西打。
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公开(公告)号：CN111592990A
公开(公告)日：2020-08-28
申请号：CN202010212115.2
申请日：2020-03-24
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明提供了一株可用于制备阿魏酸酯酶AnfaeA的马克斯克鲁维酵母重组菌株，其通过将序列优化后的黑曲霉阿魏酸酯酶AnfaeA基因克隆到表达载体上并转化马克斯克鲁维酵母宿主菌株构建所得，该重组菌株经高密度发酵阿魏酸酯酶的产量达12,0000U/ml。本发明还提供了一种利用阿魏酸酯酶水解玉米芯粉制备阿魏酸的方法，利用前述重组菌株制得的阿魏酸酯酶AnfaeA和木聚糖酶的协同作用，可高效水解玉米芯粉获得阿魏酸。本发明提供的阿魏酸酯酶可应用农业副产物玉米芯、米糠和玉米皮等生物降解制备阿魏酸、p-香豆酸等酚类物质，因此在食品、造纸、饲料、医药等领域都具有广泛的应用价值，同时，制备方法工艺简单、产量高，十分适合于大规模生产。
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公开(公告)号：CN105112313B
公开(公告)日：2019-04-05
申请号：CN201510540029.3
申请日：2015-08-28
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明提供了一种基因改造的马克思克鲁维酵母营养缺陷型菌株以及用于菌株改造的无痕基因改造方法，所述马克思克鲁维酵母营养缺陷型菌株是马克思克鲁维酵母菌株CGMCC No.10621敲除全部或部分营养基因之后的菌株；所述无痕基因改造方法包括：敲除马克思克鲁维酵母菌CGMCC No.10621至少部分营养缺陷型基因，使其形成营养缺陷型菌株。CGMCC No.10621具有高的分泌蛋白的能力和高的生物量、以及发酵时间短等特征；本发明方法所构建的营养缺陷型马克思克鲁维酵母菌株，可以用于马克思克鲁维酵母表达系统的宿主菌，用于重组制备外源蛋白(酶)。另外，本发明提供的优选的第二基因敲除方法，标签基因序列能够回收利用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104946555A
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201510220300.5
申请日：2015-05-04
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于微生物技术领域，具体为一种完全降解赤霉烯酮的微杆菌及其应用。本发明发现一株微杆菌可以降解赤霉烯酮，命名为Microbacteriumsp. FY1538。该微杆菌属于微杆菌属（Microbacterium sp.），分离自青藏高原青海湖边的草皮（N36.34.243E100.32.285）。Microbacteriumsp. FY1538在LB培养基中培养，添加终浓度10ul/ml的甲醇，培养基pH7.4，培养温度30℃，摇瓶震荡培养48h，转速220rpm，发酵上清液具有完全降解赤霉烯酮的能力。本发明提供的微杆菌可应用于玉米等发霉农作物的脱毒。
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公开(公告)号：CN119799527A
公开(公告)日：2025-04-11
申请号：CN202411932931.5
申请日：2024-12-26
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C12N15/60 , C12N15/54 , C12N15/53 , C12N15/52 , C12N15/31 , C12P7/6432 , C12R1/645
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体为一种合成二十碳五烯酸的马克斯克鲁维酵母工程菌及其应用。本发明的工程菌，是在马克斯克鲁维酵母FIM1Δura3菌株中依次敲除丙酮酸脱羧酶PDC1基因、乙醇脱氢酶ADH1、ADH2基因；同时在这些基因座上分别插入柠檬酸裂合酶ACL基因、丙酮酸氧化酶PO基因、磷酸转乙酰酶PTA基因，以此强化乙酰辅酶A的合成；然后在马克斯克鲁维酵母基因组依次上插入多种基因，然后转入Δ8去饱和酶Δ8D基因的载体所获得。本发明还提供高效制备EPA的方法，即以所述马克斯克鲁维酵母工程菌株为发酵菌株，以葡萄糖、酵母提取物、蛋白胨等成分为培养基，经培养发酵产生EPA的产量达到8.71 mg/g细胞干重。
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公开(公告)号：CN108486105B
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN201810153542.0
申请日：2018-02-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明公开了一种马克斯克鲁维酵母启动子，其包含菊粉酶基因起始密码子上游1136bp的序列，去除了N端的poly‑A序列，并且包含潜在的Zn(II)2Cys6转录因子的结合位点。该启动子至少包括以下核苷酸序列：1)如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列；或2)如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个核苷酸，具有菊粉酶基因启动子活性的衍生核苷酸序列。本发明还公开了含有该启动子的重组表达载体、含有该启动子或重组表达载体的基因工程菌及其应用与制备方法。利用本发明构建的重组载体可以获得阿魏酸酯酶外源蛋白的表达，其表达的活性超过了目前已报道的其他长度的菊粉酶基因启动子。
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公开(公告)号：CN108395996B
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN201810094158.8
申请日：2018-01-31
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物医药技术领域，具体为一种猪瘟病毒亚单位疫苗及其制备方法和用途。本发明首先提供一株用于制备猪瘟病毒重组亚单位疫苗的马克斯克鲁维酵母重组菌株。该重组菌株是通过截取猪瘟病毒囊膜蛋白E2的抗原表位区域，经密码子优化获得猪瘟病毒mE2蛋白的编码序列，然后将其克隆到马克斯克鲁维酵母表达载体上并转化马克斯克鲁维酵母宿主菌株构建获得。本发明还提供制备猪瘟病毒亚单位疫苗的方法：利用mE2重组表达的马克斯克鲁维酵母重组菌株，经培养、离心、细胞破碎、分离纯化获得猪瘟病毒mE2蛋白抗原，纯化的抗原和佐剂复配制成猪瘟病毒重组亚单位疫苗。该猪瘟病毒mE2蛋白重组亚单位疫苗注射免疫可获得保护性IgG抗体，能够减少和预防猪瘟病毒感染所引起相关性疾病。
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公开(公告)号：CN108048473B
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN201711086961.9
申请日：2017-11-07
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明提供了一种阿魏酸酯酶基因，其来源于中国牦牛瘤胃微生物，具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，编码如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。本发明还提供了含有该基因的马克斯克鲁维酵母重组表达载体及基因工程菌株，并提供了制备阿魏酸酯酶的方法和制得的阿魏酸酯酶的用途。将阿魏酸酯酶在马克斯克鲁维酵母表达系统中重组表达，经高密度发酵48小时后胞内和胞外的阿魏酸酯酶的活力分别为686.35U/mL和346.34U/mL。马克斯克鲁维酵母重组表达的阿魏酸酯酶可释放玉米麸皮中的阿魏酸。利用本发明获得的阿魏酸酯酶，可用于食品加工、饲料添加、生物医药、纤维素物质生物转化、生物能源等领域。
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