金属硫蛋白的制备方法
    12.
    发明授权

    公开(公告)号:CN1141395C

    公开(公告)日:2004-03-10

    申请号:CN01131966.6

    申请日:2001-10-18

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明是一种用蛋白质工程技术高效制备金属硫蛋白的方法。现有技术一直难以得到比较高的产率,虽然融合蛋白表达技术为金属硫蛋白的表达提供了新方法,但是仍存在产率低这个不足之处。本发明用基因工程方法构建金属硫蛋白或其突变体基因的表达质粒,转入大肠杆菌工程菌中培养发酵,诱导后加入金属离子,继续培养,收集菌体。菌体超声破菌、离心后用谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B亲和层析柱静态吸附,柱上凝血酶酶切,再经柱层析脱盐,盐梯度洗脱,收集目标蛋白。本发明方法可得纯度达95%以上的目标蛋白。用本发明方法制备的猴金属硫蛋白I的六个突变体蛋白,产量与纯度均与野生型重组蛋白类似。

    人绒毛膜促性腺激素基因工程合成嵌合肽及其制备方法

    公开(公告)号:CN1446825A

    公开(公告)日:2003-10-08

    申请号:CN03115894.3

    申请日:2003-03-19

    Abstract: 本发明涉及一种人绒毛膜促性腺激素(hCG)嵌合肽CP7及其衍生物和CP11以及通过基因工程的制备方法。设计的两种hCG嵌合肽分别具有氨基(N)端6个或5个连续的广谱性或单倍型强T-细胞表位,以及羧基端(CTP)hCGβ靶抗原的3个线性B-细胞表位β545-52,β9113-116和β8137-144。编码CP7和CP11二种hCG嵌合肽的基因都能在大肠杆菌中表达,而且表达产物可通过制备性SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)获得。这二个生物合成的CP7和CP11嵌合肽可以用于制备新型的肿瘤治疗性和/或避孕hCG肽疫苗原,此生物合成肽中的又一类6个连续T-细胞表位肽段也可作为半分子用于构建其他靶抗原的基因工程嵌合肽免疫原。

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