公开(公告)号：CN114634920A

公开(公告)日：2022-06-17

申请号：CN202210300484.6

申请日：2022-03-24

Applicant: 江南大学

Inventor： 康振 ,  堵国成 ,  王淼 ,  庞博 ,  王阳

IPC: C12N9/26 ,  C12N15/56 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  A61K38/47 ,  A61P27/02 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种产人源透明质酸酶PH20的重组毕赤酵母及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明通过对hPH20的C端结构域优化，结合N端蛋白标签融合策略，构建了一个hPH20突变体AP2‑△491C；利用整合型质粒pPIC9K和强启动子PAOX1实现了hPH20突变体在P.pastoris GS115中的诱导表达，经3‑L发酵罐培养，发酵液中酶活达到258.1U/L，是目前微生物表达系统发酵制备hPH20的最高水平。该突变体能够水解机体组织中的大分子HA，增加组织细胞膜渗透性，在促进药物扩散吸收、增强药效、降低眼压等临床医学方面具有应用价值。

公开(公告)号：CN116064617A

公开(公告)日：2023-05-05

申请号：CN202211459643.3

申请日：2022-11-16

Applicant: 美药星(南京)制药有限公司 ,  江南大学

Inventor： 康振 ,  庞博 ,  邱银华 ,  王新敬 ,  王阳 ,  堵国成

IPC: C12N15/56 ,  C12N9/36 ,  C07K19/00 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12N1/06 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种提高欧洲牡蛎溶菌酶产量的方法，属于生物工程领域。本发明从脊椎动物、软体动物、禽类和昆虫共12种不同来源溶菌酶基因序列中筛选获得了酶活相对较高的欧洲牡蛎来源溶菌酶，并实现酶在毕赤酵母中的活性表达。本发明还通过在OElyz的N端融合不同氨基酸短肽和蛋白标签。当融合Sumo标签时，摇瓶水平上重组OElyz的胞外酶活达到382.6U/mL，此产量水平可以满足溶菌酶在医药、生工、食品领域的应用需求。