公开(公告)号：CN102382800A

公开(公告)日：2012-03-21

申请号：CN201110404508.4

申请日：2011-12-08

Applicant: 吉林大学

Inventor： 欧阳红生 ,  逄大欣 ,  朱建国 ,  周杨 ,  高飞 ,  唐成程 ,  全龙泉 ,  张明军

IPC: C12N5/077

Abstract: 本发明提供一种细胞信号通路抑制剂诱导猪脂肪细胞形成的方法，将猪胚胎成纤维细胞以4~6×104个/cm2的比例均匀的接种到Corning细胞培养板中，使用诱导培养基培养；37℃，5％CO2培养箱中培养20天时，对细胞进行观察并油红O染色证明其为脂肪细胞。利用细胞信号通路抑制剂而非转基因来诱导细胞转化，可有效的防止细胞基因组因插入外源基因而导致的基因突变。同时该方法对于研究脂肪细胞的形成机制有一定的促进作用，其简便性和安全性可被广泛的应用，可用于脂肪形成机制的研究，也能在疾病治疗等临床应用上发挥作用。

公开(公告)号：CN101550427B

公开(公告)日：2011-09-14

申请号：CN200910066596.4

申请日：2009-02-28

Applicant: 吉林大学

Inventor： 欧阳红生 ,  逄大欣 ,  李莉 ,  王铁东 ,  陈立梅 ,  赖良学 ,  任林柱 ,  张明军 ,  李占军

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/06 ,  A01K67/027 ,  C12Q1/25

Abstract: 本发明提供一种检测Cre位点特异重组酶活性的转基因报告猪及培养方法，采用基因工程的方法构建LoxP位点锚定终止子，后接报告基因的打靶载体，当Cre重组酶存在的情况下，将Loxp卯定的终止子删除，使后接的报告基因得以表达，从而用于监测Cre重组酶的活性；通过细胞转染及细胞筛选技术筛选出可以特异性检测Cre活性的成纤维细胞；利用体核移植技术进行克隆猪。用于在体内监测Cre重组酶的活性，为建立人类疾病模型提供了监测工具，解决了目前转基因克隆猪的技术不成熟，克隆效率较低问题。

公开(公告)号：CN101984062A

公开(公告)日：2011-03-09

申请号：CN201010182404.9

申请日：2010-05-26

Applicant: 吉林大学

Inventor： 欧阳红生 ,  唐小春 ,  逄大欣 ,  周杨 ,  朱建国 ,  赖良学 ,  陈月 ,  段新平 ,  张明军

IPC: C12N15/66 ,  C12N15/12 ,  C12N15/63 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明涉及一种维持干细胞自我更新的6个猪源关键基因的体外转录质粒构建，其特征在于具体制备方法如下：首先设计基因体外转录空载体Vitro-TransPMD-18T，然后获得EGFP和维持干细胞自我更新的猪源的6个关键基因的cDNA，并按相应的酶切位点进行酶切连接，最后用体外转录试剂盒对7个体外转录质粒进行体外转录，得到相应的mRNA，然后将Vitro-Trans-EGFP转染进猪胚胎成纤维细胞：其6个基因体外转录出的mRNA转染进猪胚胎成纤维细胞后能够使其转变成猪的多能干细胞；6个基因体外转录出的mRNA能够高效翻译。