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公开(公告)号：CN105018510B
公开(公告)日：2019-03-15
申请号：CN201510389502.2
申请日：2015-07-06
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域，具体涉及一种提高免疫用口蹄疫蛋白可溶性的方法。该方法为，在采用基因工程进行口蹄疫蛋白表达时，通过基因工程手段，在口蹄疫蛋白的C端增加His6‑MBP标签可增加口蹄疫蛋白的可溶性；所述His6表示6个组氨酸标签，MBP表示麦芽糖酶结合蛋白。本发明还提供了利用该方法所制备的针对A型口蹄疫用免疫口蹄疫蛋白CDG276。本发明与现有的基因工程所制备的FMDV VPI蛋白相比，表达量有较为明显提高，同时由于加入了可溶性的标签麦芽糖结合蛋白（MBP），所表达的FMDVA1蛋白可溶度提升明显，因而具有较好的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN104946777B
公开(公告)日：2018-01-26
申请号：CN201510406020.3
申请日：2015-07-10
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12Q1/6883 , C12Q1/6851 , C12Q1/686
Abstract: 本发明公开了一种检测TLR2/4介导的NF‑κB信号通路中关键分子含量的特异性引物，序列如下：用于对TLR9进行定量PCR的特异性引物，序列如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2所示，该序列与猪TLR9 mRNA的一段互补。本发明有效的缩短实验时间、减少经费的使用等。通过优化的实验反应体系和反应条件，组成检测灵敏、方便的试剂盒，为TLR9介导的MyD88依赖型NF‑κB信号通路中关键分子提供可靠的检测技术。
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公开(公告)号：CN104962561A
公开(公告)日：2015-10-07
申请号：CN201510357003.5
申请日：2015-06-25
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , C12Q1/68
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体设计一种酶促cGAMP生成量检测所用RNA适配体及检测方法。该RNA适配体包括spinach2，VC2/g20a和tRNA三部分，碱基序列如SEQ ID NO.1 所示。相较于现有的cGAMP生成量检测方法，本发明的主要技术优点体现在：1、本发明中的RNA适配体通过体外转录获得，无需切胶纯化，较好的保证了RNA适配体的完整性；2、相较于HPLC法，检测成本低廉，操作简便，相较于TLC法，操作安全无风险，检测样品数量大，可实现大规模样品检测；3、本发明中的RNA适配体可进一步纯化或者与其他试剂完善配制成标准化检测试剂盒，便于检测使用。
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公开(公告)号：CN104946778A
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201510406331.X
申请日：2015-07-10
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q2545/101 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种检测TLR7/8介导的NF-κB信号通路中关键分子含量的特异性引物，序列如下：用于对TLR7进行定量PCR的特异性引物，序列如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2所示，该序列与猪TLR7mRNA的一段互补；本发明有效的缩短实验时间、减少经费的使用等。通过优化的实验反应体系和反应条件，组成检测灵敏、方便的试剂盒，为TLR7/8介导的MyD88依赖型NF-κB信号通路中关键分子提供可靠的检测技术。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104293822A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410525823.6
申请日：2014-10-09
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种DisA表达过程中所使用的重组质粒pEX-MBP及其制备。所述pEX-MBP重组质粒的碱基序列如序列表所示。该重组质粒是在pBbB3a-GFP的基础上改造而成的。将该重组质粒用于制备可溶性的DisA蛋白时，以丙酸钠作为诱导剂。本发明所提供的pEX-MBP重组质粒，特异性的用于DisA蛋白的表达纯化，与传统的pET28α（+）载体所构建的重组质粒表达体相比，所表达的DisA蛋白可溶度较高；其次所构建的表达系统以丙酸钠作为诱导剂，成本低廉，而且对细菌没有毒性，因而适于表达DisA蛋白，且表达后的蛋白可特异性的切除相关标签蛋白，获得的DisA蛋白纯度较高。
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公开(公告)号：CN104946778B
公开(公告)日：2018-01-26
申请号：CN201510406331.X
申请日：2015-07-10
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种检测TLR7/8介导的NF‑κB信号通路中关键分子含量的特异性引物，序列如下：用于对TLR7进行定量PCR的特异性引物，序列如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2所示，该序列与猪TLR7mRNA的一段互补；本发明有效的缩短实验时间、减少经费的使用等。通过优化的实验反应体系和反应条件，组成检测灵敏、方便的试剂盒，为TLR7/8介导的MyD88依赖型NF‑κB信号通路中关键分子提供可靠的检测技术。
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公开(公告)号：CN104099332B
公开(公告)日：2016-10-26
申请号：CN201410204418.4
申请日：2014-05-12
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种猪akirin2基因启动子及其应用，其核苷酸序列如SEQ：ID：1所示。本发明所述的猪akirin2基因启动子在外源基因真核表达、转基因猪中的应用。本发明确定了200bp的最小启动子片段的活性最强。本发明提供寡核苷酸引物序列、克隆载体、表达载体、转化的宿主、外源蛋白表达的方法。这些为进一步开展猪akirin2基因在猪的肌卫星细胞及其他相关细胞中调控的研究提供了基础，同时可用于哺乳动物细胞中进行外源蛋白的表达及转基因研究。
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公开(公告)号：CN105597094A
公开(公告)日：2016-05-25
申请号：CN201511026961.0
申请日：2015-12-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: A61K39/225 , A61K39/39 , A61P31/14
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/5252 , A61K2039/55505 , C12N2770/20034
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明涉及一种猪传染性胃肠炎病毒疫苗的制备。所述疫苗由灭活的猪传染性胃肠炎病毒液与纳米硅胶佐剂按照体积比为1:2-3配制。本发明在18只6周龄SPF级昆明乳鼠和猪体上对疫苗进行安全评价，其中粒径70nm、150nm的纳米硅TGEV灭活疫苗组诱导的IgG和IgA的抗体水平均高于其它各实验组，其中150nm组的抗体水平最高；在对CD4+/CD8+比值的检测结果表明，在首免后第1周，70nm组CD4+/CD8+比值明显高于其它各试验组；在第2周，70nm组和油乳剂组CD4+/CD8+比值较高，明显高于市售铝胶佐剂组。本发明猪传染性胃肠炎病毒纳米硅佐剂疫苗具有无遗传毒性，无免疫原性，不引起机体产生免疫反应，可靶向输送药物，有缓释作用的优越性。
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公开(公告)号：CN104531699A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201410525824.0
申请日：2014-10-09
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/67
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种增强外源基因表达的猪的UCOE调控元件片段。所述UCOE调控元件片段的碱基序列如序列表所示。该调控元件片段在外源蛋白表达的方面，通过构建重组质粒表达载体pCpG-Mini-GFP-UCOE，转染HEK293T细胞，可以增强GFP表达。本发明以人的1.5kbUCOE片段作为对照，利用酶切方法和RT-PCR方法将猪UCOE片段分割成不同长度的片段，构建不同表达载体，转染HEK293T细胞，通过实时荧光定量PCR和Western blot技术检测报告基因GFP的相对表达量筛选出最佳的能够增强外源基因表达的UCOE片段序列，即本发明所请求保护的基因序列。
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