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公开(公告)号：CN101209345B
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN200610128462.7
申请日：2006-12-26
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: Y02A50/473
Abstract: 一种动物基因工程干扰素复合制剂及其生产方法和临床应用。该动物基因工程干扰素复合制剂通过提取动物外周血或脾淋巴细胞，经培养和体外诱导剂诱导，Trizol提取细胞总RNA，设计特异性引物，通过RT-PCR技术克隆干扰素基因，通过T-A策略将其连接到pGEM-T载体；重新设计引物，两端加入不同的酶切序列和起始密码子ATG、终止密码子TAA，并去除前导肽序列，以重组T载体为模板进行PCR扩增，获取动物干扰素基因表达片段；将表达片段进行稀有密码子突变，经双酶切后，胶回收目的片段，连接到经同样双酶切的载体pFastBacTM Dual上；将动物interferon-α克隆到Polyhedrin promoter控制下的多克隆位点，将同一种属动物interferon-γ克隆到p10 promoter控制下的多克隆位点；将构建好的载体pFastBacTM Dual+interferonα+interferonγ转染到DH10BacTM E.coli进行重组；经蓝白斑筛选，PCR鉴定后，将构建好的recombinant bacmid提取纯化，通过脂质体法转染SF9昆虫细胞；表达产物鉴定、纯化；动物基因工程干扰素复合制剂抗病毒活性检测和临床应用效果评价。该动物基因工程干扰素在昆虫细胞共表达的生产方法和临床应用。
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公开(公告)号：CN101210210A
公开(公告)日：2008-07-02
申请号：CN200610160049.9
申请日：2006-12-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: C11B9/00
Abstract: 本发明的目的在于，提供一种超临界CO2萃取留兰香精油工艺，为留兰香的综合开发和高效无毒利用奠定了基础。一种留兰香精油的提取方法，包括下列步骤：1)将干燥留兰香茎叶粉碎后，2)投入萃取釜中，当萃取釜的温度达到40－50℃，3)打开CO2贮气罐，对萃取釜进行加压，4)当萃取釜压力达到18－22MPa时，保持温度和压力，萃取3－4h，5)打开收集阀收集留兰香精油。超临界CO2分离作为一种高新技术，具有操作温度低、溶解能力强、无毒、无污染、无溶剂残留及产品易分离等优点，特别适合于生物活性物质和热敏性物质的分离提取。此外利用超临界CO2萃取能力易调节的特性，通过改变CO2的萃取能力可望达到较高的分离提纯效果。
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公开(公告)号：CN101209280A
公开(公告)日：2008-07-02
申请号：CN200610160051.6
申请日：2006-12-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: A61K36/534 , A61K9/08 , A61P17/04 , A61K127/00 , A61K135/00
Abstract: 一种天然高效无毒消炎止痒液，是从留兰香中提取的复合物，包含植物留兰香新鲜茎叶植物提取原液的活性成分。所述的天然高效无毒消炎止痒液，其特征在于：加入去离子水，提取原液的活性成分与去离子水所占百分比的范围是：提取原液的活性成分40％≤～＜100％，去离子水0＜～≤60％。所述的天然高效无毒消炎止痒液的制备方法：用植物留兰香新鲜茎叶植物提取原液的活性成分和去离子水配制，提取原液的活性成分与去离子水所占百分比的范围是：提取原液的活性成分40％≤～＜100％，去离子水0＜～≤60％，二者混合后经细菌滤器过滤。本发明的消炎止痒液具有祛痒消炎的作用，特别是可有效阻止蚊虫叮咬后产生的骚痒和红肿发生。特别适用于婴幼儿。
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公开(公告)号：CN101209258A
公开(公告)日：2008-07-02
申请号：CN200610160048.4
申请日：2006-12-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: A61K31/715 , A61K36/481 , A61P37/04 , A61P31/12
CPC classification number: Y02A40/78
Abstract: 为了更好发挥中药多糖抑制体内、外病毒繁殖，保护细胞免于感染，提高感染动物的存活率的效果，本发明提供一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物。一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物，按重量份包含有效成分黄芪多糖1－9和板蓝根多糖1－9。按重量份由4－30的有效成分和70～96的载体组成。载体是无水葡萄糖、碳酸氢钠、氯化钠中的至少一种。载体是注射用水。所述的任何一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物的应用，应用于畜禽、宠物的病毒性传染病的防治及免疫力低下。本发明主要从中药黄芪、板蓝根中提取多糖成分，将两种多糖混合使用使得效果好于单独任何一种，既能作为免疫增强剂又能作为抗病毒药物的尚属首次。
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公开(公告)号：CN101880728B
公开(公告)日：2012-03-21
申请号：CN201010240001.5
申请日：2010-07-29
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种肠球菌属多重PCR检测引物，包括肠球菌属引物的序列、粪肠球菌种引物的序列和屎肠球菌种引物的序列。本发明建立了一种快速准确鉴定肠球菌的多重PCR方法，大大简化了查验程序，可以在很多基层实验室使用。能一次PCR鉴定到肠球菌属及粪肠球菌或屎肠球菌种，能最少检测出1ng的基因组DNA，敏感性高，特异性比较强，有利于肠球菌的鉴别与诊断，并且具有的较好敏感性、重复性和稳定性，为临床中肠球菌的检测提供了一种新的快速检测方法，也为肠球菌感染的分子流行病学调查，研究肠球菌分子发病机制，早期诊断，诊断试剂盒的研制与开发，药物或疫苗的免疫机制提供了试验依据和技术手段。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102373297A
公开(公告)日：2012-03-14
申请号：CN201110221715.6
申请日：2011-08-04
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种CSFV、PRRSV与PCV2多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法，CSFV引物的序列如下：上游引物P1：5′-AAACGGAGGGACTAGCCGT-3′；下游引物P2：5′-TGCCATGTACAGCAGAGA-3′；PRRSV引物的序列如下：上游引物P3：5′-AAACCAGTCCAGAGGCAAG-3′；下游引物P4：5′-CCACAGTGTAACTTATCCTC-3′；PCV2引物的序列如下：上游引物P5：5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′；下游引物P6：5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′；本发明分别设计扩增CSFV、PRRSV和PCV2的特异性引物，通过三重SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法能够同时检测CSFV、PRRSV和PCV2。CSFV、PRRSV和PCV2同时检出的极限拷贝数分别为177拷贝/μL，202拷贝/μL，181拷贝/μL。本发明的特异性试验结果良好，只出现三个特异性的峰值，重复性试验具有很好的稳定性并且本试验的最大优势在于能够同时检测CSFV、PRRSV和PCV2三种DNA病毒，有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒的鉴别。
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公开(公告)号：CN111337670A
公开(公告)日：2020-06-26
申请号：CN202010219003.X
申请日：2020-03-25
Applicant: 河南农业大学
IPC: G01N33/569 , C12N15/31 , C12N15/70 , C07K14/315
Abstract: 本发明属于微生物检测领域，特别是指一种菌毛亚单位蛋白EbpA1猪源粪肠球菌抗体间接ELISA检测方法。利用纯化复性后的EbpA1亚单位蛋白初步建立了间接ELISA方法，采用棋盘法确定了最佳的包被浓度为2µg/mL；封闭液可以排除其他物质的非特异性吸附，我们选用1%的BSA进行封闭，达到了较好的效果；此外，对血清、酶标二抗的稀释比例和作用时间和底物的显色时间进行了摸索，均选择最佳的条件使建立的ELISA方法达到最优水平。ELISA结果的判定：在方法建立时采用P/N﹥2.1可视为阳性；而最终的结果采用阴性样品OD450值的平均数加3倍的标准差等于阳性的临界值。
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公开(公告)号：CN105400910B
公开(公告)日：2018-09-21
申请号：CN201511025198.X
申请日：2015-12-31
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种病毒的检测方法，具体涉及一种猪德尔塔冠状病毒和猪传染性胃肠炎病毒多重RT‑PCR检测引物及检测方法。本发明利用引物检测猪德尔塔冠状病毒和猪传染性胃肠炎病毒多重RT‑PCR的方法，该方法不用于疾病的诊断和治疗，包括提取病毒的DNA后，按多重荧光定量RT‑PCR反应体系和反应条件对病毒进行检测，本发明的57份临床样品的多重RT‑PCR检测结果显示，同时感染这2种病毒的阳性率为1.75％，感染PDCoV阳性率为19.30％，感染TGEV阳性率为1.75％。结果表明，建立多重RT‑PCR方法能够对PDCoV和TGEV单个或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断。
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公开(公告)号：CN102580079B
公开(公告)日：2015-09-23
申请号：CN201210088026.7
申请日：2012-03-30
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪细小病毒纳米铝胶佐剂灭活疫苗，该疫苗由灭活的猪细小病毒病毒液与纳米铝佐剂以1:2的比例混合制成。本发明在乳鼠和猪体上对疫苗进行了安全性评价，结果发现，免疫之后无一只乳鼠死亡，无一头仔猪发生致敏反应，同样也未观察到明显的全身和局部反应，充分证明本发明灭活疫苗是安全、可靠的。本发明猪细小病毒纳米铝胶佐剂疫苗组在免疫第4周时CD4+/CD8+的比值显著高于其他疫苗组，其比值由2.11提高到2.97，说明该疫苗加强了小鼠的细胞免疫状态。本发明猪细小病毒纳米铝胶佐剂疫苗能诱导IFN-γ的分泌表达，该疫苗能显著增强Th1型细胞产生免疫应答反应，诱导其分泌IFN-γ，从而增强细胞免疫水平，能产生较强的细胞免疫应答。
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