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公开(公告)号：CN113552335B
公开(公告)日：2023-06-20
申请号：CN202010446599.7
申请日：2020-05-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/532 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N23/04 , G01N23/20
Abstract: 本发明公开了一种用于定位隐孢子虫胞内不同寄生时期特异表达蛋白的免疫电镜样品的制备方法。本发明将感染有隐孢子虫卵囊的HCT‑8细胞样品在戊二醛‑多聚甲醛混合固定液中固定，然后经低熔点琼脂糖预包埋，乙醇梯度脱水，LR‑White树脂渗透，包埋，聚合，将样品包埋块超薄切片后进行免疫金标记和重金属染色，即可制得电镜观察用的隐孢子虫样本。通过本发明方法，制备的样品的反应免疫原性良好，隐孢子虫形态良好，结构完整，隐孢子虫的纳虫空泡边缘光滑，可以看清胞内时期的隐孢子虫内部结构的样品，能够为研究胞内寄生时期的隐孢子虫的形态及虫体蛋白的定位，有利于研究隐孢子虫的入侵机制、代谢通路、致病机制，为开发疫苗提供可能。
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公开(公告)号：CN114164114B
公开(公告)日：2022-12-13
申请号：CN202111495124.8
申请日：2021-12-08
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N1/11 , C12N15/79 , A61K39/002 , A61P33/02 , C12R1/90
Abstract: 弓形虫核酮糖‑5‑磷酸异构酶TgRPI基因编辑虫株及其应用。本发明公开了一个有潜力的疫苗和药物设计靶点和一种预防弓形虫感染的基因敲除虫株。所述疫苗和药物设计靶点为弓形虫核酮糖‑5‑磷酸异构酶TgRPI基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。所述基因敲除虫株敲除了TgRPI基因，该基因敲除虫株在体外生长速度减缓，但是可以传代培养，在动物体内具有毒力小、繁殖少等特性，能提高动物对弓形虫的免疫能力。由于TgRPI对弓形虫体内外生长有重要作用，故有成为疫苗和药物靶点的潜力，且该基因敲除虫株有成为抗弓形虫基因工程疫苗的潜力。
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公开(公告)号：CN114889934A
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202210444015.1
申请日：2022-04-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种易拉型罐头盖，包括盖本体，所述盖本体包括第一部件和第二部件，所述第二部件固定连接到所述第一部件上，所述第二部件包括拉环部，所述第一部件上设置有凹入部，所述第二部件的拉环部与所述凹入部的位置相对应，并且所述拉环部相对于所述第一部件的上表面呈向上倾斜状，倾斜角度为20°‑30°。根据本发明的易拉型罐头盖易开启、防划伤，符合人机工程学要求。
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公开(公告)号：CN114540508A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210228164.4
申请日：2022-03-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6848 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于牛中常见艾美耳球虫检测和虫种鉴定的巢式PCR方法及试剂盒。本发明采用牛的艾美耳球虫SSU rRNA基因作为检测靶序列，所述序列中具有保守区域和可变区域，相应扩增片段中包含多个单核苷多态性位点；本发明进一步通过设计巢式PCR引物，建立了牛中常见艾美耳球虫巢式PCR检测方法，可检测出不同的牛中常见艾美耳球虫，进行艾美耳球虫的虫种鉴定。采用本发明的检测方法能够最低检测到一个卵囊，其扩增效率高，检测灵敏，可以准确区分牛感染的不同艾美耳球虫，并确定引起发病的不同虫种，用于牛球虫病的精准防控。
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公开(公告)号：CN114164114A
公开(公告)日：2022-03-11
申请号：CN202111495124.8
申请日：2021-12-08
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N1/11 , C12N15/79 , A61K39/002 , A61P33/02 , C12R1/90
Abstract: 弓形虫核酮糖‑5‑磷酸异构酶TgRPI基因编辑虫株及其应用。本发明公开了一个有潜力的疫苗和药物设计靶点和一种预防弓形虫感染的基因敲除虫株。所述疫苗和药物设计靶点为弓形虫核酮糖‑5‑磷酸异构酶TgRPI基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。所述基因敲除虫株敲除了TgRPI基因，该基因敲除虫株在体外生长速度减缓，但是可以传代培养，在动物体内具有毒力小、繁殖少等特性，能提高动物对弓形虫的免疫能力。由于TgRPI对弓形虫体内外生长有重要作用，故有成为疫苗和药物靶点的潜力，且该基因敲除虫株有成为抗弓形虫基因工程疫苗的潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119351466B
公开(公告)日：2025-04-04
申请号：CN202411503015.X
申请日：2024-10-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/30 , A61K39/002 , A61P33/02
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体公开了一种弓形虫基因敲除疫苗虫株的构建方法及其应用，通过基因编辑技术直接敲除弓形虫的TGGT1_202920基因得到ΔTGGT1_202920虫株，该虫株具有在体外能够正常培养、在体内几乎无毒的特性；对动物免疫接种ΔTGGT1_202920虫株后，可以产生良好的免疫保护力，能抵抗野生型弓形虫的感染，能用于制备抗弓形虫病疫苗，以预防弓形虫感染。
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公开(公告)号：CN118750592A
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202411247790.3
申请日：2024-09-06
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体公开了一种缺失TgAROM基因的弓形虫减毒疫苗，含有缺失了TgAROM基因的弓形虫疫苗虫株Δarom，所述TgAROM基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明发现直接敲除弓形虫TgAROM基因对弓形虫的胞内生长无明显影响；Δarom虫株可以在体外正常传代培养，但Δarom虫体在动物体内不繁殖，几乎没有毒力；免疫接种Δarom虫株可以产生良好的免疫保护力；综上表明Δarom虫株具有成为弓形虫疫苗的潜力。
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公开(公告)号：CN118546788A
公开(公告)日：2024-08-27
申请号：CN202410651467.6
申请日：2024-05-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株弓形虫琥珀酸脱氢酶α亚基基因缺失疫苗虫株及其应用，该虫株(Δsdhα)通过基因编辑技术直接敲除弓形虫的TgSDHα得到；敲除TgSDHα后，显著影响弓形虫的生长，减缓虫体体外的增殖速度，并能降低弓形虫体内繁殖数量；Δsdhα虫株具有体外可以传代培养，体内几乎无毒力的特性，感染Δsdhα虫株的小鼠全部存活；对动物免疫接种Δsdhα虫株后可以产生良好的免疫保护力，能抵抗野生型弓形虫的感染。Δsdhα虫株能用于制备抗弓形虫病的疫苗，为防治弓形虫病提供安全、有效的疫苗候选。同时，TgSDHα可以作为弓形虫药物设计靶点，为防治弓形虫病提供更多有效药物靶标与基因资源。
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公开(公告)号：CN118146955A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202410301081.2
申请日：2024-03-15
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种微小隐孢子虫23kDa黏蛋白CP23基因缺失虫株及其应用。本发明基于CRISPR/Cas9基因编辑技术对微小隐孢子虫IIdA20G1亚型分离株的CP23基因进行敲除，获得了CP23基因缺失虫株；研究显示CP23缺失后影响微小隐孢子虫的体外入侵和生长发育，其基因缺失虫株可以在体外培养，在体外生的长荷虫量明显降低；通过体内免疫后，在小鼠体内其荷虫量也显著降低，排卵高峰期推迟并且排卵维持时间缩短，不会导致C57BL/6J小鼠在感染后死亡；采用CP23基因缺失虫株免疫后能减轻微小隐孢子虫对宿主的感染强度，具有毒力减弱的优点，能用于预防微小隐孢子虫感染，制备隐孢子虫减毒疫苗。
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公开(公告)号：CN116840473A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310581514.X
申请日：2023-05-23
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/535 , C07K16/20 , C07K16/06
Abstract: 本发明公开了一种检测微小隐孢子虫的双抗体夹心ELISA检测方法及试剂盒，属于生物技术领域。本发明利用微小隐孢子虫全虫蛋白作为抗原，采用单克隆抗体制备技术，经过融合、克隆、筛选制备获得识别微小隐孢子虫胞内期所有阶段的单克隆抗体，作为检测抗体；利用微小隐孢子虫全虫蛋白作为抗原免疫新西兰兔，获得针对微小隐孢子虫的多克隆抗体，作为捕获抗体，并通过最佳稀释度的确定、封闭剂的选择、最佳孵育时间的确定等系列优化，建立了可用于临床样本中微小隐孢子虫的检测及鉴定的双抗体夹心ELISA检测方法及其试剂盒。该方法及试剂盒特异性较强，具有较好的灵敏度。
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