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公开(公告)号：CN117070381A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202310832671.3
申请日：2023-07-08
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物质资源利用技术领域，具体为一种利用豆粕固态发酵马克斯克鲁维酵母的方法及应用。本发明方法包括：豆粕原料料的蛋白酶水解处理，高温灭菌熟化以及α‑半乳糖苷酶和植酸酶处理，接入马克斯克鲁维酵母发酵菌种，恒温发酵，得到的马克斯克鲁维酵母活菌数高。经马克斯克鲁维酵母固态发酵后的豆粕抗原蛋白含量低，大豆球蛋白去除率≥99.9％、β‑伴大豆球蛋白去除率≥99.9％，胰蛋白酶抑制因子去除率均>95％，豆粕粗蛋白含量也提高了8.5％，适口性和营养水平显著提高，可作为一种高蛋白饲料添加剂或饲料原料，应用于畜牧和水产养殖业。本发明还提供豆粕固态发酵马克斯克鲁维酵母工程菌生产重组蛋白的方法，重组蛋白产量达16857U/g豆粕。
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公开(公告)号：CN116987604A
公开(公告)日：2023-11-03
申请号：CN202310482013.6
申请日：2023-04-28
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体为一种高效表达糖化酶的马克斯克鲁维酵母重组工程菌株及其应用。本发明提供的马克斯克鲁维酵母工程菌株，是通过将序列优化后的食腺嘌呤芽生葡萄孢酵母糖化酶基因克隆到表达载体上，并转化由酵母人工染色体介导的二硫键异构途径重构的马克斯克鲁维酵母宿主菌株构建所得。本发明还提供马克斯克鲁维酵母的人工染色体，用于介导毕赤酵母或马克斯克鲁维酵母二硫键异构途径在马克斯克鲁维酵母中重构。本发明提供的重组表达糖化酶的马克斯克鲁维酵母工程菌株，高密度发酵72小时糖化酶表达水平达到8345.7U/mL，蛋白产量16.8g/L。本发明提供的马克斯克鲁维酵母重组工程菌株，可应用于食品加工、酿造、生物医药等领域糖化酶的高效制备。
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公开(公告)号：CN108410870B
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN201810153537.X
申请日：2018-02-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明公开了一种优化的马克斯克鲁维酵母启动子，其至少包括：a)如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；或b)如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列；或c)如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列。还公开了一种优化的马克斯克鲁维酵母分泌信号肽，其至少包括如SEQ ID No.4所示的核苷酸序列，以及一种优化的组合体，其至少包括如SEQ ID No.6所示的核苷酸序列。本发明还公开了含有上述马克斯克鲁维酵母启动子和/或分泌信号肽的重组表达载体、基因工程菌及其制备方法与应用。本技术方案可显著提升马克斯克鲁维酵母高效重组表达外源蛋白的能力，为推动马克斯克鲁维酵母表达系统在工业蛋白制造领域的应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN106399350B
公开(公告)日：2020-02-21
申请号：CN201610806538.0
申请日：2016-09-07
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N15/81 , C12N1/19 , C12N7/04 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种猪圆环病毒II型衣壳蛋白重组表达的马克斯克鲁维酵母工程菌，将猪圆环病毒II型衣壳蛋白基因克隆到表达载体中，并在马克斯克鲁维酵母中重组表达获得猪圆环病毒II型病毒样颗粒。本发明还提供了一种猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗的制备方法，通过重组马克斯克鲁维酵母的高密度发酵，获得猪圆环病毒II型病毒样颗粒，经分离纯化制备疫苗。本发明提供的猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗，注射免疫一次即可获得高水平血清IgG抗体，具有免疫效果好、安全性高、培养操作简单，产量高、生产成本低以及可大规模放大生产等优点，可应用于减少、预防感染猪圆环病毒PCV2所引起相关性临床症状。
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公开(公告)号：CN108486105A
公开(公告)日：2018-09-04
申请号：CN201810153542.0
申请日：2018-02-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明公开了一种马克斯克鲁维酵母启动子，其包含菊粉酶基因起始密码子上游1136bp的序列，去除了N端的poly-A序列，并且包含潜在的Zn(II)2Cys6转录因子的结合位点。该启动子至少包括以下核苷酸序列：1)如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列；或2)如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个核苷酸，具有菊粉酶基因启动子活性的衍生核苷酸序列。本发明还公开了含有该启动子的重组表达载体、含有该启动子或重组表达载体的基因工程菌及其应用与制备方法。利用本发明构建的重组载体可以获得阿魏酸酯酶外源蛋白的表达，其表达的活性超过了目前已报道的其他长度的菊粉酶基因启动子。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108410870A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810153537.X
申请日：2018-02-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明公开了一种优化的马克斯克鲁维酵母启动子，其至少包括：a)如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；或b)如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列；或c)如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列。还公开了一种优化的马克斯克鲁维酵母分泌信号肽，其至少包括如SEQ ID No.4所示的核苷酸序列，以及一种优化的组合体，其至少包括如SEQ ID No.6所示的核苷酸序列。本发明还公开了含有上述马克斯克鲁维酵母启动子和/或分泌信号肽的重组表达载体、基因工程菌及其制备方法与应用。本技术方案可显著提升马克斯克鲁维酵母高效重组表达外源蛋白的能力，为推动马克斯克鲁维酵母表达系统在工业蛋白制造领域的应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN107661496A
公开(公告)日：2018-02-06
申请号：CN201711009865.4
申请日：2017-10-25
Applicant: 复旦大学
CPC classification number: A61K39/12 , A61K9/0019 , A61K2039/54 , A61K2039/552 , A61K2039/55566 , A61K2039/575 , C07K14/005 , C12N15/815 , C12N2750/14023 , C12N2750/14034
Abstract: 本发明公开了一种猪细小病毒疫苗组合物，其包含以下a)和b)、基本上由以下a)和b)组成、或者由以下a)和b)组成：a)、由马克斯克鲁维酵母重组工程菌表达的猪细小病毒VP2蛋白自组装形成的类病毒颗粒；b)、药学上或兽医学上可接受的用于注射制剂的辅料。本发明还公开了上述猪细小病毒疫苗组合物的制备方法和应用。本发明提供的猪细小病毒类病毒颗粒疫苗注射免疫可获得高水平血清IgG抗体，具有良好的免疫原性，能够减少和预防猪细小病毒感染所引起相关性疾病。
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公开(公告)号：CN104946555B
公开(公告)日：2017-12-01
申请号：CN201510220300.5
申请日：2015-05-04
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于微生物技术领域，具体为一种完全降解赤霉烯酮的微杆菌及其应用。本发明发现一株微杆菌可以降解赤霉烯酮，命名为Microbacteriumsp. FY1538。该微杆菌属于微杆菌属（Microbacterium sp.），分离自青藏高原青海湖边的草皮（N36.34.243 E100.32.285）。Microbacteriumsp. FY1538在LB培养基中培养，添加终浓度10ul/ml的甲醇，培养基pH 7.4，培养温度30 ℃，摇瓶震荡培养48 h，转速220rpm，发酵上清液具有完全降解赤霉烯酮的能力。本发明提供的微杆菌可应用于玉米等发霉农作物的脱毒。
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公开(公告)号：CN106399350A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201610806538.0
申请日：2016-09-07
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N15/81 , C12N1/19 , C12N7/04 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种猪圆环病毒II型衣壳蛋白重组表达的马克斯克鲁维酵母工程菌，将猪圆环病毒II型衣壳蛋白基因克隆到表达载体中，并在马克斯克鲁维酵母中重组表达获得猪圆环病毒II型病毒样颗粒。本发明还提供了一种猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗的制备方法，通过重组马克斯克鲁维酵母的高密度发酵，获得猪圆环病毒II型病毒样颗粒，经分离纯化制备疫苗。本发明提供的猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗，注射免疫一次即可获得高水平血清IgG抗体，具有免疫效果好、安全性高、培养操作简单，产量高、生产成本低以及可大规模放大生产等优点，可应用于减少、预防感染猪圆环病毒PCV2所引起相关性临床症状。
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公开(公告)号：CN106399138A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201610807435.6
申请日：2016-09-07
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明提供一种马克斯克鲁维酵母重组工程菌及其在生产口服猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗中的应用，该重组工程菌是通过马克斯克鲁维酵母表达载体表达猪圆环病毒II型衣壳蛋白，制备猪圆环病毒II型病毒样颗粒口服疫苗。本发明提供的马克斯克鲁维酵母重组表达载体的调控元件均来源于食品安全级的克鲁维酵母，具有无抗生素抗性基因和大肠杆菌序列特征。本发明还提供一种制备猪圆环病毒II型病毒样颗粒口服疫苗的方法，利用本发明提供的猪圆环病毒II型病毒样颗粒口服疫苗，能够减少和预防感染PCV2所引起相关性临床症状，具有免疫效果好、安全性高、培养操作简单，产量高、生产成本低以及可大规模放大生产等优点。
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