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公开(公告)号:CN105861459A
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201610324315.0
申请日:2016-05-17
Applicant: 昆明理工大学
Abstract: 本发明公开了AtPrx64基因在提高植物铝耐受性上的应用,将AtPrx64基因重组到植物表达载体中,并转化野生型烟草,通过筛选获得转AtPrx64基因烟草;实验结果表明在铝胁迫条件下,转基因烟草的根相对生长量、可溶性蛋白含量随着铝浓度的增加而逐渐降低,转基因烟草比野生型降低得少;转基因烟草的H2O2、MDA含量则随着铝浓度的增加而逐渐升高,升高的幅度比野生型烟草低;无论有没有铝胁迫,在转基因烟草中质膜H+?ATPase活性及柠檬酸分泌量均比野生型烟草高;对不同浓度铝胁迫下的根中铝含量的测定发现,转基因烟草根中的铝含量显著低于野生型烟草;转AtPrx64烟草能显著提高烟草对铝胁迫的耐受性。
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公开(公告)号:CN104774866A
公开(公告)日:2015-07-15
申请号:CN201510133694.0
申请日:2015-03-26
Applicant: 昆明理工大学
Abstract: 本发明公开了拟南芥丝氨酸羟甲基转移酶基因与甲酸脱氢酶基因的双表达应用,本发明以拟南芥丝氨酸羟甲基转移酶SHMT基因cDNA构建植物表达载体,通过农杆菌介导转入烟草,检测正确后将拟南芥甲酸脱氢酶FDH基因cDNA所构建的植物表达载体通过农杆菌介导转入其中,获得插入两个外源基因SHMT/FDH的双表达转基因烟草,可提高植物对甲醛的吸收和耐受能力;实验结果表明双表达转基因烟草通过改变烟草叶绿素和可溶性糖含量而有效降低HCHO对植物的毒害,使转基因烟草叶片能在较高浓度HCHO胁迫下保持较好的HCHO吸收能;双表达转基因烟草能有效的降低氧化胁迫的发生,且这种效果比单表达转基因烟草更显著。
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公开(公告)号:CN104745620A
公开(公告)日:2015-07-01
申请号:CN201510094110.3
申请日:2015-03-03
Applicant: 昆明理工大学
Abstract: 本发明公开了一种蚕豆VFPP1C基因的植物表达载体及其应用,本发明首先发现在甲醛胁迫下蚕豆叶片中VFPP1C基因的表达水平受到显著性地抑制,然后从蚕豆叶片中克隆得到VFPP1C基因的CDS序列,并通过Gateway技术构建了植物表达载体PK-35S-VFPP1C,经农杆菌介导的叶盘转化法转化野生型烟草,筛选得到能够正确表达VFPP1C基因的转基因烟草,最后对获得的转基因烟草进行了甲醛吸收能力的分析。实验结果表明在烟草中过量表达外源性VFPP1C基因能够显著提高转基因烟草的甲醛吸收能力。
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公开(公告)号:CN104195152A
公开(公告)日:2014-12-10
申请号:CN201410423663.4
申请日:2014-08-26
Applicant: 昆明理工大学
Abstract: 本发明公开一种钙调磷酸酶催化亚基基因,其是在土生隐球酵母BSLL1-1菌株中克隆的,其核苷酸序列如SEQIDNO:1所示,编码如SEQIDNO:2所示氨基酸序列的蛋白质;将该蛋白在大肠杆菌中表达,并进一步将该基因在酿酒酵母中成功表达,该基因使酿酒酵母耐铝能力增加,基因工程菌可以吸附(或者吸收)培养介质中的活性铝,该酿酒酵母基因工程菌具有降低酸性土壤中活性铝含量的应用潜力。
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公开(公告)号:CN102337280B
公开(公告)日:2013-08-28
申请号:CN201110306496.1
申请日:2011-10-11
Applicant: 昆明理工大学
Abstract: 本发明公开了短芽孢杆菌甲醛脱氢酶基因faldh及其植物表达载体的构建方法和应用,提供了能提高甲醛耐受能力的短芽孢杆菌faldh基因的核苷酸序列和其编码的蛋白质的氨基酸序列,用该基因构建植物表达载体pK2GW7-35S-faldh,并通过农杆菌介导转入植物中,使植物提高对甲醛的吸收、代谢和耐受能力,克服植物本身甲醛代谢关键酶表达水平较低,吸收代谢甲醛能力低的缺点;实验证明含有甲醛脱氢酶faldh基因的转基因植物吸收液体中甲醛的速率优于野生型;通过转基因植物表达的FALDH蛋白有氧化甲醛的能力,且稳定性好,能一直在植物中发挥作用;FALDH蛋白在转基因植物中的过量表达使其代谢气体甲醛的能力大大提高。
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公开(公告)号:CN103045640A
公开(公告)日:2013-04-17
申请号:CN201310000464.8
申请日:2013-01-04
Applicant: 昆明理工大学
Abstract: 本发明公开了一种丹波黑大豆SGF14a基因的植物表达载体及其应用,本发明首先发现在铝胁迫下RB根中SGF14a基因被显著诱导表达,然后从RB根中克隆得到SGF14a基因的全长序列,并通过Gateway技术构建了植物表达载体pK-35S-SGF14a,经农杆菌介导的叶盘转化法转化野生型烟草,筛选得到能够正确表达SGF14a基因的转基因烟草,最后对获得的转基因烟草进行了耐铝能力分析。实验结果表明在烟草中过量表达外源SGF14a基因能够显著提高烟草的耐铝及耐受酸性土壤能力。本发明中首次报道SGF14a基因能够参与铝胁迫应答,并且通过Gateway技术构建的植物表达载体pK-35S-SGF14a和获得的转基因烟草能够为进一步研究SGF14a基因的在铝胁迫应答中的功能奠定基础,以及为研究铝胁迫应答机制提供了新的基因资源和基因工程操作手段。
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公开(公告)号:CN102586279A
公开(公告)日:2012-07-18
申请号:CN201210064992.5
申请日:2012-01-13
Applicant: 昆明理工大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/70 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种云南红梨PyTTG1基因及其原核表达载体,具体涉及一种云南红梨花青素合成、根毛、叶毛和毛状体发生发育的调控蛋白PyTTG1基因及其原核表达载体,并将原核表达载体应用在制备云南红梨花青素合成及叶毛、毛状体发生发育调控蛋白PyTTG1中,具体是利用RT-PCR技术从云南红梨果皮中克隆PyTTG1基因全长cDNA,然后再利用原核表达载体将该全长基因在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行表达纯化,获得云南红梨PyTTG1纯化蛋白,及云南红梨PyTTG1纯化蛋白在研究TTG1-MYB、TTG1-bHLH等互作及MYB-bHLH-WD40模型构建中的应用。
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公开(公告)号:CN102277370A
公开(公告)日:2011-12-14
申请号:CN201010172023.2
申请日:2010-05-14
Applicant: 昆明理工大学
Abstract: 本发明公开了一种高效表达博伊丁假丝酵母甲酸脱氢酶蛋白的原核表达载体pET28a-FDH。该载体是含有博伊丁假丝酵母甲酸脱氢酶基因(FDH)的原核表达载体。本发明从博伊丁假丝酵母中克隆出FDH基因,用T7启动子控制它在大肠杆菌中的表达,表达的重组蛋白质40%以可溶性形式存在于上清中(占大肠杆菌可溶性总蛋白40%),60%存在于包涵体中,通过割胶纯化从包涵体中很容易获得高纯度的重组蛋白质,可作为抗原用于FDH特异性抗体的制备。用亲和层析很容易从大肠杆菌可溶性总蛋白中纯化出有活性的重组FDH蛋白质,用于FDH酶制剂的生产及其生化特性分析。
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公开(公告)号:CN102134575A
公开(公告)日:2011-07-27
申请号:CN201010172010.5
申请日:2010-05-14
Applicant: 昆明理工大学
Abstract: 本发明公开了一种高效表达大肠杆菌S-甲酰谷胱甘肽水解酶蛋白的原核表达载体pET32a-FGH。该载体是含有大肠杆菌S-甲酰谷胱甘肽水解酶基因(FGH)的原核表达载体。本发明从大肠杆菌中克隆出FGH基因,用T7启动子控制它在大肠杆菌中的表达,表达的重组蛋白质60%以上形成包涵体,从包涵体中很容易纯化高纯度的重组蛋白质,可作为抗原用于FGH抗体的制备。
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