利用β-1,6-葡聚糖酶制备低聚龙胆糖的方法及其应用

    公开(公告)号:CN111593034B

    公开(公告)日:2022-07-05

    申请号:CN202010590774.X

    申请日:2020-06-24

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 吴敬 夏伟 徐星豪

    Abstract: 本发明涉及利用β‑1,6‑葡聚糖酶制备低聚龙胆糖的方法及其应用,属于基因工程和发酵工程技术领域。本发明首先提供了一种利用对龙胆二糖具有转糖基活性的β‑1,6‑葡聚糖酶TcBgn,其可在加酶量较低的情况下将葡萄糖转化为低聚龙胆糖,且转化率高,可显著降低生产成本。本发明还将β‑1,6‑葡聚糖酶与β‑葡萄糖苷酶双酶复配制备低聚龙胆糖,利用双酶复配体系将葡萄糖转化为龙胆二糖和龙胆三糖,转化率高,且显著提高了龙胆三糖在产物中的比重。因而,β‑1,6‑葡聚糖酶单酶或双酶复配制备低聚龙胆糖的方法,均具有较好的工业化应用价值。

    一种含α-1,2糖苷键低热量糊精的制备方法

    公开(公告)号:CN112553271A

    公开(公告)日:2021-03-26

    申请号:CN202011476048.1

    申请日:2020-12-15

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种含α‑1,2糖苷键低热量糊精的制备方法,属于功能食品领域。可用作食物和饲料应用中的耐消化纤维。所述低热量糊精,平均分子量约为1000~5000Da,聚合度约5~30,α‑1,2糖苷键含量约2‑50%。所述低热量糊精的制备方法为:以淀粉为底物,利用4,6‑α‑葡萄糖基转移酶Gtf B及分支蔗糖酶△N123‑GBD‑CD2进行酶促反应制得低热量糊精粗品,经热稳定α‑淀粉酶、淀粉葡萄糖苷酶酶解后利用酵母菌体分离、干燥,制得含α‑1,2糖苷键的低热量糊精。该方法条件温和,键型复杂,成本低。这种淀粉衍生的分支α‑葡聚糖在食品工业中具有广泛应用。

    一种复合酶催化纤维素制备低聚龙胆糖的方法及其应用

    公开(公告)号:CN112063605A

    公开(公告)日:2020-12-11

    申请号:CN202011015802.1

    申请日:2020-09-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种复合酶催化纤维素制备低聚龙胆糖的方法及其应用,属于酶工程技术领域。本发明在Thermotoga sp.KOL6来源的β‑葡萄糖苷酶基础上,通过定点突变的方式获得突变体,以巴斯德毕赤酵母KM71为表达宿主,实现突变体基因在毕赤酵母中的高效表达。同时,本发明的复合酶可有效转化纤维素生成低聚龙胆糖;以磷酸膨胀纤维素和葡萄糖为底物酶催化转化制备低聚龙胆糖,复配纤维素酶和β‑葡萄糖苷酶突变体Q34G/Y200F时,原料的总转化率19.1%,相比野生型β‑葡萄糖苷酶分别提高74.7%。本发明的技术方案具有很高的工业应用价值。

    一种耐热β-葡萄糖苷酶在低聚龙胆糖制备中的应用

    公开(公告)号:CN111411117B

    公开(公告)日:2020-12-01

    申请号:CN202010342196.8

    申请日:2020-04-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种耐热β‑葡萄糖苷酶在低聚龙胆糖制备中的应用,属于基因工程和酶工程领域。本发明将来源于Thermotoga sp.KOL6的β‑葡萄糖苷酶TSBGl的基因以Bacillus subtilis WSH11为表达宿主,实现tsbgl基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达。所述β‑葡萄糖苷酶TSBGl的最适温度为90℃,最适pH为6.0,在90℃下具有较高的热稳定性。将所述β‑葡萄糖苷酶添加至以1200g/L葡萄糖为底物的反应体系中,在pH6.0,90℃下进行酶反应,低聚龙胆糖的产量达到178.2g/L。此酶适合食品等工业应用的需要,可用于低聚龙胆糖的工业化生产。

    一种游离型非甲醇诱导毕赤酵母表达载体的构建及其应用

    公开(公告)号:CN110184291A

    公开(公告)日:2019-08-30

    申请号:CN201910476834.2

    申请日:2019-06-03

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种游离型非甲醇诱导毕赤酵母表达载体的构建及其在酶重组表达中的应用,属于基因工程技术领域。本发明所述非甲醇诱导毕赤酵母表达载体是将乳酸克鲁维酵母自主复制序列PARS2和毕赤酵母启动子PGCW14序列插入载体骨架,属于带自我复制序列的游离型载体构建得到的。利用该载体构建的游离型重组毕赤酵母工程菌相对通用的整合型重组毕赤酵母工程菌,分泌生产重组酶的能力显著提升。此外,其发酵原料来源广泛,生产成本较低。

    一种多功能过氧化物酶在聚乙烯降解中的应用

    公开(公告)号:CN114888054B

    公开(公告)日:2023-10-27

    申请号:CN202210692907.3

    申请日:2022-06-17

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种多功能过氧化物酶在聚乙烯降解中的应用,属于酶工程技术领域。本发明提供了刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)来源的多功能过氧化物酶在聚乙烯降解中的新用途,并通过优化酶解反应体系,以苹果酸缓冲液提供反应环境,通过H2O2启动酶解反应,在30℃,200rpm条件下反应72h后的聚乙烯薄膜部分降解为醛、酮、醇、酸类等小分子化合物,使降解后的薄膜表面存在明显刻蚀,亲水性得到明显增强。本发明提供的降解紫外处理聚乙烯薄膜的方法,反应条件温和、环境友好在塑料产品生物降解领域具备较为理想的应用前景。

    GOS转化率提升的β-半乳糖苷酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN114214304B

    公开(公告)日:2023-07-18

    申请号:CN202111219626.8

    申请日:2021-10-20

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了GOS转化率提升的β‑半乳糖苷酶突变体及其应用,属于酶工程技术领域。本发明中所使用的野生型β‑半乳糖苷酶已经具备良好的GOS合成能力,在此基础上,对其进行改造,得到的突变体在制备GOS的总转化率上相较于野生型有着一定的提升,其中突变体Y406F、R441K和Y563F的转化率分别为63.81%、64.27%以及63.58%,此转化率已属于行业内领先水平。同时,在本发明中,野生型生产的GOS中具有1,6键型的异乳糖产率为23.33%,突变体Y406F和Y563F生产的GOS中具有1,6键型的异乳糖的产率较野生型有进一步的提升。长链GOS产率也较野生型有了显著提升,增加了GOS的益生作用。

    漆酶介体体系在聚乙烯降解中的应用

    公开(公告)号:CN116063734A

    公开(公告)日:2023-05-05

    申请号:CN202210810855.5

    申请日:2022-07-11

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了漆酶介体体系在聚乙烯降解中的应用,属于酶工程技术领域。本发明将Botrytis aclada(BaLac)和Bacillus subtilis(BsLac)来源的漆酶加入含有紫外处理聚乙烯薄膜(UVPE)、pH 5和6,50mM柠檬酸缓冲液中,并添加10mM介体溶液启动酶解反应,反应120h,可使紫外处理聚乙烯薄膜(UVPE)部分降解为醛、酮、醇、酸类等小分子化合物,使薄膜表面出现明显刻蚀,重均分子量显著降低。本发明提供的降解紫外处理聚乙烯薄膜的方法反应条件温和、环境友好,在塑料降解领域具备极高的应用前景。

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