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公开(公告)号：CN106676123B
公开(公告)日：2019-10-22
申请号：CN201710116825.3
申请日：2017-03-01
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明涉及一种葡萄糖脱氢酶突变体的筛选方法，属于突变体筛选技术领域。本发明的筛选方法包括以下步骤：对葡萄糖脱氢酶基因进行随机突变，得到葡萄糖脱氢酶的突变文库；将所述突变文库中的基因构建到pET28a‑INP质粒上，得到pET28a‑INP‑GDH质粒，将所述pET28a‑INP‑GDH质粒转化入大肠杆菌中，得到基于冰核蛋白的细菌表面展示系统菌株；将所述基于冰核蛋白的细菌表面展示系统菌株涂布到蓝白斑筛选培养基上，筛选颜色为白色的菌落为葡萄糖脱氢酶突变菌株。本发明提供的筛选方法简单、快捷、实用，可以极大节省葡萄糖脱氢酶突变体的筛选时间。
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公开(公告)号：CN106676123A
公开(公告)日：2017-05-17
申请号：CN201710116825.3
申请日：2017-03-01
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明涉及一种葡萄糖脱氢酶突变体的筛选方法，属于突变体筛选技术领域。本发明的筛选方法包括以下步骤：对葡萄糖脱氢酶基因进行随机突变，得到葡萄糖脱氢酶的突变文库；将所述突变文库中的基因构建到pET28a‑INP质粒上，得到pET28a‑INP‑GDH质粒，将所述pET28a‑INP‑GDH质粒转化入大肠杆菌中，得到基于冰核蛋白的细菌表面展示系统菌株；将所述基于冰核蛋白的细菌表面展示系统菌株涂布到蓝白斑筛选培养基上，筛选颜色为白色的菌落为葡萄糖脱氢酶突变菌株。本发明提供的筛选方法简单、快捷、实用，可以极大节省葡萄糖脱氢酶突变体的筛选时间。
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公开(公告)号：CN103834698B
公开(公告)日：2017-01-25
申请号：CN201410113472.8
申请日：2014-03-25
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种通过温度转换发酵生产含γ-亚麻酸油脂的方法。涉及生产γ-亚麻酸油脂的方法。将小克银汉霉菌接种于PDA平板培养基中培养，再将菌块接种于新PDA平板培养基中再培养，新PDA平板培养基上的菌块接种于另一新的PDA平板培养基中培养；然后将另一新的PDA平板培养基上的菌块接种于装有种子培养基的摇瓶中，pH值调至5～7，培养后，得摇瓶种子；将所得摇瓶种子接种于装有发酵培养基的摇瓶中，pH值调至5～7，先于30～40℃培养6～8d，转速为100～250rpm，再于10～20℃培养4～6d，转速为100～250rpm，得发酵液，抽滤，润洗，得湿菌体，烘干、研磨、萃取，得到含γ-亚麻酸油脂。
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公开(公告)号：CN104263689B
公开(公告)日：2016-10-26
申请号：CN201410553955.X
申请日：2014-10-17
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种用于生产甘油酸的热带醋杆菌的驯化方法，涉及一种菌株的驯化方法。热带醋杆菌CHM061701保藏号CGMCC NO.9417。将热带醋杆菌接种至葡萄糖琼脂培养基平板中培养；取较大的单菌落转接至氮源优化琼脂培养基平板中培养，反复转接培养，取较大的单菌落转接至甘油优化琼脂培养基平板中培养；在甘油优化琼脂培养基平板中反复转接培养，取较大的单菌落转接至一级种子葡萄糖液体培养基中培养，得一级种子液；将一级种子液转接至二级种子葡萄糖液体培养基中培养，得二级种子液；将二级种子液转接至发酵培养基中培养，发酵结束后测定发酵液中甘油酸的含量；将获得的甘油酸驯化菌株经连续传代稳定性考察，获得经驯化的菌株。
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公开(公告)号：CN106011196A
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201610339049.9
申请日：2016-05-19
Applicant: 厦门大学
CPC classification number: C12P19/04 , C08B37/0003
Abstract: 一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖的提纯方法，涉及胞外多糖。从保种的MRS固体培养基上选取单菌落接至MRS液体培养基中培养得已活化的发酵液；在MRS液体培养基中添加终浓度为10mM的CaCl2，取已活化的发酵液进行转接，得转接后的发酵液，取培养0，2，4，6，12，24h的1ml转接后的发酵液测定OD600、pH值；取中转接后的发酵液，除去细胞与蛋白之后，加入冰乙醇，冰箱里过夜，离心，去除上清留沉淀，将沉淀冷冻干燥后取出，透析，再冷冻干燥后即得粗胞外多糖，然后溶解于纯水中，取经过透析冻干后的粗胞外多糖样品溶于蒸馏水中，配制20mg/mL的溶液，离心，取上清液离子柱层析得鼠李糖乳杆菌胞外多糖。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105385675A
公开(公告)日：2016-03-09
申请号：CN201511031787.9
申请日：2015-12-31
Applicant: 厦门大学
CPC classification number: C12N11/08 , C12N9/20 , C12Y301/01003
Abstract: 一种南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法，涉及脂肪酶B。提供酶的贮存稳定性高、便于回收且可重复利用，有利于工业化应用的一种南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法。1)先将巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)CALB进行斜面种子培养、活化种子培养和一级种子培养，然后再接入含BSM培养基的发酵罐中发酵培养，获得南极假丝酵母脂肪酶B；斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)CALB，保藏编号：CGMCC NO.10277；2)将预处理后的树脂加入含有南极假丝酵母脂肪酶B发酵液的发酵罐，使树脂处于悬浮状态下吸附；3)将步骤2)中吸附后的树脂筛出，水洗，冷冻干燥。
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公开(公告)号：CN104450810A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410800525.3
申请日：2013-09-13
Applicant: 厦门大学
CPC classification number: C12P7/6427
Abstract: 一种制备花生四烯酸的方法，涉及花生四烯酸。对高山被孢霉产ARA的培养条件进行优化，在基础培养基分批发酵，在优化培养基中以酵母粉和玉米浆为氮源分批发酵，再以酵母粉为氮源进行的发酵罐放大实验，对高山被孢霉进行高糖驯化及对驯化后的菌种在混合氮源优化培养基中进行2L分批发酵，在2L发酵罐中装入混合氮源优化培养基，在当葡萄糖浓度降至10g/L时，流加600g/L葡萄糖，使残糖控制在10g/L，培养168h后开始收获干菌体、油脂和ARA。
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公开(公告)号：CN104263689A
公开(公告)日：2015-01-07
申请号：CN201410553955.X
申请日：2014-10-17
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种用于生产甘油酸的热带醋杆菌的驯化方法，涉及一种菌株的驯化方法。热带醋杆菌CHM061701保藏号CGMCC NO.9417。将热带醋杆菌接种至葡萄糖琼脂培养基平板中培养；取较大的单菌落转接至氮源优化琼脂培养基平板中培养，反复转接培养，取较大的单菌落转接至甘油优化琼脂培养基平板中培养；在甘油优化琼脂培养基平板中反复转接培养，取较大的单菌落转接至一级种子葡萄糖液体培养基中培养，得一级种子液；将一级种子液转接至二级种子葡萄糖液体培养基中培养，得二级种子液；将二级种子液转接至发酵培养基中培养，发酵结束后测定发酵液中甘油酸的含量；将获得的甘油酸驯化菌株经连续传代稳定性考察，获得经驯化的菌株。
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公开(公告)号：CN101831387B
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN201010150460.4
申请日：2010-04-16
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种全合成培养基及其制备方法和用于培养裂殖壶菌的方法，涉及一种微生物的培养基及其用于培养裂殖壶菌的方法。全合成培养基包括碳源、氮源、维生素和无机盐。在无机盐溶液中加入碳源及氮源，灭菌得溶液A；将维生素溶液过滤，再加到溶液A中混合即得全合成培养基。全合成培养基用于培养裂殖壶菌的方法为菌种活化：将裂殖壶菌菌种转接于斜面培养；一级种子：用接种环挑取活化的菌种，接入装有种子培养基的容器中培养；二级种子：取一级种子，接入装有种子培养基的容器中培养；扩大培养：将二级种子以1％～4％的接种量接种于全合成培养基上培养，裂殖壶菌的生物量达到58g/L，总油脂约占细胞干重的55％，DHA产量为9.8g/L。
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公开(公告)号：CN102492024A
公开(公告)日：2012-06-13
申请号：CN201110409339.3
申请日：2011-12-09
Applicant: 厦门大学
Abstract: 从发酵液中提取达托霉素的方法，涉及一种发酵液。发酵液离心后得上清液，经有机溶剂萃取后，达托霉素进入有机相，再用醋酸钠-醋酸缓冲液反萃取至水相得反萃取液；将反萃取液经疏水作用层析纯化，用异丙醇-醋酸钠-醋酸缓冲液恒定浓度洗脱得疏水作用层析洗脱液，再经离子交换层析分离纯化，得离子交换洗脱液，再以醋酸钠-醋酸缓冲液为基础液，加入中性盐洗脱，完成从发酵液中提取达托霉素。综合运用有机溶剂萃取和树脂层析技术，运用该方法可从发酵液中分离纯化出纯度高于85％的达托霉素。相对于其他的分离纯化工艺，操作条件温和，成本低，可有效减少达托霉素酸解。达托霉素作为一种新型的脂肽类抗生素，具有良好的医用市场前景。
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