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公开(公告)号:CN114752532A
公开(公告)日:2022-07-15
申请号:CN202210479049.4
申请日:2022-04-29
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N1/20 , G01N33/569 , G01N33/531 , C07K16/12 , C12P21/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一株能同时黏附定植和改变小鼠易感性的大肠杆菌分离株F4NT,所述大肠杆菌分离株F4NT保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2022090,保藏日期为2022年1月18日。该分离株同时表达Peg和F4两种菌毛黏附素抗原,在小鼠体内持续定植7天并诱导小鼠产生针对Peg菌毛和F4菌毛的特异性抗体,其中Peg菌毛抗体滴度在21天达1:8,具有作为诱导小鼠宿主产生免疫应答的大肠杆菌活疫苗候选株的潜在应用价值。值得注意的是,产肠毒素致病性大肠杆菌(ETEC)F4 ETEC标准株C83902仅能在小鼠体内1天内存在(黏附定植),且无特异性抗体产生。
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公开(公告)号:CN112481287B
公开(公告)日:2022-01-28
申请号:CN202011289887.2
申请日:2020-11-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开一种重组质粒,重组质粒为将sef14操纵子基因插入表达载体pBR322中即得。本发明还公开了一种重组菌株,重组菌株为将所述重组质粒导入惰性载体菌S9即得。本发明还公开该重组菌株的制备方法和应用。本发明首次将SEF14在惰性载体菌S9进行了表面展呈表达单一菌毛SEF14,可以避免出现背景非特异性反应的同时特异性检测肠炎沙门氏菌感染,具有快速、特异、敏感、简单和价廉等优点,同时满足现场和大规模检测的要求。本发明的SEF14功能性菌毛在惰性载体上表面展呈表达单一菌毛SEF14后可用于检测监测肠炎沙门氏菌感染鸡群,仅需5‑10μL上述检测样品和等体积的检测试剂,利用简单的玻板凝集反应,通过现场肉眼观察反应结果和准确判断动物是否被肠炎沙门氏菌感染。
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公开(公告)号:CN110257276A
公开(公告)日:2019-09-20
申请号:CN201910424381.9
申请日:2019-05-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N1/20 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种惰性载体大肠杆菌及其潜在应用,基于该大肠杆菌分离株具备惰性载体特性,有望开发成一种用于间接凝集试验的载体菌。所述惰性载体大肠杆菌已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC),保藏地址为中国北京,保藏编号为CGMCC No.17339,保藏日期为2019年3月18日,分类命名为大肠埃希氏菌(Escherichia coli),菌株代号SE1。该大肠杆菌分离株来自健康鸡群,在较高的工作浓度下的细菌数量与不同遗传背景的多种鸡源血清不发生任何肉眼可见的凝集反应,即与鸡源血清不产生非特异性凝集反应,我们称该大肠杆菌为惰性载体大肠杆菌。本发明为开发简便快速间接凝集检测方法提供了一种惰性载体菌和其潜在应用。
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公开(公告)号:CN119775368A
公开(公告)日:2025-04-08
申请号:CN202411788236.6
申请日:2024-12-06
Applicant: 扬州大学 , 浙江美保龙生物技术有限公司
IPC: C07K14/03 , C12N15/38 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了猪伪狂犬病病毒(PRV)表面囊膜糖蛋白上的保守性B细胞表位肽及其在PRV抗体诊断中的应用。本发明的PRV gE保守的线性B细胞表位,其序列GPGGGD,命名为GD‑GG。该B细胞表位能在惰性载体S9H菌体表面功能性展呈表达,基于S9H菌体表面展呈表达的GD‑GG建立的GD‑GG—抗体直接介导的凝集试验检测方法仅特异性检出PRV感染抗体,与其他猪传染病抗体无交叉反应。而GD‑GG序列的其中两个氨基酸GG突变为RR,即GPGGGD突变为GPRRGD,则与PRV感染抗体不发生特异性结合反应。该诊断方法具有特异性强、操作便捷和结果判定直观等优点,有望成为PRV感染精准可视化诊断的技术手段。
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公开(公告)号:CN118496323B
公开(公告)日:2024-11-22
申请号:CN202410695247.3
申请日:2024-05-31
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV‑2)囊膜主要糖蛋白GP5的保守中和表位QT7、核酸分子、表达载体、中和抗体及其应用。本发明将中和表位QT7插入鸡白痢沙门菌Peg菌毛,导入惰性载体菌S9H获得重组菌,重组菌表面能功能性表达展呈中和表位QT7,与猪源免疫血清在玻板上混合,2 min内通过观察是否产生肉眼可见的凝集颗粒判定反应的阴阳性,该凝集试验可以定性定量测定凝集抗体,且中和表位抗原QT7‑‑抗体直接介导的凝集试验测定的凝集抗体水平与经典的细胞中和试验测试的PRRSV‑2中和抗体水平呈强正相关,从而可使用本发明检测血清样品中是否存在抗PRRSV‑2中和抗体及中和抗体水平,在PRRSV‑2疫苗免疫效果,抗PRRSV‑2中和抗体评估和防控中具有潜在的应用前景。
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公开(公告)号:CN118652311A
公开(公告)日:2024-09-17
申请号:CN202410958515.6
申请日:2024-07-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了结核分枝杆菌复合体成员Ⅶ型分泌系统效应蛋白CFP10保守功能性B细胞表位及其在特异性诊断结核病中的应用。本发明CFP10保守功能性B细胞表位在惰性载体S9菌株表面功能性表达展呈,能够特异性识别结核分枝杆菌复合体成员感染性抗体血清样本,菌体表面表达该保守表位的S9重组菌体作为凝集抗原,与结核分枝杆菌复合体成员感染的抗体血清样本发生特异性反应并形成肉眼可见的抗原‑抗体复合物,而与其他分枝杆菌属成员感染阳性血清和卡介苗免疫血清无交叉反应。本发明的检测系统具有特异、快速、便捷等优势,有望成为结核分枝杆菌复合体成员感染的血清学诊断检测的技术手段。
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公开(公告)号:CN118620042A
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202410652936.6
申请日:2024-05-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C12N15/50 , C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开一株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株,产生抗新型冠状病毒(SARS‑CoV‑2)囊膜刺突S蛋白表面SNNLDSKVGG(SG10)表位的mAb,公开了特异、简捷、快速筛选靶向SG10表位的mAb的制备筛选方法。将SG10插入沙门菌V型分泌系统MisL载客域,在菌体表面表达展呈该表位作为优势免疫原,免疫小鼠制备杂交瘤细胞的免疫小鼠B细胞;将SG10表位插入沙门菌PEG菌毛操纵子并导入惰性载体S9菌,该表位在S9菌体表面功能性表达展呈,基于表达该表位的重组S9菌建立的SG10表位直接介导的间接凝集检测方法能特异性识别分泌mAb的杂交瘤细胞上清,产生SG10表位‑mAb直接介导的特异性凝集试验,精准和便捷地筛选出分泌抗SG10表位的mAb的阳性杂交瘤细胞,病毒感染细胞的间接免疫荧光方法验证该mAb特异性。
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公开(公告)号:CN118496323A
公开(公告)日:2024-08-16
申请号:CN202410695247.3
申请日:2024-05-31
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV‑2)囊膜主要糖蛋白GP5的保守中和表位QT7、核酸分子、表达载体、中和抗体及其应用。本发明将中和表位QT7插入鸡白痢沙门菌Peg菌毛,导入惰性载体菌S9H获得重组菌,重组菌表面能功能性表达展呈中和表位QT7,与猪源免疫血清在玻板上混合,2 min内通过观察是否产生肉眼可见的凝集颗粒判定反应的阴阳性,该凝集试验可以定性定量测定凝集抗体,且中和表位抗原QT7‑‑抗体直接介导的凝集试验测定的凝集抗体水平与经典的细胞中和试验测试的PRRSV‑2中和抗体水平呈强正相关,从而可使用本发明检测血清样品中是否存在抗PRRSV‑2中和抗体及中和抗体水平,在PRRSV‑2疫苗免疫效果,抗PRRSV‑2中和抗体评估和防控中具有潜在的应用前景。
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公开(公告)号:CN118480084A
公开(公告)日:2024-08-13
申请号:CN202410511457.2
申请日:2024-04-26
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种侵袭素D保守的B细胞表位及其在诊断沙门氏菌属病原体内感染中的应用。本发明所述的SipD存在目前公开所有基因组信息的912株肠道沙门氏菌和9株邦戈尔沙门氏菌中保守。在SipD蛋白保守的序列中,通过SipD B细胞表位预测获得都具有的保守的B细胞表位特征序列SEENNDERTL。该B细胞表位能在惰性载体S9菌体表面功能性表达展呈,基于S9菌体表面表达SL10建立的间接凝集检测方法仅与沙门氏菌属病原感染的血清样品发生特异性反应,与肠杆菌科其他的病原感染阳性血清无交叉反应以及无非特异性反应。该诊断方法具有特异、敏感、便捷和成本低廉等优势,有望成为沙门氏菌属病原体内感染诊断的技术手段。
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公开(公告)号:CN116715737B
公开(公告)日:2024-02-23
申请号:CN202211488632.8
申请日:2022-11-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C12N15/50 , C12N15/74 , C12N1/21 , G01N33/68 , G01N33/569 , C07K16/10 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了新型冠状病毒受体结合域B细胞表位的靶标抗原及其在鸡白痢沙门氏菌Peg菌毛展呈表达及其凝集抗体检测中的应用。本发明能检测到新冠灭活疫苗特异性凝集抗体,该敏感性显著高于传统血清学检测技术,且能检测到新冠灭活疫苗产生的特异性凝集抗体效价。鉴于本发明具有快速特异、敏感、便捷和成本低廉等优势,有望成为SARS‑CoV‑2早期感染诊断以及新冠疫苗免疫检测监测评估的重要技术和平台。
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