一种表达SEF14功能性菌毛的重组菌及其应用

    公开(公告)号:CN112481287B

    公开(公告)日:2022-01-28

    申请号:CN202011289887.2

    申请日:2020-11-17

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开一种重组质粒,重组质粒为将sef14操纵子基因插入表达载体pBR322中即得。本发明还公开了一种重组菌株,重组菌株为将所述重组质粒导入惰性载体菌S9即得。本发明还公开该重组菌株的制备方法和应用。本发明首次将SEF14在惰性载体菌S9进行了表面展呈表达单一菌毛SEF14,可以避免出现背景非特异性反应的同时特异性检测肠炎沙门氏菌感染,具有快速、特异、敏感、简单和价廉等优点,同时满足现场和大规模检测的要求。本发明的SEF14功能性菌毛在惰性载体上表面展呈表达单一菌毛SEF14后可用于检测监测肠炎沙门氏菌感染鸡群,仅需5‑10μL上述检测样品和等体积的检测试剂,利用简单的玻板凝集反应,通过现场肉眼观察反应结果和准确判断动物是否被肠炎沙门氏菌感染。

    一种惰性载体大肠杆菌及其潜在应用

    公开(公告)号:CN110257276A

    公开(公告)日:2019-09-20

    申请号:CN201910424381.9

    申请日:2019-05-21

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种惰性载体大肠杆菌及其潜在应用,基于该大肠杆菌分离株具备惰性载体特性,有望开发成一种用于间接凝集试验的载体菌。所述惰性载体大肠杆菌已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC),保藏地址为中国北京,保藏编号为CGMCC No.17339,保藏日期为2019年3月18日,分类命名为大肠埃希氏菌(Escherichia coli),菌株代号SE1。该大肠杆菌分离株来自健康鸡群,在较高的工作浓度下的细菌数量与不同遗传背景的多种鸡源血清不发生任何肉眼可见的凝集反应,即与鸡源血清不产生非特异性凝集反应,我们称该大肠杆菌为惰性载体大肠杆菌。本发明为开发简便快速间接凝集检测方法提供了一种惰性载体菌和其潜在应用。

    SARS-CoV-2冠状病毒囊膜表面S蛋白抗原表位及其单克隆抗体的制备筛选方法和应用

    公开(公告)号:CN118620042A

    公开(公告)日:2024-09-10

    申请号:CN202410652936.6

    申请日:2024-05-24

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开一株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株,产生抗新型冠状病毒(SARS‑CoV‑2)囊膜刺突S蛋白表面SNNLDSKVGG(SG10)表位的mAb,公开了特异、简捷、快速筛选靶向SG10表位的mAb的制备筛选方法。将SG10插入沙门菌V型分泌系统MisL载客域,在菌体表面表达展呈该表位作为优势免疫原,免疫小鼠制备杂交瘤细胞的免疫小鼠B细胞;将SG10表位插入沙门菌PEG菌毛操纵子并导入惰性载体S9菌,该表位在S9菌体表面功能性表达展呈,基于表达该表位的重组S9菌建立的SG10表位直接介导的间接凝集检测方法能特异性识别分泌mAb的杂交瘤细胞上清,产生SG10表位‑mAb直接介导的特异性凝集试验,精准和便捷地筛选出分泌抗SG10表位的mAb的阳性杂交瘤细胞,病毒感染细胞的间接免疫荧光方法验证该mAb特异性。

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