一种特异性识别甲氧苄啶的核酸适配体及其筛选和应用

    公开(公告)号:CN114540359A

    公开(公告)日:2022-05-27

    申请号:CN202210048863.0

    申请日:2022-01-17

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种特异性识别甲氧苄啶的核酸适配体及其筛选和应用,所述核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示序列。本发明填补了关于甲氧苄啶特异性适配体序列的空白;相比于目前现有的其他检测甲氧苄啶的技术,SELEX技术筛选出的核酸适配体TMP‑1能够高亲和力、高特异性的结合甲氧苄啶,后续基于该核酸适配体的检测技术可实现对食品中甲氧苄啶的直接检测;基于该适配体的检测方法无需大型昂贵的仪器设备,无需复杂的样品前处理,无需专业的技术人员操作,具有操作简单、成本低等优点。

    一种复合膜传感器及其检测副溶血性弧菌的方法

    公开(公告)号:CN108226135B

    公开(公告)日:2020-12-29

    申请号:CN201810076439.0

    申请日:2018-01-26

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供了一种基于适配体识别的AU‑PDMS复合膜检测副溶血性弧菌的方法。通过将特异性识别副溶血性弧菌适配体固定在纳米金表面上并修饰拉曼信号分子作为信号探针,将特异性识别副溶血性弧菌固定在由电荷作用形成的APT‑AU‑PDMS复合膜上作为检测基底,建立了一个“三明治”的夹心结构检测传感器。该方法对于副溶血性弧菌的最低检测限可达到12cfu/mL,且可应用于虾肉样品中副溶血性弧菌的检测,结果准确可靠。

    基于时间分辨荧光标记-适配体检测玉米赤霉烯酮的方法

    公开(公告)号:CN107084951B

    公开(公告)日:2020-11-17

    申请号:CN201710232945.X

    申请日:2017-04-11

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供了一种基于时间分辨荧光标记‑适配体识别检测玉米赤霉烯酮的方法,用于小麦、谷物,饲料及其制品等中玉米赤霉烯酮含量的检测。本发明充分利用时间分辨荧光纳米材料长荧光寿命的特点,有效避免样本生物背景荧光干扰,提高检测灵敏度,同时结合玉米赤霉烯酮特异核酸适配体功能化磁性纳米材料磁分离样品富集效应,让大宗样本能很快浓缩有效提高样本浓度上千倍,可以大大缩短检测周期。

    一种特异性识别副溶血性弧菌的优化适配体序列及其应用

    公开(公告)号:CN110093350A

    公开(公告)日:2019-08-06

    申请号:CN201910042343.7

    申请日:2019-01-17

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种能特异性识别副溶血性弧菌的适配体,所述适配体的核苷酸序列如SEQ.ID.No.1所示。本发明以副溶血性弧菌为靶标,在SELEX筛选获得的原始序列的基础上,结合剪裁,定向突变,以及LNA取代等手段,获得了能以高亲和力及特异性识别结合副溶血性弧菌的优化适配体序列,并将最优适配体用于样品中副溶血性弧菌的分离富集。本发明为副溶血性弧菌的检测提供了稳定性良好、亲和力高、易制备、易修饰和标记的高特异性检测识别元件和应用实例。

    一种基于上转换发光纳米材料和金纳米棒之间发光共振能量转移检测赭曲霉毒素A的方法

    公开(公告)号:CN105372213B

    公开(公告)日:2018-09-11

    申请号:CN201510633405.3

    申请日:2015-09-29

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种基于上转换发光纳米材料和金纳米棒之间发光共振能量转移检测赭曲霉毒素A的方法,用于小麦及其制品等中赭曲霉毒素A(OTA)含量的检测。通过将上转换发光材料(NaYF4:Yb0.286,Er0.0286)与赭曲霉毒素A核酸适配体连接形成能量供体探针,再通过碱基互补配对原则与适配体互补寡核苷酸单链修饰的金纳米棒(纵横比为2.5左右)能量受体探针形成纳米复合物,发生发光共振能量转移现象(LRET),达到上转换发光淬灭的目的。当检测体系中存在OTA时,OTA与OTA适配体特异性结合,从而使双链解链,通过监控657nm处的上转换发光信号强度,能够定量检测OTA,线性范围为0.05‑100ng/mL,检出限为0.027ng/mL。本发明用于OTA检测具有灵敏度高、快速简便的优点。并应用于啤酒、小麦样品的检测,结果准确可靠。

    一组特异性识别不同生长时期大肠杆菌O157:H7的寡核苷酸适配体

    公开(公告)号:CN108396029A

    公开(公告)日:2018-08-14

    申请号:CN201810190997.X

    申请日:2018-03-08

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 王周平 邹颖 段诺

    Abstract: 本发明公开了一组能特异性识别不同生长时期的大肠杆菌O157:H7的寡核苷酸适配体,属于食品安全生物技术领域。本发明应用Whole cell-SELEX技术,以不同生长时期的大肠杆菌O157:H7为靶标,经过14轮的反复筛选、亲和力和特异性试验的分析验证,获得了一组针对不同生长时期大肠杆菌O157:H7亲和性和特异性均良好的核酸适配体。该适配体在准确、快速、灵敏检测食品中大肠杆菌O157:H7方面具有广泛的应用前景。

    一种基于适配体修饰纳米金比色检测玉米赤霉烯酮的方法

    公开(公告)号:CN107389665A

    公开(公告)日:2017-11-24

    申请号:CN201710487619.3

    申请日:2017-06-23

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: G01N21/763

    Abstract: 本发明涉及一种基于适配体修饰纳米金比色检测玉米赤霉烯酮的方法,将巯基化玉米赤霉烯酮适配体DNA1和巯基化适配体的互补链DNA2分别与13±2nm纳米金连接形成适配体-纳米金探针和互补链-纳米金探针,通过竞争法进行玉米赤霉烯酮的可视化检测。当待测物中含有靶标时,靶标与适配体结合,使适配体-纳米金探针和互补链-纳米金探针呈游离状态,在高盐浓度下,纳米金容易发生聚集,颜色由红色变成蓝色;当待测物中不含靶标时,适配体与其互补链碱基互补配对结合,使适配体-纳米金探针和互补链-纳米金探针呈稳定的网络结构,在高盐浓度下,纳米金不发生聚集,颜色仍为红色。随着靶标浓度的增大,纳米金颜色由红色逐渐变为蓝色,通过测定溶液在200~800nm的紫外-可见光谱,即可实现对待测物中玉米赤霉烯酮的定量检测。

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