修饰crRNA在CRISPR/Cpf1基因编辑系统中的应用

    公开(公告)号:CN106244591A

    公开(公告)日:2016-12-21

    申请号:CN201610703716.7

    申请日:2016-08-23

    Abstract: 本发明公开了CRISPR/Cpf1系统在基因编辑中的应用。所述CRISPR/Cpf1系统中的crRNA为修饰crRNA;所述修饰的方式为脱氧核糖核酸修饰;所述脱氧核糖核酸修饰的方法为:在所述crRNA的5’末端增加1~3个脱氧核糖核酸和/或3’末端增加1~3个脱氧核糖核酸;所述脱氧核糖核酸为胸腺嘧啶脱氧核苷酸。实验证明,化学合成且具有修饰的crRNA用于AsCRISPR/Cpf1系统或FnCRISPR/Cpf1系统均造成hAAVS1基因和THUMPD3-AS1基因的突变,即均有一定的基因编辑能力。因此,修饰crRNA在利用CRISPR/Cpf1系统进行基因编辑中具有重要的应用价值。

    化学合成的crRNA用于CRISPR/Cpf1系统在基因编辑中的应用

    公开(公告)号:CN105907785A

    公开(公告)日:2016-08-31

    申请号:CN201610292302.X

    申请日:2016-05-05

    Abstract: 本发明公开了CRISPR/Cpf1系统在基因编辑中的应用;所述CRISPR/Cpf1系统中包括a1)或a2):a1)化学合成的crRNA;a2)表达crRNA的载体。所述CRISPR/Cpf1系统为c1)或c2)或c3)或c4):c1)LbCRISPR/Cpf1系统;c2)Lb2CRISPR/Cpf1系统;c3)FnCRISPR/Cpf1系统;c4)AsCRISPR/Cpf1系统。实验证明,化学合成的crRNA能有效行使引导Cpf1剪切编辑特定靶位点的作用,且效率很高。载体表达的crRNA或化学合成的crRNA用于CRISPR/Cpf1系统在基因编辑中均具有重要的应用价值。

    一种SmallRNAcDNA文库的构建方法

    公开(公告)号:CN104630211A

    公开(公告)日:2015-05-20

    申请号:CN201310572334.1

    申请日:2013-11-15

    Abstract: 本发明公开了一种Small RNA cDNA文库的构建方法。本发明公开的一组DNA分子,该组分子由如下(1)-(4)所示的四种分子组成:(1)SEQ ID No.1所示的DNA分子;(2)SEQ ID No.2所示的DNA分子;(3)SEQ ID No.3所示的DNA分子;(4)SEQ ID No.4所示的DNA分子。本发明公开的一种Small RNA快速分离的方法解决了目前丙烯酰胺凝胶电泳分离Small RNA时间长,操作复杂,要求较高、毒性大的问题。并且,本发明公开的一种Small RNA cDNA文库的构建方法减少了非特异性产物,增加了目的产物含量,并且该方法较传统方法简便快捷。

    微小RNA及其应用
    56.
    发明授权

    公开(公告)号:CN101684488B

    公开(公告)日:2013-10-09

    申请号:CN200810200479.8

    申请日:2008-09-25

    Abstract: 本发明公开了一组用于强直性脊柱炎诊断的寡聚核苷酸,包括逆转录引物、探针、正向引物和反向引物,以及所述寡聚核苷酸用于微小RNA表达量检测的用途。寡聚核苷酸包括用于检测下述微小RNA:hsa-miR-17-5P、hsa-miR-126-3P、hsa-miR-27-a、hsa-miR-29-a的探针和引物。本发明进一步提供了包含上述寡聚核苷酸的试剂盒及检测方法,对强直性脊柱炎患者的微小RNA进行杂交检测,能检测出患者样本中上述微小RNA的表达量高于正常人,可作为强直性脊柱炎的诊断试剂。

    人miR-1238反义核酸及其应用

    公开(公告)号:CN102140464B

    公开(公告)日:2013-09-11

    申请号:CN201010612865.5

    申请日:2010-12-30

    Abstract: 本发明公开一种抑制人microRNA-1238表达的反义寡聚核苷酸及其应用。该反义寡聚核苷酸特异性结合于人miR-1238,包含与5’-CUUCCUCGUCUGUCUGCCCC-3’核苷酸序列中至少13个连续核苷酸互补的序列,特别是序列:5’-GGGGCAGACAGACGAGGAAG-3’。本发明的反义寡聚核苷酸可以为核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸或二者的嵌合体,并可对链中任一核苷酸进行修饰。本发明的miR-1238反义寡核苷酸能够有效抑制人脑胶质瘤细胞中miR-1238表达,抑制该细胞生长和增殖,从而有效治疗脑胶质瘤及其他miR-1238高表达的肿瘤。

    人miR-328反义核酸及其应用
    58.
    发明公开

    公开(公告)号:CN102533755A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201010612947.X

    申请日:2010-12-30

    Abstract: 本发明公开一种抑制人microRNA-328表达的反义寡聚核苷酸及其应用。该反义寡聚核苷酸特异性结合于人miR-328,包含与5’-CUGGCCCUCUCUGCCCUUCCGU-3’核苷酸序列中至少13个连续核苷酸互补的序列,特别是序列:5’-ACGGAAGGGCAGAGAGGGCCAG-3’。本发明的反义寡聚核苷酸可以为核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸或二者的嵌合体,并可对链中任一核苷酸进行修饰。本发明的miR-328反义寡核苷酸能够有效抑制人脑胶质瘤细胞中miR-328表达,抑制该细胞生长和增殖,从而有效治疗脑胶质瘤及其他miR-328高表达的肿瘤。

    人miR-1233反义核酸及其应用

    公开(公告)号:CN102140469A

    公开(公告)日:2011-08-03

    申请号:CN201010613006.8

    申请日:2010-12-30

    Abstract: 本发明公开一种抑制人microRNA-1233表达的反义寡聚核苷酸及其应用。该反义寡聚核苷酸特异性结合于人miR-1233,包含与5’-UGAGCCCUGUCCUCCCGCAG-3’核苷酸序列中至少13个连续核苷酸互补的序列,特别是序列:5’-CUGCGGGAGGACAGGGCUCA-3’。本发明的反义寡聚核苷酸可以为核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸或二者的嵌合体,并可对链中任一核苷酸进行修饰。本发明的miR-1233反义寡核苷酸能够有效抑制人脑胶质瘤细胞中miR-1233表达,抑制该细胞生长和增殖,从而有效治疗脑胶质瘤及其他miR-1233高表达的肿瘤。

    人miR-1825反义核酸及其应用

    公开(公告)号:CN102140466A

    公开(公告)日:2011-08-03

    申请号:CN201010612909.4

    申请日:2010-12-30

    Abstract: 本发明公开一种抑制人microRNA-1825表达的反义寡聚核苷酸及其应用。该反义寡聚核苷酸特异性结合于人miR-1825,包含与5’-UCCAGUGCCCUCCUCUCC-3’核苷酸序列中至少13个连续核苷酸互补的序列,特别是序列:5’-GGAGAGGAGGGCACUGGA-3’。本发明的反义寡聚核苷酸可以为核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸或二者的嵌合体,并可对链中任一核苷酸进行修饰。本发明的miR-1825反义寡核苷酸能够有效抑制人脑胶质瘤细胞中miR-1825表达,抑制该细胞生长和增殖,从而有效治疗脑胶质瘤及其他miR-1825高表达的肿瘤。

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