公开(公告)号：CN101724597A

公开(公告)日：2010-06-09

申请号：CN200910263146.4

申请日：2009-12-16

Applicant: 江南大学

Inventor： 张荣珍 ,  徐岩 ,  王珊珊

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12P7/22 ,  C12R1/19

Abstract: mRNA二级结构优化提高(R)-羰基还原酶的生物转化效率的方法，属于生物催化不对称转化技术领域。本发明通过优化(R)-羰基还原酶的mRNA翻译起始区二级结构，并构建了相应的突变重组菌，其分类命名为大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET32a-mrcr，保藏编号CCTCC No：M209289。该突变菌株不仅实现了(R)-羰基还原酶的高效表达，而且有效提高了该酶蛋白活力及其生物转化效率，为高底物浓度下高效制备(R)-苯基乙二醇提供了新型研究思路与途径。

公开(公告)号：CN101717745A

公开(公告)日：2010-06-02

申请号：CN200910263147.9

申请日：2009-12-16

Applicant: 江南大学

Inventor： 张荣珍 ,  徐岩 ,  耿亚维

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12P7/22 ,  C12R1/19

Abstract: 一株羰基还原酶重组菌高效制备(S)-苯基乙二醇的方法，属于生物催化不对称转化技术领域。本发明提供了一种新型的近平滑假丝酵母(Candidaparapsilosis)羰基还原酶基因scr II，Genbank序列号为GQ411433，将scrII插入载体pET28a构建重组质粒pETSCR II，再转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞，通过含100μg/mL卡那霉素的LB平板筛选，获得重组菌株E.coliBL21/pETSCRII，保藏编号CCTCC NO：M209290。该重组菌细胞不对称还原5g/L 2-羰基苯乙酮，催化获得(S)-苯基乙二醇，产物的光学纯度为100％，产率达98.1％。本发明为高效制备(S)-苯基乙二醇提供了新型功能基因和有效途径。

公开(公告)号：CN101368168A

公开(公告)日：2009-02-18

申请号：CN200810196686.0

申请日：2008-09-16

Applicant: 江南大学

Inventor： 张荣珍 ,  徐岩

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12P7/22 ,  C12R1/19

Abstract: 羰基还原酶和嘧啶核苷酸转氢酶偶联制备(S)－苯基乙二醇的方法，属于生物催化不对称转化技术领域。本发明将(R)－羰基还原酶和(S)－羰基还原酶和嘧啶核苷酸转氢酶A、B分别构建到两个共表达载体上，将构建的重组质粒pETDuet－rcr－scr和pACYCDuet－pnta－pntb共转化入大肠杆菌，获得重组菌株E.coli BL21(pETDuet－rcr－scr/pACYCDuet－pnta－pntb)，保藏编号CCTCC NO：M208126。该重组菌株不仅实现了从底物(R)－苯基乙二醇到产物(S)－苯基乙二醇的一步法转化，另一方面解除了转化反应中辅酶再生循环的限制；为高底物浓度下酶的催化反应与原位辅酶再生来生产手性醇提供了有效途径。