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公开(公告)号：CN119082062B
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202411317675.9
申请日：2024-09-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了理性改造7β‑羟基类固醇脱氢酶辅酶依赖性高效合成熊去氧胆酸，属于生物催化工程领域。本发明获得了酶活力提高和对辅因子NADH亲和力提高的Hs7β‑HSDH突变体A22T/Q23E/L45A/N46E，其酶活性提高了65.2倍，催化效率提高了44.9倍，以7K‑LCA为底物，以NADH为辅酶，突变体催化合成UDCA的产率可达到77.6％，与野生型酶相比，产量增加了13.9倍。与Bm7α‑HSDH偶联后，仅需添加0.5mM NADH，催化底物CDCA一锅法合成UDCA，突变体的产率达到90.1％，比野生型酶增加了11.5倍。
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公开(公告)号：CN119799803A
公开(公告)日：2025-04-11
申请号：CN202411801320.7
申请日：2024-12-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了耐热肌肉肌醇脱氢酶突变体级联体系高效合成表肌醇的方法，属于生物催化工程领域。本发明利用表达鲨肌醇脱氢酶突变体和耐热肌肉肌醇脱氢酶突变体的全细胞，两步级联催化肌肉肌醇合成表肌醇，区别于已报道的鲨肌醇以及D‑手性肌醇合成方法，在以肌肉肌醇为底物合成表肌醇的过程中，需要肌肉肌醇C4位置先脱氢，然后加氢，实现手性反转，由于底物和产物结构都是很对称的结构，酶在催化过程中往往难以专一识别，因此肌醇的不同手性化合物的合成一直是生物催化领域的重要难题。本发明提供了一种全新的生物催化合成表肌醇的途径，并通过酶改造使表肌醇产量提高为1.89g/L，转化率为52.6％，均为目前公开报道的最高水平。
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公开(公告)号：CN116814577A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310648366.9
申请日：2023-06-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了高通量筛选L‑苏氨酸转醛酶突变体高效合成β‑羟基‑α‑氨基酸。属于生物催化工程领域。本发明将可视化高通量筛选方法成功应用到L‑苏氨酸转醛酶突变体的筛选中。通过同源建模，结构比对确定了影响L‑苏氨酸转醛酶催化能力的关键氨基酸，成功获得催化效率与立体选择性显著提升的突变株。获得的突变体P71T/V57Q/H69T催化对甲磺酰基苯丝氨酸可以得到达到78.9％的产率与97.0％的非对映体选择性。同时，本发明还将优势突变体成功应用到其他来源的L‑苏氨酸转醛酶中，获得催化性能更加优良的突变体。是目前国内外报道的最高水平。
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公开(公告)号：CN116286418A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202211012930.X
申请日：2022-08-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了牛乳铁蛋白在毕赤氏酵母中的异源表达及抑菌性研究，属于生物工程领域。本发明中牛乳铁蛋白通过密码子优化，在26℃、pH 6.0的条件下，在本发明构建的重组菌中中实现了可溶性表达，表达量为40.2mg·L‑1；通过启动子优化后，在P.pastoris GS115/pGAP9K‑UBLF3中也实现了可溶性表达，表达量为70.5mg·L‑1。通过高拷贝筛选和发酵条件优化，牛乳铁蛋白在摇瓶中最优的蛋白表达条件下，重组牛乳铁蛋白的表达量为172.5mg·L‑1。筛选到的重组菌在3L发酵罐中的表达量提高至4303.4mg·L‑1。本发明为牛乳铁蛋白的异源表达和产业化生产提供了理论指导。
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公开(公告)号：CN112457941B
公开(公告)日：2022-04-15
申请号：CN202011576409.X
申请日：2020-12-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种黑果腺肋花楸果酒及其酿造方法，属于食品工程技术领域。本发明利用混菌发酵黑果腺肋花揪果酒的工艺，包括采用黑果腺肋花楸果实或果渣或果粉为原料，将原料经酶处理、依次接入假丝酵母Candida diversa Z3和酿酒酵母进行一次发酵、补料、发酵后皮渣分离、二次发酵、二次发酵后皮渣再分离、陈酿，得到黑果腺肋花楸果酒。本申请采用特定的果酒制备工艺，不仅改善了黑果肋腺花揪果酒的传统酿造过程中香气单薄的特点，使制作的果酒口感醇厚，果香浓郁，同时很好地降低了该果酒的酸度和涩感，促进了黑果腺肋花揪在食品领域的开发利用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112322567A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011355751.7
申请日：2020-11-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株耐酸高产ε‑聚赖氨酸的突变菌株及其应用，属于微生物育种领域。本发明通过对链霉菌进行基因工程改造并结合诱变育种，获得高产菌株PL‑2‑AH66。该菌株在摇瓶水平发酵的ε‑聚赖氨酸较出发菌株提高150％，在5L发酵罐水平的ε‑聚赖氨酸产量可以达到42.69g/L，生产强度7.115g/L/d。本发明的高产菌株PL‑2‑AH66具有良好的耐酸性能及耐受抗生素的性能，在pH2.0～3.0仍有较高的存活率，且遗传稳定性好，传代9传代后的ε‑聚赖氨酸产量与初代产量基本一致。该菌株发酵流程简单，工艺易于控制，ε‑聚赖氨酸产量提升幅度大，为ε‑聚赖氨酸的工业化生产及应用奠定了坚实的基础。
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公开(公告)号：CN106929491A
公开(公告)日：2017-07-07
申请号：CN201710144938.4
申请日：2017-03-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了(S)‑羰基还原酶异源聚合体及其在催化多苯环化合物的应用，属于生物催化技术领域。本发明构建了(S)‑羰基还原酶异源聚合体重组菌、获得了异源聚合体SCR/SCR2和SCR2/SCR3，并将其应用于催化2,4‑二氯二苯甲酮和2‑萘乙酮。本发明的异源聚合体SCR2/SCR3能催化2，4‑二氯二苯甲酮，酶活可达4.42U/mg，而同源聚合体SCR、SCR2和SCR3没有检测到催化上述底物的酶活。本发明利用异源聚合体蛋白的表达和纯化有效拓展了(S)‑羰基还原酶系(SCR，SCR2和SCR3)的生物催化的底物谱，为多苯类化合物的生物催化提供了新型氧化还原酶。
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公开(公告)号：CN106636019A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201611250627.8
申请日：2016-12-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了Sortase A介导的(S)‑羰基还原酶寡聚体高效催化(S)‑苯基乙二醇的合成，属于生物催化不对称转化术领域。本发明将引入SrtA识别序列的(S)‑羰基还原酶进行纯化，同时纯化得到SrtA纯酶，利用SrtA介导的连接反应，得到(S)‑羰基还原酶寡聚体；以分离得到的寡聚体为催化剂，2‑羟基苯乙酮为底物，反应时间3小时，产物(S)‑苯基乙二醇光学纯度达到100％e.e.，产率为99％；相比于原始酶，寡聚体的酶活提高了6倍，催化转化(S)‑苯基乙二醇的时间缩短了16倍，热稳定性提高了10℃。本发明利用SrtA介导的蛋白质连接解决了羰基还原酶催化效率低，热稳定性差的缺陷，为高效制备(S)‑苯基乙二醇提供了有效途径，为蛋白质改造领域提供了新的方向。
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公开(公告)号：CN104774778A
公开(公告)日：2015-07-15
申请号：CN201510206811.1
申请日：2015-04-28
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/0006 , C12P7/22 , C12Y101/01184
Abstract: 一株近平滑假丝酵母重组菌高效制备(S)-苯基乙二醇的方法，属于生物催化不对称转化技术领域。本发明提供了一株近平滑假丝酵母重组菌Candida parapsilosis pCP-scrII，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO：M2015107；本发明构建了外源蛋白在近平滑假丝酵母中的表达质粒，将(S)-羰基还原酶II整合到近平滑假丝酵母基因组，获得重组质粒pCP-scrII，电击转化近平滑假丝酵母，获得重组型近平滑假丝酵母菌株。通过优化生物转化反应条件，该重组菌催化转化2-羟基苯乙酮，获得产物(S)-苯基乙二醇，其光学纯度和产率均达到99.9%，为高效、低成本制备(S)-苯基乙二醇提供了有效途径，为生物催化手性醇的工业应用奠定了较坚实的基础。
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公开(公告)号：CN101985647B
公开(公告)日：2014-03-26
申请号：CN201010534411.0
申请日：2010-11-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 辅助底物耦联提高重组菌不对称转化(R)-苯基乙二醇效率的方法，属于生物催化不对称转化技术领域。本发明理性构建辅助底物耦联体系，实现良性的辅酶再生循环，大幅度提高(R)-苯基乙二醇的制备效率，以mRNA二级结构优化后的重组大肠杆菌BL21/pET32a-mrcr为生物催化剂，保藏编号CCTCCNO：M209289，通过添加不同比例的辅助底物甘油和/或异丙醇，提高底物的溶解性，构建底物耦联再生辅酶循环体系，使反应时间由48h缩短为1.5h，实现了高底物浓度下的(R)-苯基乙二醇的高效转化，这种经济简便的全细胞辅酶再生的方法，为重组菌高效、低成本制备光学纯(R)-苯基乙二醇提供了有效途径，以及手性醇的工业生产奠定了坚实的基础。
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