一种基于FRET的活细胞内Paxillin蛋白活性检测生物探针及其重组质粒

    公开(公告)号:CN115947866A

    公开(公告)日:2023-04-11

    申请号:CN202211187520.9

    申请日:2022-09-28

    Abstract: 本发明公开了一种基于FRET的活细胞内Paxillin蛋白活性检测生物探针及其重组质粒,所述探针包含FRET荧光蛋白对ECFP与Ypet、可折叠蛋白序列接头、Paxillin蛋白的主要功能结构域序列以及Paxillin蛋白的底物蛋白Src关键结合序列(Src homology 2domains,SH2)五个部分。探针转染细胞后能够在活细胞内自行表达,通过两种荧光蛋白的FRET效率的变化定量地反映活细胞内Paxillin蛋白活性程度的变化。该生物探针具有对细胞毒性作用微小、使用简便、实时动态检测、检测结果直观、成本低等优点。

    一种检测活细胞细胞膜与骨架间应力传递的生物探针

    公开(公告)号:CN113321741B

    公开(公告)日:2023-01-06

    申请号:CN202110583124.7

    申请日:2021-05-27

    Abstract: 本发明公开了一种检测活细胞细胞膜与骨架间应力传递的生物探针,其包括FRET荧光蛋白对、蛛丝蛋白Spider fibroin、JTK8蛋白的SH1结构域以及β‑actin五个部分。探针进入活细胞并表达,通过应力检测单元间的FRET效率变化定量检测活细胞内细胞膜与骨架间应力的变化。该生物探针实现了活细胞内细胞膜与骨架间应力传递的可视化检测,具有可动态检测、灵敏度高、时间分辨率高、成本低等特点。

    一种基于基因修饰得到人重组干扰素的融合基因、融合蛋白及其制备方法

    公开(公告)号:CN111172184A

    公开(公告)日:2020-05-19

    申请号:CN202010161676.4

    申请日:2020-03-10

    Abstract: 本发明公开了一种基于基因修饰得到的人重组干扰素融合基因、融合蛋白及其制备方法,属于生物制品技术领域。基于基因修饰得到人重组干扰素IFN-β的基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。由基因编码的融合蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明对人重组干扰素IFN-β基因序列进行扩增,与质粒pET-28a(+)相连接得到融合基因,再将融合基因转染至大肠杆菌BL21(DE3)中进行扩增和表达得到了可溶性的融合蛋白,解决了大肠杆菌中无法获得可溶性干扰素的问题。本发明还提供了从稳定细胞系获得高纯度的IFN-KE50蛋白的纯化方法,由于其具有组氨酸标签,用固定金属镍进行亲和层析可以对目标蛋白进行有效的纯化,纯化后蛋白纯度可达到94.8%。简化了后续的纯化步骤,并可以获得更高的纯度。

    一种利用PDMS图章精准控制单个细胞形状的方法

    公开(公告)号:CN110628618A

    公开(公告)日:2019-12-31

    申请号:CN201910921374.X

    申请日:2019-09-26

    Inventor: 刘波 王贤萌

    Abstract: 本发明提供一种利用PDMS图章精准控制单个细胞形状的方法,属于细胞生物学技术领域,是一种精准控制单个细胞边界的方法,能够改变细胞的形状,用于特定的细胞实验。该方法首先设计特定尺寸的微图案阵列,干法刻蚀制造相应的硅板,再利用硅板浇筑二甲基硅氧烷PDMS得到图章,在图章的微图案表面滴加纤连蛋白,并将纤连蛋白拓印到经疏水处理的玻璃基底表面,形成细胞生长的亲水微图案区域。在此玻璃基底上种植细胞,即可约束细胞的粘附边界,控制细胞的生长形状。

    一种检测活细胞细胞膜表面张力变化的生物探针

    公开(公告)号:CN106399338B

    公开(公告)日:2019-05-14

    申请号:CN201610752206.9

    申请日:2016-08-29

    Abstract: 本发明属于细胞生物学及分子生物学技术领域,是一种基于FRET技术的生物探针,它能够动态地检测活细胞细胞膜表面张力的变化,具体公开了一种检测活细胞细胞膜表面张力变化的生物探针。该探针包括FRET荧光蛋白对ECFP与YPet、弹性序列Linker、Lyn序列以及K‑ras序列五个部分。该探针与pcDNA3.1(+)的重组质粒转染到活细胞后,可以在细胞中自发表达出荧光蛋白融合探针,定性地检测细胞膜张力的变化,且对细胞原有功能没有影响。该探针实现了在活体细胞内对细胞膜表面张力变化的动态检测,具有成本低、对细胞无毒副作用等特点,为研究细胞膜张力变化提供了一种可视化工具。

    一种多指标联合检测标志性蛋白纸芯片

    公开(公告)号:CN109655617A

    公开(公告)日:2019-04-19

    申请号:CN201910048051.4

    申请日:2019-01-18

    Abstract: 本发明涉及一种多指标联合检测标志性蛋白纸芯片,属于疾病检测技术领域。纸芯片分为两部分:检测通道区和吸水区。检测通道区通过在硝酸纤维素膜上喷蜡打印矩形蜡区分隔出相邻蜡区之间的亲水性检测通道。检测通道分样品区、反应区及显色区,为检测反应的场所。吸水区通过吸水滤纸与检测区部分重叠,提供层析动力并吸收多余反应物。样品中的标志性蛋白通过层析至反应区,与胶体金包被的特异抗体结合;显色区将检测结果以肉眼可见的红色条带方式呈现,使得纸芯片能适用于日常家庭诊断。本发明具有较高准确率,为疾病相关标志性蛋白的联合检测提供了一种简单快速的工具。

    一种用于细胞高效抓捕的新型微流控阵列

    公开(公告)号:CN109097245A

    公开(公告)日:2018-12-28

    申请号:CN201810823719.3

    申请日:2018-07-25

    Inventor: 刘波 耿春阳

    Abstract: 本发明属于细胞捕获装置技术领域,涉及一种用于细胞高效抓捕的新型微流控阵列,该微流控阵列的单体是由一段圆弧和对应的弦围成的弓形微柱,高30~50μm;弓形微柱的弦与流体方向平行,并与相邻微柱的圆弧面一一对应;相邻两列弓形微柱的中心线平行,并交错分布,相邻两行弓形微柱阵列的中心直线平行。本发明提供的微流控阵列结构简单,便于制作加工,后续可应用于微流控芯片临床检测,增加其对肿瘤细胞的抓捕率和检测的敏感性,有助于癌症的早期检测发现。

    主被动频率响应切换控制方法

    公开(公告)号:CN108288858A

    公开(公告)日:2018-07-17

    申请号:CN201711366554.3

    申请日:2017-12-18

    Abstract: 本发明涉及电力技术领域,尤其涉及一种主被动频率响应切换控制方法,具体是一种大功率缺失故障下的频率响应控制方法。本发明包括:对于一个两区域电网,用实直线代表区域间联络线,虚线代表通信线路,A区为扰动区,B区为非扰动区:第一、建立单元火电机组数学模型,第二、建立互联电网数学模型。本发明实现了频率响应由分散自主控制到集中协调控制,由反馈控制到前馈控制、由校正控制到预防控制的转变,能在不增加频率响应设施的前提下,提高系统整体频率响应能力,从而提升大扰动下的频率稳定抵御能力。在大扰动下频率下降阶段有效拦截频率下降,避免系统低频减载,在频率恢复阶段使系统尽快恢复稳定,避免系统在主动控制过程中发生频率振荡。

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