公开(公告)号：CN111172184A

公开(公告)日：2020-05-19

申请号：CN202010161676.4

申请日：2020-03-10

Applicant: 大连理工大学

Inventor： 何炜 ,  孙彬玉 ,  程昉 ,  李明洋 ,  董继程 ,  刘波

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K19/00 ,  C07K1/22 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种基于基因修饰得到的人重组干扰素融合基因、融合蛋白及其制备方法，属于生物制品技术领域。基于基因修饰得到人重组干扰素IFN-β的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。由基因编码的融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明对人重组干扰素IFN-β基因序列进行扩增，与质粒pET-28a(+)相连接得到融合基因，再将融合基因转染至大肠杆菌BL21(DE3)中进行扩增和表达得到了可溶性的融合蛋白，解决了大肠杆菌中无法获得可溶性干扰素的问题。本发明还提供了从稳定细胞系获得高纯度的IFN-KE50蛋白的纯化方法，由于其具有组氨酸标签，用固定金属镍进行亲和层析可以对目标蛋白进行有效的纯化，纯化后蛋白纯度可达到94.8％。简化了后续的纯化步骤，并可以获得更高的纯度。